林華堅(jiān) 張梓豪 孟江 王淑美

中圖分類號(hào) R283 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2020）10-1197-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.10.08

摘 要 目的：評(píng)價(jià)干姜及其炮制品色差值與活性成分含量的相關(guān)性。方法：采用高效液相色譜法測(cè)定6種活性成分的含量，采用色彩色差計(jì)測(cè)定干姜及其炮制品的色差值[明度（L*）、紅綠色軸分量（a*）、黃藍(lán)色軸分量（b*）]。采用SPSS 24.0軟件對(duì)色差值與活性成分含量進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果：姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇和10-姜酚檢測(cè)質(zhì)量濃度的線性范圍分別為2.65～105.90、10.15～406.00、4.87～194.80、5.28～211.20、6.14～245.70、7.02～280.80 μg/mL（r均大于0.999）;定量限分別為7.46、13.68、14.37、16.62、17.03、17.99 ng，檢測(cè)限分別為2.24、4.11、4.31、4.99、5.11、5.40 ng;精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD均小于3%;平均加樣回收率分別為101.34%、102.14%、101.22%，103.12%、103.74%、103.54%，103.06%、98.55%、99.43%，99.36%、103.51%、101.21%，100.85%、99.42%、99.60%，100.39%、97.69%、103.84%（RSD均小于3%，n=3）;含量分別為0～0.66、0.06～7.57、0.03～1.45、0.29～3.47、0.15～2.85、0.04～2.83 mg/g。色差值L*、b*與干姜不同炮制程度呈極顯著負(fù)相關(guān)（P<0.01），a*與炮制程度呈正相關(guān)（P<0.05）;干姜炮制前后L*、b*與姜酮含量呈極顯著負(fù)相關(guān)，與其余5種成分呈極顯著正相關(guān)（P<0.01）;a*與姜酮呈極顯著正相關(guān)（P<0.01），與其余5種成分無(wú)相關(guān)性（P>0.05）;干姜及其炮制品與姜酮含量呈極顯著正相關(guān)，與其余5種成分含量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P<0.01）。結(jié)論：干姜及其炮制品的色差值與其活性成分含量相關(guān)，即隨炮制程度的加重，其a*增加，L*、b*降低;姜酮含量升高，6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚含量降低。

關(guān)鍵詞 干姜;炮制品;高效液相色譜法;色彩色差計(jì);活性成分;含量;色差值;相關(guān)性分析

Correlation Study of Color Difference Values and Active Constituent Contents in Crude and Processed Zingiber officinale

LIN Huajian，ZHANG Zihao，MENG Jiang，WANG Shumei（School of Traditional Chinese Medicine， Guangdong Pharmaceutical University/Key Laboratory of Digital Quality Evaluation of Chinese Materia Medica， State Administration of Traditional Chinese Medicine/Engineering Technology Research Center for Chinese Materia Medica Quality of Guangdong Universities， Guangzhou 510006， China）

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To evaluate the correlation between color difference values and active constituent contents of crude and processed Zingiber officinale. METHODS： HPLC method was adopted to determint the content of 6 active constituents. The color difference values of crude and processed Z. officinale [lightness （L*）， red-green axis component （a*）， yellow-blue axis component （b*）] were determined by chromatic aberration meter. SPSS 24.0 software was adopted for the correlation analysis between color difference values and active constituent contents. RESULTS： The linear range of zingiberone， 6-gingerol， 8-gingerol， 6-shogaol， diacetoxy-6-gingerol and 10-gingerol were 2.65-105.90， 10.15-406.00， 4.87-194.80， 5.28-211.20， 6.14-245.70， 7.02-280.80 μg/mL （r>0.999）. The limits of quantification were 7.46，13.68，14.37，16.62，17.03，17.99 ng， and the limits of detection were 2.24，4.11，4.31，4.99，5.11，5.40 ng， respectively. RSDs of precision， stability， and repeatability tests were all lower than 3%. The average recovery rates were 101.34%， 102.14%， 101.22%; 103.12%， 103.74%， 103.54%; 103.06%， 98.55%， 99.43%; 99.36%， 103.51%， 101.21%; 100.85%， 99.42%， 99.60%; 100.39%， 97.69%， 103.84% （RSD were all lower than 3%，n=3）， respectively. The contents of them were 0-0.66， 0.06-7.57， 0.03-1.45， 0.29-3.47， 0.15-2.85， 0.04-2.83 mg/g， respectively. L* and b* values were negative correlated with the processing degree of Z. officinale significantly （P<0.01）， a* showed a significantly positive correlation with the processing degree （P<0.05）. L*and b* values showed a significantly negative correlation with the content of zingiberone before and after processing， but positively correlated with the other five components （P<0.01）. a* showed a significantly positive correlation with the content of zingiberone， but had no correlation with other five components （P>0.05）. The crude and processed Z. officinale were positive correlated with the content of zingiberone， negatively correlated with other five components （P<0.01）. CONCLUSIONS： There is a certain correlation between the color difference values of crude and processed Z. officinale and the contents of their active constituents. With the deepening of the processing， a* values is increased， L* values and b* values is decreased; the content of zingiberone increases， the contents of 6-gingerol， 8-gingerol， 6-shogaol， diacetoxy-6-gingerol， 10-gingerol reduce.

