李玲玉，張帥，姬繼超，雒珺瑜，崔金杰

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所/ 棉花生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南安陽455000）

棉 蚜 （Aphis gossypiiGlover） 屬 于 半 翅目（Hemiptera）蚜科（Aphididae），是一種世界性棉花害蟲，其主要通過吸食汁液、分泌蜜露和傳播病毒等方式危害棉花[1]。 目前，對(duì)于棉蚜的研究，不僅集中在生活史[2]、發(fā)生動(dòng)態(tài)[3]以及綜合防治[4]等方面，而且關(guān)注新研究熱點(diǎn)——棉蚜個(gè)體的取食行為[5]、寄主選擇[6]以及傳毒機(jī)制[7]等。 近年來，刺探電位圖譜（Electrical penetration graph，EPG）技術(shù)在刺吸式口器昆蟲取食行為的研究中起到了越來越重要的作用，應(yīng)用該技術(shù)對(duì)昆蟲取食行為的研究日益深入。

EPG 技術(shù)是記錄刺吸式口器昆蟲口針在葉片組織內(nèi)外行為軌跡的一種電生理學(xué)技術(shù)。利用該技術(shù)可準(zhǔn)確地記錄昆蟲口針在寄主植物組織內(nèi)的動(dòng)作和位置[8]。 這項(xiàng)技術(shù)最早是由美國(guó)加利福尼亞大學(xué)的McLean 和Kinsey 發(fā)明并用于檢測(cè)蚜蟲口針在植物組織內(nèi)的取食活動(dòng)， 后被廣泛應(yīng)用于多種刺吸式口器昆蟲取食行為的研究[9-11]。目前，應(yīng)用該技術(shù)研究棉蚜長(zhǎng)時(shí)間取食行為的報(bào)道甚多， 但未見應(yīng)用該技術(shù)對(duì)棉蚜刺探主動(dòng)性研究方面的報(bào)道。

本研究通過EPG 技術(shù)，在室內(nèi)條件下，測(cè)定不同時(shí)間中棉蚜刺探棉花葉片的主動(dòng)性程度，對(duì)刺探時(shí)期和非刺探時(shí)期的EPG 參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，初步探索了棉蚜刺探棉葉、吸食汁液的主動(dòng)性在不同時(shí)間的差異，可為棉蚜取食行為的研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

棉蚜于2019 年7 月采自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所東場(chǎng)棉田（河南省安陽縣），并于人工智能光照培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)繁殖多代（n＞20）后用于試驗(yàn)。 培養(yǎng)箱的條件：溫度（25±1）℃，光周期 L∶D＝14∶10，相對(duì)濕度（RH）＝70%～80%。

1.2 供試棉花品種

本試驗(yàn)使用的棉花品種為中棉所49， 由國(guó)家棉花種質(zhì)資源中期庫提供。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1儀器設(shè)備。試驗(yàn)所用刺吸電位儀為八通道直流型（型號(hào) DC-EPG Giga-8，荷蘭Wageningen University），使用的銅釘、銅絲、金絲（直徑 10 μm）均為該儀器配備。 信號(hào)轉(zhuǎn)換器為DI-720 型（美國(guó)Dataq instruments，Inc）， 自制法拉第金屬屏蔽罩 80 cm×60 cm×60 cm，網(wǎng)孔孔徑 0.250 mm（60 目）。記錄軟件為EPG style＋d 軟件。

1.3.2棉蚜刺吸電位試驗(yàn)方法。將30 頭成蚜接到獨(dú)立罩籠的中棉所49 棉花葉片上，當(dāng)其產(chǎn)仔時(shí)，移去成蚜，保留仔蚜繼續(xù)飼養(yǎng)，待到仔蚜成蟲后，選擇真葉3 葉期棉苗用于試驗(yàn)。

