李錦　王鑫媛　張璐　劉京　馬軍

摘 要

目的：優(yōu)化健兒粉中總皂苷的水提工藝。方法：以料液比、提取次數、提取時間為考察因素，以總皂苷含量為評價指標，采用正交試驗法優(yōu)化提取工藝。結果：最佳水提工藝為料液比1∶8，提取次數3次，提取時間90min。結論：優(yōu)選的提取工藝操作簡單、成本低廉，易于工業(yè)化生產。

關鍵詞

健兒粉;總皂苷：水提工藝;正交試驗

中圖分類號： TQ461 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼： A

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457 . 2020 . 06 . 68

健兒粉是由山藥、茯苓、山楂、炒麥芽、白扁豆、蓮子、薏苡仁、雞內金、陳皮九味藥食同源藥材組方經水提取后通過噴霧干燥制得的提取物，具有補氣健脾，滲濕止瀉之功效，適宜兒童脾虛所致食積、腹脹、泄瀉等證。

皂苷（saponin）又稱皂素或皂甙，是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷，具有抗氧化、抗菌、抗癌以及調節(jié)腸道菌群等有價值的生物活性[1-5]，主要分布于陸地高等植物中，也少量存在于海星和海參等海洋生物中，山藥、茯苓、白扁豆等均含有皂苷成分。為了更好地控制其質量，為制備工藝提供科學性依據，本文以總皂苷含量為指標，采用正交試驗法對水提工藝進行系統(tǒng)考察，以篩選出最佳提取工藝條件。

1 儀器與試藥

紫外可見分光光度計（PE Lambda 25）;賽多利斯224-1CN電子天平;泰斯特98-1-B調溫電熱套;DK-S26電熱恒溫水浴鍋;玻璃層析柱（200mm*30mm）;人參皂苷Re標準品（批號110754-201827，供含量測定用，購自中國食品藥品檢定研究院）;Amberlite-XAD-2大孔吸附樹脂D101（BR，上海伊卡生物技術有限公司）;無水乙醇（AR，天津歐博凱化工有限公司）;中性氧化鋁（AR，100-200目，天津市科密歐化學試劑有限公司）;Amberlite-XAD-2大孔樹脂（BR，上海伊卡生物技術有限公司）;香草醛（AR，天津市永大化學試劑有限公司）;冰乙酸（AR，天津市永大化學試劑有限公司）;高氯酸（AR，天津鑫源化工有限公司）;處方藥材（河北蘭氏盛泰藥業(yè)有限公司）

2 方法與結果

2.1 正交試驗設計

選取提取次數（A）、提取時間（B）、料液比（C）為考察因素，（D）設為空列，以總皂苷含量為指標，選用L9 （34）正交試驗設計表，進行優(yōu)化試驗以確定最佳水提工藝條件。

2.2 試驗方法

2.2.1 試樣處理

按照健兒粉水提工藝正交試驗設計因素水平表對健兒藥粉處方內的藥材進行水提，將提取好的溶液濃縮、過濾并定容至500mL，吸取定容搖勻后的試樣1.0mL（假如濃度高、或顏色深，需稀釋一定體積后再取1.0mL）進行柱層析[12]。

2.2.2 柱層析

玻璃層析柱內裝Amberlite-XAD-2大孔樹脂，上加1cm中性氧化鋁。先用25mL70%乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL已處理好的試樣溶液（見2.2.1），用25mL水洗柱，棄去洗脫液，用25mL70%乙醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于稱量瓶中，置于60℃水浴揮干，以此作顯色用。

2.2.3 顯色

向上述已揮干的稱量瓶中準確加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液，轉動稱量瓶，使殘渣都溶解，再加入0.8mL高氯酸，混勻后置于60℃水浴加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰乙酸5.0mL，搖勻后，以1cm比色池于560nm波長處與標準管一起進行比色測定。

2.2.4 標準管

玻璃層析柱內裝Amberlite-XAD-2大孔樹脂，上加1cm中性氧化鋁。先用25mL 70%乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入100μL人參皂苷Re標準溶液，用25mL水洗柱，棄去洗脫液，用25mL 70%乙醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于稱量瓶中，與試樣一起置于60℃水浴揮干，以此作顯色用。

2.2.5 計算

2.3 結果

2.3.1 正交試驗結果

對總皂苷含量的影響結果見表2、表3。

由表2及表3可知，A因素（提取次數）對結果影響顯著（p<0.05），B因素（提取時間）、C因素（料液比）對結果影響不顯著（p>0.05），三個因素對總皂苷含量影響的主次順序為：A>B>C，即：提取次數>提取時間>料液比。由此得出的最佳水提工藝參數為：A3B3C2，即：提取次數3次，提取時間120min，料液比1∶8。為驗證工藝條件的穩(wěn)定性，結合實際生產成本及可能存在的試驗誤差，暫定水提工藝參數為A3B2C2，即：提取次數3次，提取時間90min，料液比1∶8。

2.3.2 驗證試驗

分別按照最佳工藝A3B3C2的組合條件和選定工藝A3B2C2的組合條件進行驗證試驗，重復三次，驗證試驗結果見表4。

由表4驗證試驗結果表明，最佳工藝和選定工藝的總皂苷含量差距較小，而選定的工藝提取時間較短，節(jié)約能源，有利于降低成本，減少損耗，故采用選定工藝。

3 討論

該組方是由山藥、茯苓、山楂、炒麥芽、白扁豆、蓮子、薏苡仁、雞內金、陳皮九味藥食同源藥材組成。方中山藥甘平為君，益氣健脾[13]。茯苓、薏苡仁為臣，健脾補中，滲濕止瀉。白扁豆甘溫補脾有健脾養(yǎng)胃之功，蓮子可補益脾氣，澀腸止瀉[17]，兩者佐助君臣使脾氣健運，泄瀉得止。山楂擅長消肉食積滯所致的脘腹脹滿、噯氣吞酸、腹痛泄瀉;炒麥芽可行氣消食，健脾開胃，三者合用，可消各種飲食積滯，再以陳皮行氣化滯以配合，使全方補而不滯，改善腹脹癥狀?？v觀全方，以補氣健脾為主，消補兼施，補重于消，藥味多以甘平為主，藥量輕，藥性平和，適宜兒童脾虛所致食積、消化不良、腹脹腹瀉，或體力下降，具有健脾消食，滲濕止瀉之功效。本文通過試驗優(yōu)選出最佳提取工藝，本工藝中所用提取溶劑廉價易得，應用廣泛，且工藝方法簡便，實用性強，以期為工業(yè)化生產提供理論依據。

參考文獻

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[2] Hassan S M ， Haq A U， Byrd J A， et al. Haemolytic and antimicrobial activities of saponin-rich extracts from guar meal[J].Food Chemistry，2009，119（2）：600-605.

[3] 王領，倪敏，江濱.人參皂苷抗結直腸癌作用機制的研究進展[J].中國腫瘤外科雜志，2019，11（05）：370-373.

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