KEYWORDS? ?Crude Zingiber officinale; Processed product; HPLC; Chromatric aberration meter; Active constituent; Content; Color difference values; Correlation analysis

干姜為姜科植物姜（Zingiber officinale Rosc.）的干燥根莖，是一種藥食同源的常見(jiàn)中藥。該藥性辛、熱，具有溫中散寒、回陽(yáng)通脈、溫肺化飲的功效[1]。干姜在臨床上使用的炮制品種包括炮姜和姜炭，其中炮姜辛燥之性較干姜弱，但溫經(jīng)作用緩和持久，用于溫經(jīng)止痛[2];姜炭辛味消失，溫經(jīng)作用弱于炮姜，長(zhǎng)于止血[2]。干姜及其炮制品主要含有姜辣素類活性成分，包括6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、6-姜烯酚、姜酮、二乙酰氧基-6-姜二醇等化合物[3-5]，具有抗氧化、解熱抗炎、改善心血管系統(tǒng)等作用[6]。目前，干姜及其炮制品的質(zhì)量控制主要包括6-姜酚的含量測(cè)定和傳統(tǒng)的性狀、顏色鑒別[1]。2015年版《中國(guó)藥典》（一部）對(duì)干姜、炮姜和姜炭的顏色鑒別描述分別為“表面灰黃色”“表面棕褐色”“表面黑色”[1]，但顏色判斷易受主觀因素的影響，缺乏客觀評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，且顏色的界定過(guò)于模糊，不利于飲片的規(guī)范化生產(chǎn)和質(zhì)量評(píng)價(jià);加之干姜飲片的炮制程度與其成分、顏色的相關(guān)性尚未有文獻(xiàn)報(bào)道，因此需要建立一種科學(xué)、有效的適用于評(píng)價(jià)干姜及其不同炮制品的客觀量化方法。

色彩色差計(jì)是通過(guò)模擬人眼對(duì)顏色的判斷，得到樣品顏色的3個(gè)刺激值X、Y和Z[7]，再根據(jù)國(guó)際照明委員會(huì)Lab顏色空間原理計(jì)算得出色差值明度（L*）、紅綠色軸分量（a*）、黃藍(lán)色軸分量（b*）（其中，“+a*”表示紅色，“-a*”表示綠色;“+b*”表示黃色，“-b*”表示藍(lán)色）[8]，最后通過(guò)L*、a*、b*將顏色準(zhǔn)確量化。近年來(lái)，色彩色差計(jì)已在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，如石典花等[9]通過(guò)色彩色差計(jì)驗(yàn)證了傳統(tǒng)方法鑒別丹參“色紅者佳”的科學(xué)性;黃學(xué)思等[10]通過(guò)色彩色差計(jì)測(cè)定不同炮制程度的檳榔顏色，發(fā)現(xiàn)該方法能用于判別中藥炮制的“火候”?；诖耍狙芯坎捎蒙噬钣?jì)對(duì)干姜、炮姜和姜炭的顏色進(jìn)行客觀、數(shù)字化處理，對(duì)傳統(tǒng)的顏色指標(biāo)進(jìn)行客觀量化，并分析其與主要活性成分含量的相關(guān)性，旨在為干姜及其炮制品的鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考。

