韋翡翡 呂 蓉 何微微 王 莉 成 希 晉 玲,2*

1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；2.中(藏)藥資源研究所，甘肅 蘭州 730000

蕤仁為薔薇科植物蕤核PrinsepiaunifloraBatal.或齒葉扁核木PrinsepiaunifloraBatal.var.serrata Rehd.的干燥成熟果核。具有養(yǎng)肝明目、疏風(fēng)散熱的功效，用于目赤腫痛，瞼弦赤爛，目暗羞明等治療[1]。

蕤仁在中醫(yī)眼科和成藥組方中應(yīng)用較廣，除此之外具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，藥材的主要含有黃酮類、羧酸類和木質(zhì)素等化學(xué)成分[2]，果肉中含有豐富的維生素和氨基酸，種仁中含有脂肪、蛋白質(zhì)和微量元素等，應(yīng)用于食物和保健品中補(bǔ)充人體所需營養(yǎng)物質(zhì)[3]。植物資源主要分布于河南、內(nèi)蒙、甘肅和四川等地[4]。因藥材現(xiàn)在以野生資源為主，所以在黃土高原地區(qū)也將其作為生態(tài)和經(jīng)濟(jì)樹種，減小野生資源的過度利用，也增加當(dāng)?shù)氐氖杖隱5]。而生藥學(xué)方面研究較少，本文將通過生藥鑒定方法進(jìn)行蕤仁的相關(guān)研究，為蕤仁藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 材料 蕤仁藥材收購于安國藥市和亳州藥市10批(見表1),均由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)晉玲教授鑒定為薔薇科植物蕤核PrinsepiaunifloraBatal.的干燥成熟果核。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)(RM2235)、電腦生物組織攤烤片機(jī)(浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司)、顯微成像分析系統(tǒng)(尼康80i)、隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海越近醫(yī)療器械一廠)、水浴鍋、超聲清洗機(jī)(康士潔超聲波科技有限公司)、層析缸、硅膠G薄層板(青島海洋化工有限公司)等。

1.3 試劑 無水乙醇、三氯甲烷、二甲苯、甲醇、乙酸乙酯、碳酸鈣、石油醚(天津市大茂化學(xué)試劑廠)；石蠟(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)、藏紅T(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)、固綠(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；中性樹膠(中國上海標(biāo)本模型廠)苦杏仁甙對(duì)照品(北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院HPLC≥98%)等。

表1 蕤仁藥材來源表

2 方法

通過石蠟切片制作了蕤仁的橫切圖，方法為浸泡軟化→乙醇脫水→石蠟固定→切片→染色→封片，完成了蕤仁的石蠟切片制作；通過粉末制作觀察顯微特征；通過2015版中國藥典薄層色譜法進(jìn)行理化鑒定。

3 結(jié)果

3.1 性狀鑒別 果核質(zhì)堅(jiān)硬、呈不對(duì)稱的扁心臟形或扁卵形，呈深棕色至暗棕色，有凹凸的淺縱溝壑。去掉果殼，可見包裹著內(nèi)種皮的種仁；呈棕色，呈類圓形或扁卵形，長5～8 mm，寬約4～6 mm，厚約2～3 mm，尖端有種臍，圓端有合點(diǎn)，中間有深色種脊；內(nèi)種皮上有淺褐色的紋理4～6條，內(nèi)種皮質(zhì)脆而??；子葉2，類白色，富含油性，氣微，味微苦。如圖1所示。

3.2 顯微鑒別 蕤仁橫切：內(nèi)果皮細(xì)胞為多層石細(xì)胞組成，種皮為深棕色，由4～6層細(xì)胞組成，有壁孔不常見，其下為數(shù)列頹廢的薄壁細(xì)胞，種皮的內(nèi)表皮為1列無色大型薄壁細(xì)胞，種子表皮是排列緊密的一層表皮細(xì)胞，向內(nèi)為薄壁細(xì)胞多為方形、多邊形，兩片子葉中含20～30個(gè)子葉細(xì)胞，并且含內(nèi)胚乳，含油滴和糊粉粒。如圖2所示。

粉末鑒別：粉末呈灰色至灰褐色，多見石細(xì)胞，石細(xì)胞多為長圓形，長條形，少數(shù)類圓形，直徑14～130 μm，石細(xì)胞壁極厚，孔溝明顯，中部常成環(huán)狀斷裂，偶有胞腔內(nèi)含黃棕色物。果皮細(xì)胞呈黃色，多為長橢圓形至不規(guī)則形，多為數(shù)層細(xì)胞緊密排列的組織團(tuán)塊，含有少量油管。如圖3所示。

3.3 薄層鑒別 從藥材蕤仁中抽取3批不同產(chǎn)地的樣品，每份樣品取0.5 g，加入相同量碳酸鈣(CaCO3)進(jìn)行研磨至完全碎，將混合品轉(zhuǎn)移至具塞三角瓶內(nèi)，加石油醚(60～90℃)4 mL浸泡過夜后，將石油醚進(jìn)行吸干，后再吹干，再加入乙醇4 mL冷浸過夜，最后用乙醇的浸出液進(jìn)行點(diǎn)樣，并以熊果酸作為對(duì)照品，吸取上述二種溶液分別點(diǎn)樣于硅膠G薄層板上，以氯仿-乙酸乙酯-乙醇(2∶1∶2)為展開劑展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏后，供試液色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置，顯相同的黃色斑點(diǎn)。如圖4所示。

4 討論

據(jù)文獻(xiàn)考證，蕤仁在歷史上用藥歷史比較悠久，但是品種卻比較單一，不存在混淆使用的情況[6]；在制作切片過程中，蕤仁軟化時(shí)間應(yīng)該控制合理，時(shí)間太短，切片過程中易破裂；時(shí)間過長容易使藥材解體。在浸蠟過程中溫度高會(huì)導(dǎo)致蕤仁的種皮收縮變形。包埋時(shí)溫度要也要設(shè)置合理，溫度如果太高，會(huì)使藥材組織變脆，并容易收縮變形。切片過程中應(yīng)該注意臘塊與刀片的角度問題，防止組織變形。染色中也應(yīng)該注意染色時(shí)間，紅色染色時(shí)間過長，可能會(huì)使導(dǎo)致固綠的著色程度。

薄層鑒別中應(yīng)該保證G板的在點(diǎn)樣前期過程中充分飽和，避免薄層展開過程中的拖尾問題，點(diǎn)樣量也會(huì)導(dǎo)致條帶色度的不均勻問題，所有過程中應(yīng)盡量保持客觀變量的一致性。

本次實(shí)驗(yàn)采集了10批不同批次的藥材，通過了藥材性狀、顯微切片觀察、顯微粉末觀察和薄層鑒別的現(xiàn)代手段進(jìn)行了藥材蕤仁的生藥學(xué)研究，結(jié)果具有代表性和客觀性，可為蕤仁的質(zhì)量控制提供依據(jù)。