張?zhí)锪? 楊菲菲
摘要:目的:探討復(fù)合菌菇提取粉對(duì)小鼠免疫力的影響。方法:將SPF級(jí)昆明種小鼠160只隨機(jī)分為4個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每個(gè)實(shí)驗(yàn)組再隨機(jī)分為低、中、高劑量(0.21、0.42、1.25g/kg bw)組及對(duì)照組,連續(xù)給藥30天,分別進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn),并檢測(cè)抗體生成細(xì)胞、測(cè)定血清溶血素;同時(shí)進(jìn)行小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn),測(cè)定相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)。結(jié)果:0.42g/kg bw、1.25g/kg bw劑量組能增加小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)能力、抗體生成細(xì)胞數(shù)、血清半數(shù)溶血值、小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清能力,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);3個(gè)劑量組對(duì)小鼠體重、脾臟/體重比重、胸腺/體重比值、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力均無明顯影響(P>0.05)。結(jié)論:復(fù)合菌菇提取粉具有增強(qiáng)免疫力功能的作用。
[關(guān)鍵詞]復(fù)合菌菇;香菇;茯苓;猴頭菇;免疫;小鼠
菌類含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),多糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、各種維生素及礦物質(zhì)微量元素,其中多糖含量最高、活性最強(qiáng)?,F(xiàn)代研究表明,菌類具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、抗腫瘤、降膽固醇等作用。本實(shí)驗(yàn)參照衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003版進(jìn)行小鼠試驗(yàn),觀察復(fù)合菌菇提取粉對(duì)小鼠免疫力的影響作用。復(fù)合菌菇提取粉是以香菇提取物、茯苓提取物、猴頭菇提取物及糊精混合制成的復(fù)合粉(猴頭菇提取物40%、香菇提取物32%、茯苓提取物10%),經(jīng)檢測(cè)多糖含量9%。2.5g/袋,推薦成人每日1袋。
1 材料與方法
1.1 受試物復(fù)合菌菇提取粉,實(shí)驗(yàn)室自制,2.5g/袋。人體推薦劑量為每日1袋。
1.2 動(dòng)物 SPF級(jí)昆明種小鼠[生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(湘)2009-0012]160只,雌性各半。體重18-22g。
1.3 儀器 動(dòng)物臺(tái)秤;分析天平;離心機(jī);氧化碳培養(yǎng)箱;離心機(jī);恒溫水浴鍋;酶標(biāo)儀、顯微鏡、游標(biāo)卡尺等
1.4 動(dòng)物分組與給藥方法 試驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為4組,每組40只,分別進(jìn)行;①碳廓清實(shí)驗(yàn);②小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn);③遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn);④臟體比值、半數(shù)溶血值(HC50)、抗體生成細(xì)胞數(shù)測(cè)定。4組再隨機(jī)分為低、中、高劑量組和對(duì)照組,每組10只。根據(jù)人體口服推薦量,低、中高劑量組分別為0.21、0.42、1.25g/kg bw,灌胃體積0.02ml/g BW,對(duì)照組給予等體積蒸餾水,連續(xù)灌胃30天。
1.5 方法
本實(shí)驗(yàn)以0.21、0.42、1.25g/kg bw三個(gè)劑量經(jīng)口給予小鼠復(fù)合菌菇提取粉一個(gè)月,進(jìn)行小鼠細(xì)胞免疫功能,體液免疫功能和單核-巨噬細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)。方法參照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003版。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),若方差齊,采用單因素方差分析進(jìn)行總體比較,發(fā)現(xiàn)差異再用Dunnett-t法進(jìn)行多個(gè)劑量組與一個(gè)對(duì)照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊則對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,滿足方差齊性檢驗(yàn)后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì);若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到方差齊性,則改用秩和檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)總體比較有差異,則采用不要求方差齊性的Tamhanes ?T2檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。
2 結(jié)果
2.1 復(fù)合菌菇提取粉對(duì)小鼠體重的影響 4組試驗(yàn)小組各劑量組試驗(yàn)初期、試驗(yàn)中期、試驗(yàn)?zāi)w重及實(shí)驗(yàn)期間體重增長與對(duì)照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.2 復(fù)合菌菇提取粉對(duì)小鼠免疫器官臟器/體重比值的影響復(fù)合菌菇提取粉各劑量組對(duì)小鼠脾臟/體重比值和胸腺/體重比值與對(duì)照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.3復(fù)合菌菇提取粉對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響
對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)的影響 復(fù)合菌菇提取粉中、高劑量組小鼠足跖腫脹度大于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。低劑量組小鼠足跖腫脹度與對(duì)照組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.4復(fù)合菌菇提取粉對(duì)體液免疫的影響
對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)的影響 復(fù)合菌菇提取粉中、高劑量組能增加小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)、半數(shù)溶血值(HC50)與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);低劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
2.3 復(fù)合菌菇提取粉對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
復(fù)合菌菇提取粉中、高劑量組對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清吞噬指數(shù)升高,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。低劑量組對(duì)小鼠碳廓清吞噬指數(shù)、各劑量組對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力未見明顯影響,與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)
3 結(jié)論
香菇營養(yǎng)豐富,有顯著的藥用及滋補(bǔ)作用。香菇含豐富的蛋白質(zhì)、粗多糖、 鈣、磷等礦物質(zhì)和維生素類物質(zhì)[1]。香菇中的氨基酸異常豐富,構(gòu)成蛋白質(zhì)的20種氨基酸,香菇就有18種, 其中8種必需氨基酸都含有。具有顯著作用的是其含的多糖。香菇多糖是一種胸腺依賴型T細(xì)胞導(dǎo)向, 并有巨噬細(xì)胞參與的免疫調(diào)節(jié)劑[2]。另外香菇多糖還能激活補(bǔ)體系統(tǒng), 促進(jìn)抗體形成, 使巨噬細(xì)胞溶酶體酶和IL-1分泌量增加, 而抑制巨噬細(xì)胞釋放PGE、PGF、PGS。茯苓為多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.) Wolf.的干燥菌核,性平,味甘、淡,歸心、脾、腎經(jīng)。茯苓多糖和三萜類成分為茯苓的主要有效成份[3-4]。鄧媛媛等[5]研究發(fā)現(xiàn),茯苓乙醇提取物、水溶性物質(zhì)部位組 ?均能增強(qiáng)由氫化可的松所致免疫低下小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能;能顯著提高小鼠細(xì)胞免疫因子IL-2和TNF-a的含量。猴頭菇隸屬于擔(dān)子菌亞門,具有豐富的真菌多糖、猴頭菌素等生物活性成分[6]。據(jù)現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)猴頭菇還具有提高機(jī)體免疫、抗腫瘤等作用[7]。復(fù)合菌菇提取粉是以香菇提取物、茯苓提取物、猴頭菇提取物為原料制成的,含有豐富的多糖活性物質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果,0.42g/kg bw、1.25g/kg bw劑量組能增加小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)能力、抗體生成細(xì)胞數(shù)、血清半數(shù)溶血值、小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清能力,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示復(fù)合菌菇提取粉具有增強(qiáng)免疫力的作用。
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