高晶晶

[摘要] 目的 討論研究Liss/coombs卡應(yīng)用于ABO疑難血型檢測(cè)中的臨床價(jià)值與意義。方法 選擇該院2018年1—6月7例ABO疑難血型患者作為研究對(duì)象。將患者1%紅細(xì)胞懸液50 μL與50 μL的抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清在血型鑒定微凝膠柱卡上進(jìn)行反應(yīng)，之后將患者血清50 μL與1%ABO試劑細(xì)胞A、B細(xì)胞液50 μL進(jìn)行反應(yīng)并將反應(yīng)液在Liss/coombs卡上進(jìn)行檢測(cè)并對(duì)不同的稀釋濃度標(biāo)準(zhǔn)血清反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果 抗-A，抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行連續(xù)倍比稀釋，分別以鹽水法、柱凝集法及混合實(shí)驗(yàn)法測(cè)定各自最大稀釋度的有效反應(yīng)，鹽水發(fā)最低，滴度僅有128;柱凝集法靈敏度達(dá)到512;而混合法測(cè)定結(jié)果較其余兩種更高，需達(dá)到4 096。 結(jié)論 鹽水結(jié)合柱凝集法對(duì)ABO疑難血型進(jìn)行檢測(cè)具有靈敏度及準(zhǔn)確率高的特點(diǎn)，尤其對(duì)正反定型不一致的疑難血型檢測(cè)效果較好，值得臨床廣泛推薦應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞] Liss/Coombs卡;鹽水法接合柱凝集法;ABO疑難血型檢測(cè);臨床價(jià)值與意義

[中圖分類號(hào)] R5 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? ? ? ?[文章編號(hào)] 1674-0742（2020）02（a）-0010-03

Clinical Value Analysis of Liss/coombs Card in ABO Difficult Blood Group Detection

GAO Jing-jing

Department of Blood Transfusion， the First Hospital of Quanzhou， Fujian Medical University， Quanzhou， Fujian Province， 362000 China

[Abstract] Objective To discuss the clinical value and significance of saline conjugate column in ABO difficult blood group detection. Methods Seven ABO patients with difficult blood group in the hospital from January to June 2018 were selected as the study subjects. One percent ofpatients erythrocytesuspension 50 μL was reacted with 50 μL of anti-A and anti-B standard serum， then 50 μL of patients serum was reacted with 50 μL one percentof ABO reagent cell A and B， and the reaction liquid was detected on Liss/coombs card and the standard serum reaction with different dilution concentration was detected. Results The standard serum of anti-A and anti-B was diluted continuously by multiple dilution. The maximum dilution of each standard serum was determined by saline solution method， column agglutination method and mixed experiment respectively. The saline hair was the lowest， and the titer was only 128. The sensitivity of column agglutination method was 512， and the results of mixed method were higher than those of the other two methods， requiring 4 096. Conclusion Saline combined with column agglutination method has the characteristics of high sensitivity and accuracy in detecting ABO difficult blood group， especially for those with inconsistent forward andbackward typing， which is worthy of wide clinical recommendation and application.

[Key words] Liss/Combs card;Brine method of joint column agglutination; ABO difficult blood group detection; Clinical value and significance

紅細(xì)胞ABO血型的準(zhǔn)確鑒定是輸血相容性檢測(cè)最重要的環(huán)節(jié)之一，與患者的用血安全直接相關(guān)聯(lián)。患者輸血前進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)ABO血型正定型（紅細(xì)胞定型）與反定型（血清定型），只有正反定型相一致才可確定ABO血型[1]。ABO血型的鑒定會(huì)受到患者年齡、疾病、遺傳及藥物等多種因素的影響，對(duì)紅細(xì)胞ABO疑難血型進(jìn)行準(zhǔn)確有效的判斷才能達(dá)到安全輸血的目的?，F(xiàn)臨床多應(yīng)用柱凝集法進(jìn)行檢測(cè)，但對(duì)于疑難血型檢測(cè)上無(wú)法獲得滿意的檢測(cè)結(jié)果，可能導(dǎo)致ABO血型檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)正反定型結(jié)果不一致的情況[2]。鹽水法接合柱凝集法作為一種新的檢測(cè)方式具有更加準(zhǔn)確、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)，尤其對(duì)于ABO血型抗原弱化或抗體減低而非ABO亞型或抗-H陰性的患者可在較短時(shí)間內(nèi)獲得結(jié)果。 該文為探討Liss/coombs卡應(yīng)用于ABO疑難血型檢測(cè)中的臨床價(jià)值分析，特選取2018年1—6月7例ABO疑難血型患者臨床資料進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 ?資料與方法

1.1 ?一般資料

選擇該院7例輸血前進(jìn)行ABO血型檢測(cè)發(fā)現(xiàn)正反定型不一致的患者作為研究對(duì)象，通過(guò)檢驗(yàn)科相關(guān)實(shí)驗(yàn)條件對(duì)其血液進(jìn)行對(duì)比性試驗(yàn)檢測(cè)。

1.2 ?設(shè)備與試劑

該次研究中應(yīng)用的設(shè)備包括恒溫箱、離心機(jī)，試劑主要以生理鹽水、1%A、B細(xì)胞試劑及抗-A、抗-B血清為主;還包括ABO血型鑒定卡、Liss/coombs結(jié)合反應(yīng)卡。