1.3.3EPG 記錄與波形分析。試驗(yàn)在室內(nèi)條件下進(jìn)行，室溫25 ℃左右，整個(gè)EPG 系統(tǒng)置于法拉第金屬屏蔽罩中以防止外界噪音影響記錄。 試驗(yàn)前，對(duì)EPG 系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。 按照胡想順等[10]方法將長(zhǎng)度約3 cm 的金絲用導(dǎo)電銀膠粘連到棉蚜成蟲的前胸背板上。 棉蚜在粘連金絲之后，對(duì)其進(jìn)行1 h 的饑餓處理，之后將昆蟲電極連入EPG 裝置，植物電極則插在棉苗生長(zhǎng)的土壤中。調(diào)整棉蚜在棉花葉片背面上的位置，使其有一定的活動(dòng)范圍。 根據(jù)田間施藥習(xí)慣，推測(cè)棉蚜在08∶00―12∶00 和15∶00―19∶00 較為活躍， 故選擇具有代表性的8 個(gè)時(shí)段（每日的 08∶00―12∶00 和 15∶00―19∶00，以1 h 為1 個(gè)時(shí)段）進(jìn)行試驗(yàn)，每整點(diǎn)開始記錄，記錄時(shí)間為1 h，每頭棉蚜只使用1 次，每個(gè)處理取得有效重復(fù)8 次。

當(dāng)棉蚜口針刺入棉花組織時(shí)，回路接通，電流經(jīng)轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào)，再由style＋d 軟件轉(zhuǎn)化成波形圖譜，記錄并保存。 根據(jù)胡想順等對(duì)蚜蟲取食行為波形的劃分，可將棉蚜在棉花上的取食波形分為2 類。第一類：非刺探時(shí)期（棉蚜口針未刺入葉片組織的階段）波形（Np 波）；第二類：刺探時(shí)期波形，包括蚜蟲口針在葉肉細(xì)胞間隙或韌皮部篩分子外部刺探 （C 波）， 蚜蟲口針在生活細(xì)胞內(nèi)部刺探（Pd 波）， 蚜蟲口針在植物組織和細(xì)胞外部遇到機(jī)械阻力（F 波），蚜蟲口針在韌皮部篩分子內(nèi)分泌唾液（E1 波），蚜蟲口針在韌皮部篩分子內(nèi)部被動(dòng)取食（E2 波）[10]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

用軟件style＋a 對(duì)波形進(jìn)行分析， 將各EPG參數(shù)分類統(tǒng)計(jì)后， 運(yùn)用SPSS22.0 軟件對(duì)棉蚜在不同時(shí)間上的各EPG 參數(shù)分別進(jìn)行分析。 因各參數(shù)之間互不干擾，相互獨(dú)立，所以本研究采用3 種分析方法。 Np 波、C 波和Pd 波的所有參數(shù)，以及第1次E1 波出現(xiàn)時(shí)間、E2 波出現(xiàn)時(shí)間， 數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布規(guī)律，故采用單因素方差分析（事后比較采用最小顯著差數(shù)（LSD）和鄧肯氏（Duncan's）法）；F 波參數(shù)以及其余E1 波、E2 波參數(shù)， 數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布規(guī)律， 故采用非參數(shù)檢驗(yàn) （Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)）。 并以“刺探波形總時(shí)間”為指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析（組間聯(lián)接法）。

2 結(jié)果與分析

2.1 棉蚜口針在韌皮部之外的刺探行為

棉蚜口針在韌皮部之外刺探行為對(duì)應(yīng)的EPG參數(shù)見表1。

Np 波總次數(shù)在08∶00―10∶00 顯著低于除16∶00―17∶00 外的其他時(shí)段（P＜0.05）；08∶00―10∶00 和 16∶00―18∶00 的 Np 波總時(shí)間最短，以及 08∶00―11∶00 和 16∶00―19∶00 的 Np波平均持續(xù)時(shí)間較短，與其他時(shí)段的差異均達(dá)顯著水平（P＜0.05）。

C 波出現(xiàn)的早晚反映棉蚜對(duì)葉肉細(xì)胞間隙刺探的主動(dòng)性程度。 在 08∶00―10∶00 和 16∶00―18∶00，C 波出現(xiàn)的時(shí)間顯著早于其他時(shí)段 （P＜0.05）。 其中在 08∶00―9∶00 和 16∶00―17∶00時(shí)段的C 波顯示，接通電源后26 s 左右，棉蚜開始刺探棉花葉片。 C 波總次數(shù)在16∶00―17∶00 顯著高于其他時(shí)段，C 波總時(shí)間在08∶00―10∶00和16∶00―18∶00 顯著高于其他時(shí)段；而在 15∶00―16∶00，C 波總時(shí)間和總次數(shù)均達(dá)到最低， 并與其他時(shí)段差異顯著（P＜0.05）。 C 波平均持續(xù)時(shí)間在08∶00―09∶00 最長(zhǎng)， 在 09∶00―11∶00 和17∶00―18∶00 次之，在 11∶00―12∶00、15∶00―17∶00 和 18∶00―19∶00 較短。

