張波 羅青 曹有龍
摘要:以寧夏枸杞(Lycium barbarum L.)寧杞1號花藥培養(yǎng)獲得的株系為研究對象,研究其葉片、花器官、果實生物學(xué)性狀及果實品質(zhì),旨在獲得表型良好的育種材料。結(jié)果表明,利用花藥培養(yǎng)技術(shù),能夠創(chuàng)制出具有不同形態(tài)特征的種質(zhì)資源,其與母株相比,葉片長度變短,部分株系葉片寬度及厚度增加,花冠直徑、花柄長度減小,果實單果重、縱橫徑減小,種子數(shù)減少,鮮果中胡蘿卜素及甜菜堿含量減少。在5份花培株系中,編號194的材料果實單果重及縱橫徑、糖含量均極顯著高于其他材料。
關(guān)鍵詞:花培株系;生物學(xué)性狀;營養(yǎng)物質(zhì);寧夏枸杞(Lycium barbarum L.)
中圖分類號:S567.1+9 ? ? ? ? 文獻標(biāo)識碼:A
文章編號:0439-8114(2020)01-0095-02
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.01.020 ? ? ? ? ? 開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識碼(OSID):
Abstract: Taking Ningxia wolfberry (Lycium barbarum) Ningqi No. 1 anther cultured strains as research objects, its leaves, flower organs, fruit biological characteristics investigation and fruit quality were studied to obtain breeding materials with good phenotype. The results show that the use of anther culture technology can create germplasm resources with different morphological characteristics. Compared with the parent plant, the leaf length becomes shorter, the leaf width and thickness of some lines increase, the diameter of the corolla and the length of the petiole decrease, the weight of the single fruit decreases, the aspect ratio decreases, and the number of seeds decreases. The content of carotene and betaine in fresh fruit reduces. Among the 5 anthropogenic lines, the fruit weight, aspect ratio, and sugar content of the material "194" were significantly higher than those of other materials.
Key words: anthropogenic lines; biological traits; nutrients; Lycium barbarum
寧夏枸杞(Lycium barbarum L.)是茄科枸杞屬多年生落葉灌木[1],其根、莖、葉、花、果均可入藥,具有良好的經(jīng)濟生態(tài)效益[2]。枸杞研究主要集中于育種[3-5]、栽培[6,7]、營養(yǎng)物質(zhì)功效[8,9]等方面,枸杞的遺傳特性研究報道較少。為獲得枸杞單倍體材料,早期以寧杞1號為試驗材料,利用花藥組織培養(yǎng)技術(shù)建立了枸杞花藥培養(yǎng)體系[10],并通過胚狀體途徑獲得花培株系,對其進行早期鑒定、生根、擴繁、煉苗、大田移栽、生物學(xué)性狀調(diào)查,最終篩選出5個花培株系。以5個花培株系作為對象,研究其葉片、花器官、果實的生物學(xué)性狀及果實營養(yǎng)成分,以期為枸杞育種提供遺傳資源材料。
1 ?材料與方法
1.1 ?試驗材料
植物材料包括寧杞1號花培株系[11],編號為194、261、361、384、471;母株寧杞1號,為對照(CK),均保存于寧夏農(nóng)林科學(xué)院枸杞種質(zhì)資源圃(8°38′49″N,106°09′10″E)。
1.2 ?葉片、花、果實植物學(xué)性狀測定
4月下旬枸杞花培株系開始萌芽時,選擇樹勢健壯的植株掛牌標(biāo)記定點。植株開花后,在植株外圍東西南北方向,選擇枝條中上部成熟葉片各20片,用游標(biāo)卡尺測量葉長、葉寬、葉厚,計算葉形指數(shù)。盛花期,選取盛開花20枚,測量花冠直徑、花冠筒長、花柄長。果熟期測定果實的縱橫徑、果柄長度、單果重、種子數(shù)[12,13]。
1.3 ?果實品質(zhì)測定
測定鮮果、干果多糖、甜菜堿、胡蘿卜素,重復(fù)3次,取其平均值。多糖、總糖根據(jù)GB/T18672-2002附錄B方法測定,甜菜堿采用文獻[14]的方法檢測,胡蘿卜素采用GB/T 5009.83-2003方法測定,氨基酸參照GB/T18246-2000測定。
1.4 ?數(shù)據(jù)處理
數(shù)據(jù)整理用Microsoft Excel軟件,數(shù)據(jù)分析用DPS 8.0軟件,方差分析用Duncan氏法。
2 ?結(jié)果與分析
2.1 ?葉片形態(tài)
寧杞1號花培品系間的葉片表現(xiàn)出多樣性,5份花培株系葉片與寧杞1號對比,長度均縮短,其中4份材料寬度變窄,4份材料厚度增加,且3份與對照差異顯著(表1)。
