趙彩云,安 冬,常廣寧,常曉嬌,吳春華
(大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務(wù)中心,遼寧大連116000)
茶樹菇屬擔(dān)子菌亞門,田頭菇屬,其營養(yǎng)豐富,味道鮮美,蓋嫩柄脆,味純清香,口感好,是一種高蛋白、低脂肪的綠色食品[1]。茶樹菇含有18 種氨基酸和多種礦物質(zhì),其中有8 種為人體必需氨基酸[2],同時還具有較高的藥用價值,其性平、味甘、無毒,有利尿滲濕健脾止瀉之功效,可以抗衰老、降低膽固醇、提高免疫力,是很有推廣前景的珍稀食(藥)用菌之一[3]。為豐富茶樹菇品種資源,利用山東壽光引進早熟2 號、茶樹菇1 號、茶樹菇6 號、白茶4 個品種以及從江蘇引進茶樹菇F2 進行品種比較試驗,并對引進的茶樹菇品種進行菌絲生長、產(chǎn)量、多糖含量等分析,以期為食用菌生產(chǎn)者在大連地區(qū)對茶樹菇栽培品種的選擇提供理論依據(jù)。
1.1.1 供試菌株。茶樹菇1 號、早熟2 號、茶樹菇6號、白茶引自山東壽光食用菌研究所,茶樹菇F2 引自江蘇天達。
1.1.2 培養(yǎng)基配方。母種培養(yǎng)基,馬鈴薯去皮200 g,葡萄糖20 g,蛋白胨3 g,磷酸二氫鉀1 g,硫酸鎂1 g,瓊脂20 g,水1 000 mL;栽培種及栽培袋培養(yǎng)基,棉籽皮40%,雜木屑30%,玉米粉7%,麥麩20%,石膏1%,石灰2%,料水比1∶1.2.
1.2.1 菌絲生長速度測定。直徑0.5 cm 的打孔器沿著菌落邊緣取相同菌齡的菌塊,分別接種到平板PDA 培養(yǎng)基上,每皿接種1 塊,每個菌株重復(fù)3 次,在25℃條件下恒溫培養(yǎng),測量菌絲生長速度。接種的第2 天開始記錄,每3 d 觀察1 次菌絲生長情況,菌絲培養(yǎng)7~10 d 時,觀察比較菌絲生長勢,測定菌落直徑,計算菌絲生長速度。
1.2.2 拮抗試驗。菌齡一致的菌塊接種到同一PDA平板培養(yǎng)基中進行拮抗試驗。放置在25℃發(fā)菌室內(nèi)進行避光培養(yǎng),當(dāng)平板上菌絲相互接觸后繼續(xù)培養(yǎng)3~5 d,觀察菌絲接觸區(qū),3 次重復(fù)。
1.2.3 栽培試驗。接種5 個品種的原種共20 瓶,每個品種接4 瓶,長滿后接種栽培袋200 袋,每個品種挑選20 袋進行出菇產(chǎn)量測試。
1.2.4 栽培管理。菌絲長滿后,移入出菇室。當(dāng)菌袋出現(xiàn)黃色水珠狀分泌物,表面有棕褐色的色斑,菌袋開始從營養(yǎng)生長轉(zhuǎn)入生殖生長時,及時解除袋口的線繩,拉直袋口,朝地上噴水,保持菇房空間相對濕度85%~95%,并給予一定散射光和通風(fēng)換氣,促使茶樹菇子實體發(fā)生[4]。子實體生長期間空氣濕度控制在85%左右,給予適當(dāng)散射光,適時通風(fēng),保持出菇室內(nèi)空氣新鮮,及時采收。
1.2.5 提取液制備。將采收的5 個品種,共15 份材料烘干至恒重,磨碎后過篩,按12.5 mg/mL 濃度,80℃水浴4 h 后,4 000 r/min 離心15 min,取上清液備用。
1.2.6 多糖含量測定。取30 mL 提取液濃縮至體積1/10,加入95%乙醇至最終乙醇濃度為75%左右,于4℃下沉淀12 h 后,4 000 r/min 離心15 min,于50℃烘箱內(nèi)干燥,得茶樹菇粗多糖沉淀。將多糖沉淀溶解后定容(即為茶樹菇多糖溶液),以苯酚-硫酸比色法測定其溶液多糖含量并計算茶樹菇多糖含量(多糖含量=多糖質(zhì)量/樣品質(zhì)量×100%)[5]。
拮抗試驗是鑒定菌株間遺傳差異的傳統(tǒng)方法,菌絲之間的拮抗反應(yīng)是菌株間不同遺傳特性的重要表現(xiàn)。表明不同菌株分別屬于不同親和群。不同供試菌株間的拮抗反應(yīng),表明菌株間親緣關(guān)系遠近不同。
從圖1 可以看出,白茶與其他4 個品種有明顯的拮抗線,其余4 個品種之間不存在拮抗線,說明白茶與其他品種間親緣關(guān)系遠。
從表1 可以看出,各品種菌絲生長速度有一定差異,其中早熟2 號菌絲生長速度最快,為5.06 mm/d,白茶最慢。菌絲萌發(fā)與菌絲長勢,除了茶樹菇6 號外,其余4 個品種間沒有明顯差異。
從表2 可以看出,5 個品種一潮菇產(chǎn)量在891.2~3 222.3 g,茶樹菇F2 單棒產(chǎn)菇最高,為161.12 g,其次為早熟2 號,單棒產(chǎn)菇達119.44 g,比其他3 個品種產(chǎn)量高,產(chǎn)量最低為白茶。
在國際上,食用菌多糖被稱為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物”(簡稱BRM),經(jīng)研究表明,多糖具有生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物的特征,可做為免疫增強劑和免疫激活劑。因此多糖含量的多少可作為食用菌深加工及保健產(chǎn)品開發(fā)的一項指標(biāo)。從表3 可以看出,茶樹菇1 號、早熟2 號、茶樹菇F2、白茶4 個品種之間整株多糖含量接近,在2.52%~2.90%。整株多糖含量最高品種為白茶,其含量達2.90%,茶樹菇6 號整株多糖含量最低。早熟2 號菌蓋與菌柄的多糖含量差異較大,菌蓋多糖含量達3.35%,菌柄多糖含量為1.68%,相差1.67 個百分點,即菌蓋中多糖含量約為其菌柄中含量的2 倍。
表1 5 個品種在PDA 培養(yǎng)基上菌絲生長狀況
表2 不同菌株的產(chǎn)量
表3 菌柄與菌蓋中多糖含量
白茶與其他4 個品種間拮抗明顯,早熟2 號菌絲生長最快,產(chǎn)量最高為茶樹菇F2,單棒產(chǎn)菇達161.12 g。多糖含量最高品種為白茶,其含量達2.90%。