蔣 磊,陳 杰
(1.宿州職業(yè)技術學院,安徽 宿州 234000;2.安徽海大飼料有限公司,安徽 池州 247100)
茶多酚又名茶鞣質或茶單寧,由幾十種酚類化合物組成,廣泛存在于茶樹新梢和茶葉干基中,具有降血壓、降血糖、降膽固醇含量及抗腫瘤等功效[1]。研究表明,茶多酚有較強的脂質抗氧化能力,優(yōu)于維生素E和硒[2],可調控機體脂肪代謝,日糧中添加能夠有效降低肉雞腹脂率,降低血液中總膽固醇及甘油三酯的含量[3];同時茶多酚也能促進血液中IgA、IgG、IgM等免疫球蛋白的產生和分泌,升高總蛋白和白蛋白的含量[4],因此可作為理想的天然飼料添加劑。筆者前期做了有關茶多酚對肉雞生長性能和肉品質影響的研究,證實了其在畜禽生產應用中的前景。為進步一探究茶多酚對肉雞血清蛋白、血脂及抗氧化酶等生化指標的影響,本試驗在前期研究基礎上優(yōu)化了茶多酚的添加量水平,旨在更全面的進行綜合評價,以期為推廣應用提供理論基礎。
茶多酚粉劑由安徽蕪湖天遠科技生物有限公司提供,綠茶中提取純度≥98%,飼喂前與基礎日糧混合均勻。試驗動物選用817肉雞(羅斯308父母代公雞×海蘭褐商品代母雞),由安徽海大飼料有限公司合作養(yǎng)殖戶提供。
試驗于安徽海大飼料有限公司合作養(yǎng)殖場進行,選取1日齡817肉雞160只,隨機分為4組,每組5個重復,每個重復8只。其中,對照組飼喂基礎日糧,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別在基礎日糧中添加0.02%,0.04%,0.06%的茶多酚,試驗期49d,肉雞采用多層籠養(yǎng),自由采食、飲水,常規(guī)免疫,基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平
注:*每千克維生素預混料含:維生素A 15000IU,維生素D31000IU,維生素E 40mg,維生素K 3mg,維生素B12mg,維生素B25mg,維生素B64mg,煙酸30mg,泛酸20mg,生物素0.2mg。
**每千克微量元素預混料含:銅8mg,鐵80mg,鋅40mg,碘0.2mg,錳40mg,硒0.15mg。
試驗期末(49日齡)從每個重復中隨機選取2只接近平均體重的健康肉雞翅下采血5mL,離心后分離血清,用于分析血清生化指標??偟鞍?TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)含量的測定利用羅氏MODULP800全自動生化分析儀;總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量,總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量按照相關試劑盒說明書進行測定,試劑盒購自南京建成生物工程研究所。
試驗數據利用Excel2013進行初步整理,采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數據分析處理,結果以平均值±標準差表示,以P<0.05表示差異顯著。
由表2可知,肉雞血清蛋白含量隨著茶多酚添加量的增加而提高,其中試驗Ⅲ組血清TP、ALB和GLB含量均最高,分別比對照組提高了29.90%,11.61%,29.89%。與對照組相比,飼糧中添加不同劑量茶多酚均顯著提高肉雞血清TP、GLB含量(P<0.05),試驗Ⅱ、Ⅲ組ALB含量顯著提高(P<0.05)。
表2 不同處理組肉雞血清蛋白含量 (g·L-1)
注:同行數據右肩標注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),字母相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05),下表同。
由表3可知,茶多酚對肉雞血脂各指標的影響不同。與對照組相比,飼糧中添加不同劑量茶多酚組肉雞血清HDL-C含量無顯著性差異(P>0.05),但TC、LDL-C含量顯著降低(P<0.05),試驗Ⅱ、Ⅲ組TG含量顯著降低(P<0.05)。與試驗Ⅰ、Ⅱ組相比,試驗Ⅲ組TG、LDL-C含量差異顯著(P<0.05),而TC、HDL-C含量差異不顯著(P>0.05)。
表3 不同處理組肉雞血脂含量 (mmol·L-1)
由表4可知,飼糧中添加不同劑量茶多酚對肉雞血清MDA含量無顯著性影響(P>0.05),與對照組相比,各試驗組T-AOC、GSH-Px、SOD和CAT活性均有一定程度的提高,其中T-AOC、GSH-Px活性差異顯著(P<0.05),試驗Ⅱ、Ⅲ組SOD活性分別提高了8.80%、10.99%,試驗Ⅲ組CAT活性提高了6.75%,差異均顯著(P<0.05)。