Pd 波最早在 08∶00―10∶00 和 16∶00―18 ∶00 出 現(xiàn) ，10 ∶00 ― 11 ∶00 次 之 ， 最 晚 在11 ∶00―12∶00、15∶00―16∶00 和 18∶00―19∶00 出現(xiàn)；Pd 波總時(shí)間在 08∶00―10∶00 和16∶00―19∶00 較高， 在 15∶00―16∶00 最短；Pd 波總次數(shù)在 09∶00―10∶00 和 16∶00－17∶00較高，在 15∶00―16∶00 最低；而 Pd 波平均持續(xù)時(shí)間在 09∶00―10∶00 和 16∶00―17∶00 較低。

F 波在 08∶00―10∶00、11∶00―12∶00 和16∶00―17∶00 沒有出現(xiàn)。F 波總時(shí)間和平均持續(xù)時(shí)間在 15∶00―16∶00 最長(zhǎng)，在 17∶00―19∶00次之，在10∶00―11∶00 最短，但差異均未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。 F 波總次數(shù)和有 F 波的個(gè)體數(shù)在 10∶00―11∶00 和 15∶00―16∶00 較高。

2.2 棉蚜口針在韌皮部取食的刺探行為

棉蚜口針在韌皮部之內(nèi)刺探、分泌唾液和吸食汁液行為對(duì)應(yīng)的EPG 參數(shù)見表2。

E1 波在 08∶00―10∶00 和 16∶00―17∶00較早出現(xiàn)，而在 15∶00―16∶00 和 18∶00―19∶00出現(xiàn)最晚；E1 波總次數(shù)在各時(shí)段均無顯著差異（P＞0.05）； 在 11∶00―12∶00，E1 波總時(shí)間和平均持續(xù)時(shí)間略高于其他時(shí)段，但差異未達(dá)到顯著水平；各個(gè)時(shí)段有E1 波的個(gè)體數(shù)差異不大。