1 材料

1.1 儀器

1200型高效液相色譜儀，包括電光二極陣列管檢測(cè)器、色譜工作站（美國(guó)Agilent公司）;CR-410型色彩色差計(jì)，配備CR-A50型粉末測(cè)試盒（日本Konica Minolta公司）;YB-2500A型高速多功能粉碎機(jī)（永康市速鋒工貿(mào)有限公司）;CPA225D型十萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)Sartorius公司）;KQ-300DE型超聲波清洗器（上海凌科實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司）。

1.2 藥品與試劑

姜酮對(duì)照品（批號(hào)：131010，純度：≥98%）、6-姜烯酚對(duì)照品（批號(hào)：130912，純度：≥98%）均購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司;6-姜酚對(duì)照品（批號(hào)：130827，純度：≥98%）、8-姜酚對(duì)照品（批號(hào)：140422，純度：≥98%）、10-姜酚對(duì)照品（批號(hào)：140520，純度：≥98%）均購(gòu)自南通飛宇生物科技有限公司;二乙酰氧基-6-姜二醇對(duì)照品（本課題組自制，純度：≥98%）[11];乙腈、乙酸為色譜純，其余試劑均為分析純，水為蒸餾水。

16批干姜飲片（編號(hào)：GJ1～GJ16）由廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院劉基柱副教授鑒定，均為姜科植物姜（Z. officinale Rosc.）的干燥根莖。樣品采集后密封避光存放在干燥器中，并于2年內(nèi)完成試驗(yàn)，樣品信息來(lái)源見(jiàn)表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 干姜及其炮制品的制備

干姜：除去雜質(zhì)，略泡，洗凈，潤(rùn)透，切厚片，干燥，按2015年版《中國(guó)藥典》（四部）“0213炮制通則”[12]炮制。炮姜：取干姜用砂燙至鼓起，表面呈棕褐色，即得，共制備16批（編號(hào)：PJ1～PJ16）。姜炭：取干姜炒至表面黑色、內(nèi)部棕褐色，即得，共制備16批（編號(hào)：JT1～JT16）。

2.2 含量測(cè)定方法的建立

2.2.1 混合對(duì)照品溶液的制備 精密稱取姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚對(duì)照品各適量，分別加甲醇溶解，制成上述6種成分質(zhì)量濃度分別為0.706、0.580、0.974、0.528、0.410、0.468 mg/mL的單一對(duì)照品溶液。分別精密量取上述對(duì)照品溶液300、1 400、400、800、1 200、1 200 μL，加甲醇稀釋并定容于5 mL量瓶，混合均勻，制得6種成分質(zhì)量濃度分別為42.36、162.4、77.92、84.48、98.40、112.32 μg/mL的混合對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取干姜、炮姜、姜炭樣品粉末（過(guò)80目篩）各0.3 g，精密稱定，分別置于具塞錐形瓶中，加甲醇10 mL，超聲（功率：100 W，頻率：40 kHz，下同）提取40 min，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得3種供試品溶液。

2.2.3 空白對(duì)照溶液的制備 不加藥材樣品，其余按“2.2.2”項(xiàng)下方法“加甲醇10 mL……經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液”操作，即得。

2.2.4 色譜條件 色譜柱：UltimateTM XB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動(dòng)相：乙腈（A）-0.1%乙酸水溶液（B），梯度洗脫（0～10 min，10%A→25%A;10～20 min，25%A→35%A;20～55 min，35%A→75%A;55～90 min，75%A→90%A;90～100 min，90%A→100%A）;檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm;柱溫：30 ℃;流速：0.6 mL/min;進(jìn)樣量：10 μL。

2.2.5 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 精密量取上述混合對(duì)照品溶液、供試品溶液、空白對(duì)照溶液各10 μL，按“2.2.4”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，詳見(jiàn)圖1。結(jié)果，各成分的分離度均大于1.5，理論板數(shù)以姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇和10-姜酚峰計(jì)均大于5 000，空白對(duì)照對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。