表4 不同處理組肉雞血清抗氧化指標
肉雞血清蛋白含量反映機體蛋白質調控及代謝狀況,其中總蛋白、白蛋白具備物質結合轉運,維持血液滲透壓,保護和協(xié)調血管及細胞內皮完整性等功能;球蛋白參與凝血調節(jié)和體液免疫,增強機體抗氧化、損傷修復等多種生理過程[5]。李樺等[6]研究表明,茶多酚具有調節(jié)機體蛋白質代謝功能,可不同程度提高熱應激狀態(tài)下肉雞血清總蛋白和白蛋白水平。尚巖巖等[7]報道,灌喂40日齡肉雞300mg/kg·BW茶多酚0~8h內肉雞血漿總蛋白含量顯著提高。劉旭升[8]在飼糧中添加1%,2%,4%和6%的綠茶粉,結果顯示42d后各試驗組肉雞血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量均顯著升高。本試驗結果表明,飼糧中添加不同劑量茶多酚均可提高肉雞血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量,以0.06%添加量的血蛋白含量最高,說明茶多酚可調節(jié)肉雞蛋白質的吸收和代謝,且存在量劑關系,主要機理可能是茶多酚可增強機體體液免疫,通過提高IgA、IgG、IgM等免疫球蛋白的分泌,提升了機體免疫力,從而提高了血清總蛋白、白蛋白的含量。而劉海軍[9]研究則表明,飼糧中添加20-30mg/kg茶多酚對肉雞血清總蛋白和白蛋白含量無顯著影響,這可能與茶多酚添加量水平較低有關,本試驗飼糧中的添加量均在200mg/kg以上。
研究表明,飼糧中添加茶多酚可調控畜禽機體內生脂酶活性及基因表達,抑制肝臟中膽固醇的合成;促進脂肪酸的β氧化反應,加強脂肪組織的代謝動員,降低體脂的沉積率;提高組織中HDL-C水平,增強細胞內膽固醇的轉運及清除;抑制肝臟中TC、TG、LDL-C的合成,促進外周組織中極低密度脂蛋白的降解代謝,從而降低血清中總膽固醇水平[10]。也有研究報道,茶多酚能減緩甘油三酯代謝過程中受到的抑制作用,加速脂類代謝,從而降低血清中甘油三酯的水平[11]。盧垚[12]則認為,茶多酚降膽固醇的作用與膽固醇代謝相關基因表達的調控有關。宛曉春等[13]發(fā)現,茶多酚可與血清蛋白結合,有效降低血清中TC、TG和LDL濃度,提高HDL濃度。徐曉娟等[3]研究表明,日糧中添加茶多酚可有效降低青腳麻雞血液中TC、TG和LDL-C含量,提高HDL-C含量,其中0.04%添加量以上效果顯著。李華麗[4]肉雞灌服0.06g/kg·BW茶多酚,結果顯示血清中LDL-C、TG、CHO、HDL-C的濃度均降低,表明茶多酚可降低血液對膽固醇的吸收,抑制脂蛋白合成,加速脂質的分解。本試驗結果與前人研究不太一致,飼糧中添加不同劑量茶多酚可顯著降低肉雞血清中TC、TG和LDL-C含量,但對HDL-C含量無顯著影響,這可能與基礎日糧組成或飼養(yǎng)周期不同有關,還需進一步研究證實。
血清抗氧化功能常以酶抗氧化系統(tǒng)表示,其中T-AOC為抗氧化系統(tǒng)的綜合性衡量指標;GSH-Px參與H2O2的催化還原反應,可維持細胞膜結構和功能的完整性;SOD參與氧自由基的清楚,起重要的防御作用;CAT可分解H2O2,減少氧自由基的產生[9]。有研究表明,茶多酚作為非酶抗氧化系統(tǒng),其抗氧化活性是VC的25倍、VE的80倍[14],可有效降低機體氧化應激反應;同時誘導GSH-Px、SOD和CAT等抗氧化酶的生成,參與轉錄系統(tǒng)的激活,可提高機體抗氧化能力[15-16]。劉梅等[17]在飼糧中添加不同水平的茶多酚,結果顯示80-120mg/kg組42日齡肉仔雞血清中GSH-Px、SOD活性顯著上升,但CAT活性無顯著變化。汪小紅等[18]與胡經緯等[19]在蛋雞飼糧中添加茶多酚,研究也發(fā)現茶多酚可顯著提高血清中GSH-Px、SOD活性。本試驗結果與前人研究基本一致,試驗組血清T-AOC、GSH-Px、SOD的活性顯著提高,而CAT活性僅0.06%組差異顯著,說明飼糧中添加茶多酚可提高肉雞抗氧化能力,改善程度與添加量水平相關。
MDA是脂質過氧化反應的終產物,其含量高低與抗氧化能力呈負相關。本試驗結果表明,飼糧中添加不同劑量茶多酚對肉雞血清MDA含量均無顯著性影響,這與李麗[10]和李衛(wèi)春等[2]報道一致。然而,李樺等[6]與劉梅等[17]研究表明茶多酚能減少肉雞脂質過氧化反應,抑制MDA的生成,顯著降低血清中的含量。這種差異可能與試驗動物品種、飼養(yǎng)環(huán)境或者茶多酚添加量水平等不同有關。
在本試驗條件下,飼糧中添加茶多酚可有效提高肉雞血清中蛋白含量,降低膽固醇濃度,提高抗氧化酶活性,其中添加比例在0.04%以上效果顯著,以0.06%效果最佳。