1.3 ?檢測(cè)方法

取ABO疑難血型患者1%50 μL紅細(xì)胞液并將其與50 μL抗-A及抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行混合反應(yīng)[3];保持實(shí)驗(yàn)溫度4℃，反應(yīng)時(shí)間15 min。若實(shí)驗(yàn)在室溫條件下進(jìn)行則應(yīng)將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)至30 min。之后將充分反應(yīng)后的反應(yīng)液結(jié)合至Liss/coombs卡上，使用專業(yè)離心機(jī)進(jìn)行離心處理，離心時(shí)間為10 min并對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行判斷[4]。之后將患者50 μL血漿與1%反定A、B紅細(xì)胞懸液50 μL，加至Liss/coombs卡[5]，在37℃恒溫箱中進(jìn)行30 min反應(yīng)并放至離心機(jī)進(jìn)行10 min離心處理并對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察[6]。該次試驗(yàn)在鹽水試管、柱凝集法及混合實(shí)驗(yàn)法條件下進(jìn)行，另外還應(yīng)對(duì)不同稀釋濃度的抗-A及抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行檢測(cè)[7]，濃度為每次稀釋2倍并將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。

1.4 ?統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 ?結(jié)果

2.1 ?3種方法檢測(cè)抗原減弱或抗體減低結(jié)果

3種方法測(cè)定抗原減弱或抗體減低結(jié)果顯示，鹽水法接合柱凝集法進(jìn)行血型鑒定效果較好并與其他兩種方法存在較大差異，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2 ?血清連續(xù)倍比稀釋結(jié)果

抗-A，抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行連續(xù)倍比稀釋，分別以鹽水法、柱凝集法及混合實(shí)驗(yàn)法測(cè)定各自最大稀釋度的有效反應(yīng)，鹽水法最低，滴度僅有128;柱凝集法靈敏度達(dá)到512;而混合法測(cè)定結(jié)果較其余兩種更高，需達(dá)到4 096。見(jiàn)表2。

表2 ? 3種方法抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清連續(xù)倍比稀釋比較

3 ?討論

目前臨床用于檢測(cè)ABO血型的方法較多，但在對(duì)血型測(cè)定過(guò)程中存在正反定型不符的疑難血型缺乏統(tǒng)一的鑒定流程，這也在一定程度上增加了該部分患者輸血的難度與風(fēng)險(xiǎn)[8-9]。微柱凝集法的血型反應(yīng)卡與交叉配血反應(yīng)卡通常都只進(jìn)行單一檢測(cè)的目的，缺乏進(jìn)一步的聯(lián)合與拓展應(yīng)用。單一的血型測(cè)定柱凝集法主要是通過(guò)紅細(xì)胞抗原及對(duì)應(yīng)的抗體IgM結(jié)合后通過(guò)離心使凝集的紅細(xì)胞懸浮在凝膠表面或中層而呈現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，未與抗體結(jié)合的紅細(xì)胞通過(guò)凝膠沉于凝膠底部表現(xiàn)為陰性反應(yīng)[10-11]。部分研究人員[12]認(rèn)為將CAT法應(yīng)用于ABO血型檢測(cè)所得結(jié)果的準(zhǔn)確性不如手工試管法檢測(cè)準(zhǔn)確。隨著研究的進(jìn)一步深入，研究人員均認(rèn)為，血庫(kù)通過(guò)CAT法對(duì)ABO血性進(jìn)行檢測(cè)時(shí)仍存在正反定型不一致的情況[13-14]。該次研究中參與研究的患者疑難血型均為抗體減低，應(yīng)用鹽水法接合柱凝集法進(jìn)行血型鑒定效果較好并與其他兩種方法存在較大差異（P<0.05），此結(jié)果與梁漢彰[15]研究所得結(jié)果相似，而抗原減弱的情況待后續(xù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證該方法的可行性。另外，研究中還發(fā)現(xiàn)抗-A，抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行連續(xù)倍比稀釋，分別以鹽水法、柱凝集法及混合實(shí)驗(yàn)法測(cè)定各自最大稀釋度的有效反應(yīng)，鹽水法最低，滴度僅有128;柱凝集法靈敏度達(dá)到512;而混合法測(cè)定結(jié)果較其余兩種更高，需達(dá)到4 096（P<0.05），此結(jié)果與王顯榮等[16]文章中提出的鹽水試管法最大稀釋度有效反應(yīng)最低，滴度僅為128，而鹽水接合柱凝集法較其余兩種方法更高，達(dá)到4 096相似。

鹽水法接合柱凝集法是交叉配血反應(yīng)卡的進(jìn)一步拓展并作為該次研究的結(jié)合反應(yīng)卡[17]。主要是指將鹽水法反應(yīng)陽(yáng)性（肉眼無(wú)法看見(jiàn)或非常微弱）的反應(yīng)液（IgG型或IgM型抗原抗體結(jié)合物）接合至Liss/Coombs卡上進(jìn)行抗球蛋白試驗(yàn)，將抗原抗體特異性反應(yīng)與抗球蛋白試驗(yàn)超敏感性進(jìn)行結(jié)合[18];之后根據(jù)反應(yīng)卡分子篩的物理作用及LISS促進(jìn)抗原抗體反應(yīng)的特性顯著提升實(shí)驗(yàn)的敏感度[19]。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[20-21]，單一的柱凝集法對(duì)ABO血型的測(cè)定盡管也具有一定的靈敏度，但對(duì)于由于疾病或者生理因素造成的抗原減弱或抗體減低的患者仍較難確定其準(zhǔn)確的ABO血型。該文應(yīng)用3種檢測(cè)方式對(duì)抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行連續(xù)倍比稀釋并測(cè)定反應(yīng)結(jié)果后發(fā)現(xiàn)，鹽水法接合柱凝集法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)抗血清測(cè)定其靈敏度顯著高于其余兩種方法。綜上所述，鹽水法接合柱凝集具有靈敏度較高且效率更高的優(yōu)勢(shì)，對(duì)于抗原減弱或抗體減低的ABO疑難血型患者具有較高的檢測(cè)價(jià)值。

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