2.2.6 線性關(guān)系考察 精密量取姜酮對(duì)照品溶液7.5、37.5、75、150、300 μL，6-姜酚對(duì)照品溶液35、175、350、700、1400 μL，8-姜酚對(duì)照品溶液10、50、100、200、400 μL，6-姜烯酚對(duì)照品溶液20、100、200、400、800 μL，二乙酰氧基-6-姜二醇和10-姜酚對(duì)照品溶液30、150、300、600、1 200 μL，用甲醇稀釋并定容于2 mL量瓶中，得系列質(zhì)量濃度的線性工作溶液，按“2.2.4”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。以待測(cè)成分質(zhì)量濃度（x，μg/mL）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2.7 定量限與檢測(cè)限考察 取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，用甲醇倍比稀釋，按“2.2.4”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以信噪比10 ∶ 1、3 ∶ 1分別計(jì)算定量限和檢測(cè)限。結(jié)果，姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚的定量限分別為7.46、13.68、14.37、16.62、17.03、17.99 ng，檢測(cè)限分別為2.24、4.11、4.31、4.99、5.11、5.40 ng。

2.2.8 精密度試驗(yàn) 精密量取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，按“2.2.4”項(xiàng)下色譜條件于同日內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄峰面積。結(jié)果，姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚峰面積的RSD 分別為1.92%、1.66%、1.98%、1.55%、1.35%、1.96%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液（編號(hào)：PJ10）適量，分別于室溫下放置0、3、6、9、12、24 h時(shí)，按“2.2.4”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚峰面積的RSD 分別為0.27%、0.30%、0.64%、0.35%、0.41%、0.31%（n=6），表明供試品溶液在室溫下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.10 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取樣品粉末（編號(hào)：PJ10）適量，共6份，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2.4”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品中6種成分的含量。結(jié)果，姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚的平均含量分別為0.20、2.77、0.87、1.60、1.45、1.61 mg/g，RSD分別為2.07%、1.83%、2.05%、2.13%、2.42%、1.56%（n=6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.2.11 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量的樣品（編號(hào)：PJ10），每份約0.15 g，共9份，按待測(cè)成分含量的50%、100%、150%加入“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2.4”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算加樣回收率。結(jié)果，姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚的平均加樣回收率分別為101.34%、102.14%、101.22%，103.12%、103.74%、103.54%，103.06%、98.55%、99.43%，99.36%、103.51%、101.21%，100.85%、99.42%、99.60%，100.39%、97.69%、103.84%（RSD均小于3%，n=3）。

2.3 色澤測(cè)定方法的建立

2.3.1 測(cè)定方法與條件 分別取干姜、炮姜、姜炭樣品適量，粉碎后過(guò)80目篩，混合均勻，將樣品粉末置于色彩色差計(jì)中，測(cè)定樣品粉末顏色，每樣品平行測(cè)定3次，取平均值。色彩色差計(jì)測(cè)定條件為光源D65，標(biāo)準(zhǔn)觀察角度2°，照明口徑50 mm。經(jīng)白板校準(zhǔn)，以L*=100、a*=0、b*=0為參照校正色[13]，測(cè)得各樣品的L*、a*、b*。

2.3.2 精密度考察 取樣品（編號(hào)：GJ6）粉末適量，置于色彩色差計(jì)中，在同日內(nèi)按“2.3.1”項(xiàng)下測(cè)定條件連續(xù)測(cè)定5次。結(jié)果，L*、a*、b*的RSD分別為0.01%、0.41%、0.05%（n=5），表明本方法精密度良好。

2.3.3 樣品穩(wěn)定性考察 取樣品（編號(hào)：GJ6）粉末適量，置于色彩色差計(jì)中，按“2.3.1”項(xiàng)下測(cè)定條件連續(xù)5天在同一時(shí)刻測(cè)定樣品色差值。結(jié)果，L*、a*、b*的RSD分別為0.94%、1.96%、1.76%（n=5），表明樣品穩(wěn)定性良好。