2.2 ?花的形態(tài)
株系花冠直徑、花冠筒長及花柄長與母株相比較表現(xiàn)出多樣性(表2)。3份花培株系花冠直徑、花冠筒長、花柄長減小,且差異極顯著?!?94”花性狀與母株差異不顯著。
2.3 ?果實形態(tài)
花培植株果實和寧杞1號果實比較(表3),單果重、橫徑、縱徑、種子數(shù)減少,且差異極顯著,果實橫徑“194”和寧杞1號有顯著差異。
2.4 ?花培株系枸杞鮮果營養(yǎng)成分含量測定
花培株系鮮果中的胡蘿卜素及甜菜堿含量均低于寧杞1號,且差異極顯著(表4)。5份花培株系鮮果中胡蘿卜素含量是寧杞1號的31.2%~44.0%,甜菜堿含量是寧杞1號的7.6%~13.2%。而“194”鮮果中多糖及總糖含量均極顯著高于寧杞1號。
3 ?小結(jié)與討論
枸杞育種主要利用群體選優(yōu)的方式進行[15,16],花藥離體培養(yǎng)是創(chuàng)制育種中間材料的有效途徑之一[17,18]。通過花藥離體培養(yǎng)獲得不同倍性的育種材料,豐富了親本種質(zhì)資源,實現(xiàn)了倍性育種,加快了育種進程。
同一材料花藥培養(yǎng)獲得的枸杞再生植株葉長、葉寬、花冠直徑等呈現(xiàn)多樣化,這與蘋果花藥培養(yǎng)再生植株相同[19,20],花藥培養(yǎng)株系葉長縮短,葉片變厚,花冠直徑減小、花柄長度縮短,果實減小。田間觀察發(fā)現(xiàn),花藥培養(yǎng)獲得的再生植株長勢均弱于供體植株,表現(xiàn)出了退化現(xiàn)象,這可能與植株失去雜種優(yōu)勢有關(guān)。
長勢良好、果實較大、營養(yǎng)物質(zhì)含量較高的材料“194”具有較大應(yīng)用價值,其生物學(xué)性狀有待于進一步研究。
參考文獻:
[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版 一部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.
[2] 曹有龍,何 ?軍.枸杞栽培學(xué)[M].銀川:陽光出版社,2013.
[3] 秦國鋒.枸杞品種類型及良種簡介[J].寧夏農(nóng)林科技,1996(1):21-23.
[4] 秦 ?墾,田 ?英,李云翔,等.寧夏枸杞雄性不育種質(zhì)個體YX21的發(fā)現(xiàn)與鑒定[J].西北植物學(xué)報,2006,26(9):1838-1841.
[5] 秦 ?墾,戴國禮,曹有龍,等.制干用枸杞新品種‘寧杞7號[J].園藝學(xué)報,2012,39(11):2331-2332.
[6] 劉麗萍,張東智,張 ?沖,等.黑果枸杞抗逆性及栽培育種研究進展[J].生物技術(shù)通報,2016,32(10):118-127.
[7] 仲玲玲.枸杞優(yōu)良品種篩選及栽培技術(shù)研究[D].蘭州:蘭州大學(xué),2015.
[8] 霍 ?超,徐桂花.枸杞生理功效和活性成分的研究進展[J].中國食物與營養(yǎng),2007(11):50-53.
[9] 閆亞美.黑果枸杞多酚的組成、抗氧化活性及指紋圖譜研究[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2014.
[10] 錢春艷.枸杞花藥培養(yǎng)體系優(yōu)化[D].昆明:西南林業(yè)大學(xué),2010.
[11] 羅 ?青,張 ?波,李彥龍,等.枸杞花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株[J].寧夏農(nóng)林科技,2016,57(6):17-19,63.
[12] 石志剛.枸杞種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)[M].北京:中國林業(yè)出版社,2012.
[13] LY/T 2099-2013,植物新品種特異性、一致性、穩(wěn)定性測試指南 枸杞屬[S].
[14] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2005年版 一部[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.174.
[15] 鐘鉎元,李 ?健、樊梅花,等.枸杞新品種“寧杞1號”的選育[J].寧夏農(nóng)林科技,1988(2):28-30.
[16] 鐘鉎元,李 ?健、樊梅花,等.枸杞新品種“寧杞2號”的選育[J].寧夏農(nóng)林科技,1989(3):21-23.
[17] DUMAS DE VAULX R,CHAMBONNET ?D.Obtention of embryos and plants from in vitro culture of unfertilized ovules of Cucurbita pepo[M].Berlin:De Gruyter,1986.
[18] ARNEDO ANDR?魪S M S,GARC?魪S CLAVER A,ESTEBAN CHAPAPRIA J,et al.Application of anther culture and molecular markers to a pepper breeding program for diseases resistance[J].Capsicum Eggplant Newsl,2004,23:105-108.
[19] 溫 ?鑫,鄧 ?舒,張春芬,等.‘嘎啦蘋果花藥培養(yǎng)種質(zhì)創(chuàng)新[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2017,50(14):2793-2806.
[20] 李林光,王 ?穎,王玉霞,等.蘋果四倍體品種天星的花粉形態(tài)及胚囊發(fā)育特征研究[J].植物遺傳資源學(xué)報,2011,12(4):662-666.