2.3.4 不同光照強(qiáng)度的穩(wěn)定性考察 取樣品（編號(hào)：GJ6）粉末適量，置于色彩色差計(jì)中，按“2.3.1”項(xiàng)下測(cè)定條件分別于同日內(nèi)10：30、13：00、15：30、17：30、20：00時(shí)連續(xù)測(cè)定樣品色差值，共5次。結(jié)果，L*、a*、b*的RSD分別為0.54%、1.44%、0.95%（n=5），表明不同光照強(qiáng)度對(duì)試驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定性影響較小。

2.4 樣品含量及色澤的測(cè)定

精密稱取48批樣品粉末適量，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2.4”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品中6種成分的含量。另精密稱取48批樣品粉末適量，置于色彩色差計(jì)中，按“2.3.1”項(xiàng)下測(cè)定條件測(cè)定樣品色差值。每樣品平行操作3次，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.5 秩和檢驗(yàn)分析

采用SPSS 24.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。由于部分試驗(yàn)數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布且方差不齊，故采用秩和檢驗(yàn)分析。經(jīng)獨(dú)立樣本Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，得干姜、炮姜、姜炭L*、a*、b*的χ 2分別為41.805、35.639、41.796（P均小于0.01），而在獨(dú)立樣本中位數(shù)檢驗(yàn)中的χ 2分別為32.000、28.500、32.000（P均小于0.01），均拒絕假設(shè)H0（數(shù)據(jù)無(wú)差異），接受假設(shè)H1（數(shù)據(jù)有差異），表明干姜、炮姜、姜炭顏色有顯著性差異。

2.6 判別分析

將樣本按炮制類型分為3類（1類為干姜、2類為炮姜、3類為姜炭），以48批樣品作為訓(xùn)練集，采用SPSS 24.0軟件建立以L*、a*、b*為變量的干姜、炮姜、姜炭的判別函數(shù)，再用訓(xùn)練集回代驗(yàn)證。結(jié)果，在判別函數(shù)中，L*、a*、b*均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其λ值分別為0.019、0.134、0.024（λ值表示組間差異，范圍為0～1，其值越小表示組間差異越大[14]）。由于L*的λ值最接近0，表明組間差異最顯著，故認(rèn)為L(zhǎng)*在判別中貢獻(xiàn)率最大。根據(jù)Wilks Lambda檢驗(yàn)結(jié)果，建立2個(gè)典則判別函數(shù)，λ值分別為0.002、0.136，判別函數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），得到標(biāo)準(zhǔn)化典則判別函數(shù)1=0.462×L*-0.321×a*+0.782×b*，函數(shù)2=0.231×L*+1.190×a*-0.172×b*;非標(biāo)準(zhǔn)化典則判別函數(shù)分別為函數(shù)1=0.417×L*-0.691×a*+0.994×b*-24.467，函數(shù)2=0.208×L*+2.562×a*-0.219×b*-17.769，詳見(jiàn)圖2（組質(zhì)心表示數(shù)據(jù)分布的平均位置）。由圖2可知，干姜、炮姜、姜炭的色澤具有顯著區(qū)別。結(jié)果，16批干姜為1類，16批炮姜為2類，16批姜炭為3類，判別準(zhǔn)確率為100%，提示該模型具有理想的判別效果。

2.7 相關(guān)性分析

2.7.1 色澤與不同炮制程度的相關(guān)性 采用SPSS 24.0軟件對(duì)干姜、炮姜、姜炭與其L*、a*、b*進(jìn)行秩相關(guān)分析。Kedalls tau_b檢驗(yàn)結(jié)果顯示，L*、a*、b*與干姜、炮姜、姜炭的相關(guān)系數(shù)分別為-0.826（P<0.01）、0.176（P>0.05）、-0.825（P<0.01）。Spearmans rho檢驗(yàn)結(jié)果顯示，L*、a*、b*與干姜、炮姜、姜炭的相關(guān)系數(shù)分別為-0.943（P<0.01）、0.302（P<0.05）、-0.943（P<0.01）。這提示，L*、b*與干姜不同炮制程度呈極顯著負(fù)相關(guān)，a*與炮制程度相關(guān)性不強(qiáng)（P<0.05表示顯著相關(guān)，P<0.01表示極顯著相關(guān)，下同）。

2.7.2 色澤與含量的相關(guān)性 采用SPSS 24.0軟件對(duì)干姜、炮姜、姜炭中的6種成分含量與其L*、a*、b*進(jìn)行秩相關(guān)分析。Kendalls tau_b檢驗(yàn)和Spearmans rho檢驗(yàn)結(jié)果均顯示，干姜炮制前后，L*、b*與姜酮含量呈極顯著負(fù)相關(guān)，與其余5種成分呈極顯著正相關(guān);a*與姜酮呈極顯著正相關(guān)，與其余5種成分無(wú)相關(guān)性，詳見(jiàn)表4[“#”表示在0.05水平（雙側(cè)）上顯著相關(guān);“##”表示在0.01水平（雙側(cè)）上顯著相關(guān)]。

2.7.3 干姜、炮姜、姜炭與含量的相關(guān)性 將干姜、炮姜、姜炭與其所含的6種成分含量進(jìn)行秩相關(guān)分析。結(jié)果顯示，Kendalls tau_b檢驗(yàn)的相關(guān)系數(shù)分別為0.686、 -0.680、-0.630、-0.462、-0.679、-0.684，P均小于0.01;Spearmans rho檢驗(yàn)的相關(guān)系數(shù)分別為0.805、? ? ?-0.818、-0.773、-0.631、-0.816、-0.819，P均小于0.01。這提示，干姜、炮姜、姜炭與姜酮含量呈極顯著正相關(guān)，與其余5種成分含量呈極顯著負(fù)相關(guān)。

3 討論

在傳統(tǒng)的中藥鑒定方法中，其顏色的定義和描述大多依賴于研究者的主觀經(jīng)驗(yàn)和感受，結(jié)果缺乏客觀性與準(zhǔn)確性，加之中藥自身的復(fù)雜性，主觀判斷會(huì)影響藥材和飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果[15]?，F(xiàn)代色彩分析技術(shù)的發(fā)展可將人對(duì)顏色的主觀判斷進(jìn)行客觀量化，保證了顏色判斷的準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和重復(fù)性，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)[16]。目前，干姜及其不同炮制品的鑒別主要根據(jù)傳統(tǒng)的性狀、顏色進(jìn)行鑒定，也有文獻(xiàn)報(bào)道了多成分含量測(cè)定、指紋圖譜等內(nèi)容[17-18]，但顏色的客觀量化標(biāo)準(zhǔn)及與其內(nèi)在成分的相關(guān)性分析尚未有報(bào)道。因此，有必要對(duì)干姜炮制前后顏色進(jìn)行量化，分析顏色與成分之間的相關(guān)性，為評(píng)價(jià)干姜飲片質(zhì)量提供依據(jù)。

本研究通過(guò)測(cè)定干姜及其炮制品中6種活性成分的含量，發(fā)現(xiàn)這6種成分的含量均發(fā)生了一定變化。其中，姜酮為炮制后新生成的化合物，而6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚的含量均有所下降。本研究通過(guò)色彩色差計(jì)測(cè)定樣品的色差值，建立了干姜不同炮制程度的判別模型。結(jié)果顯示，該判別模型的判別準(zhǔn)確率為100%，提示該模型預(yù)測(cè)效果準(zhǔn)確，可實(shí)現(xiàn)對(duì)干姜及其炮制品快速、準(zhǔn)確的鑒別;同時(shí)將干姜及其炮制品的色差值與含有的6種成分含量進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)隨著炮制程度的加深，a*增加，L*、b*降低，姜酮含量升高，6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚含量降低，干姜、炮姜、姜炭與姜酮含量呈極顯著正相關(guān)，與其他5種成分含量呈極顯著負(fù)相關(guān)，故推測(cè)干姜炮制前后顏色的變化與其化學(xué)成分含量的變化有關(guān)。

綜上所述，干姜及其炮制品的色差值與其化學(xué)成分含量相關(guān)，即隨炮制程度的加重，其a*增加，L*、b*降低;姜酮含量升高，6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚含量降低。色彩色差計(jì)法操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短，能間接反映飲片的內(nèi)在質(zhì)量，為建立干姜及其炮制品新的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法提供了參考，可推廣至干姜的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系和干姜炮制過(guò)程的在線檢測(cè)中。

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（收稿日期：2019-10-15 修回日期：2020-03-31）

（編輯：陳 宏）