00 19∶0－0 18∶0 0 18∶00－7∶1 a 7 4.5 2.50±1 ab 4.81 0±11.5 b 9 33.7 4 2.02±10 1 c 6 90.3 1 8.35±61 c 9.04 1 6.85±8 cd 6.79 1 9.65±5 b 8 5.7 9.82±5 c 4.51 1±40.8 de 1 7.2 2.50±5 cd 5.63 0±55.0 c 6 06.8 2 0.14±09 2 b 7.60 7 4.74±56 2 bc 9 4.3 0.21±4 ab 4.16 9±46.9 a 0.46 3 2.43±39 c 3 25.3 6±80.8 2 c b 1.77 3 8.38±10 c b 8.89 2 6.00±10 ab 6.64 6 9.48±19 ab 4.72 5 5.15±19 ab 6 0.1 1.82±ab 0.23 5±1.8 a 0.35 5±0.12 a 5 0.3 25±0.1 a 2 54.1 2 9.84±8 a 5 70.5 2 5.65±9 a 2 54.1 2 9.84±8 a 5 70.5 2 5.65±9 3 0.1 3 0.1數(shù)參G P E的時(shí)部皮韌達(dá)到次1第到始開探刺從中段時(shí)個(gè)8在蚜棉1表段時(shí)數(shù)參G P E 00 17∶0－0 16∶0 0 16∶0－0 5∶1 00 2∶1 00－1∶1 00 11∶0－0 10∶0 0 0∶1 00－9∶0 00 09∶0－0 08∶bc 2 3.1 8.00±ab 7 4.1 0±10.5 ab 1.81 1.13±1 a 1 3.5 0±13.5 c 2.93 6.00±c 6 0.7 0±5.0數(shù)次總波p N c 2 15.5 1 363.13±a 442.897.95±73 1 a 1 25.4 3 5.32±49 1 b 0 34.8 2 949.71±c 155.509.35±35c 4 13.9 1 5.43±36/s間時(shí)總波p N d 2.99 1 47.28±a 38.03 6±77.1 1 b 8.02 2 4.78±13 cd 16.18 1±71.5 cd 2 11.3 2.78±6 cd 5.50 1 2.02±7/s間時(shí)續(xù)持均平波p N e 6 4.9 23.83±a 3 7.2 6±69.8 ab 0.90 1 2.74±6 b 2 7.5 8±60.1 d 5.53 2.96±3 de 6 9.0 1±28.7/s間時(shí)現(xiàn)出波C次1第a 9 4.2 72.13±f 10.08 5±29.7 e 3.98 5.88±4 de 7 5.9 5±51.7 b 5.24 4.00±6 bc 2 6.3 8±60.3數(shù)次總波C a 6 61.0 1 922.81±2 e 424.392.87±05 1 d 1 22.8 1 6.29±71 1 c 1.18 11 5±79.0 2 2 a 184.598.97±94 2 a 157.416.09±96 2/s間時(shí)總波C bc 5 3.3 40.65±c 12.43 4±35.5 c 3.47 7.60±3 ab 2 6.7 9±44.6 ab 3.51 6.26±4 a 8 4.9 2±49.5/s間時(shí)續(xù)持均平波C c 6.88 2 250.63±a 29.37 1±63.1 3 a 1.87 2 1.65±38 b 32.55 3±30.1 3 c 6 27.4 8.22±27c 22.31 2±49.8 2/s間時(shí)現(xiàn)出波d P次1第a 1.99 2 155.25±d 19.40 3±44.6 cd 4.55 2 6.50±7 cd 41.47 5±72.7 ab 7 34.9 8.88±13bc 0.14 4 6.50±10數(shù)次總波d P a 5.07 4 252.56±c 52.11 4±14.8 1 bc 4.61 3 2.79±15 c b 63.39 8±68.1 1 ab 9 50.1 6.40±21ab 2.37 6 1.25±21/s間時(shí)總波d P b 3 0.1 1.62±ab 9 0.1 5±2.5 ab 0.20 2.04±a 1 6.7 9±4.3 b 0.07 1.57±ab 6 0.3 9±2.0/s間時(shí)續(xù)持均平波d P―a 6 0.4 5±0.2―a 6 0.4 5±0.2――數(shù)次s）總10于（大波F―a 0.0266 5±47.4 3―a 1.6110 0±54.5――/s間時(shí)）總s 10于（大波F―a 0.0266 5±47.4 3―a 1.6110 0±54.5――/s 間時(shí)續(xù)持均s）平10于（大波F―0.25―0.25――數(shù)體個(gè)）的s 0 1于（大波F有。）5 0.0（P＜著顯異差示表母字寫小同不后字?jǐn)?shù)行一同；據(jù)數(shù)形波的應(yīng)對(duì)無段間時(shí)該示表”―“，差準(zhǔn)標(biāo)±值均平為據(jù)數(shù)：注

0 0 19∶00－8∶1 0 0 18∶00－7∶1 a 18.47 1 9±984.9 2 bc 0 19.8 2 1.44±45 2 a 3 2.3 0±2.5 a 1.77 3.00±a 5.50 5 9±64.3a 9.93 3 0.07±7 a 4.27 1 9±16.7a 8.88 0.81±2 0.630.88b 9.84 2 8±444.7 3 b 2.37 5 2.75±42 3 a 1 0.7 5±0.7 a 0.74 0.63±a 4 9.1 3±7.5 a 5.44 1 2.50±1 a 6 5.7 7±5.8 a 0.59 1 9.83±0.630.50a 1.13 6 2±71.9a 3.15 4 2.56±8 a 7 0.4 6±0.5 a 0.33 0.74±a 8 0.0 7±0.0 a 0.15 0.14±數(shù)參G P E的時(shí)束結(jié)錄記到部皮韌達(dá)到次1第從中段時(shí)個(gè)8在蚜棉2表段時(shí)數(shù)參G P E 0 0 17∶00－6∶1 0 0 16∶00－5∶1 0 0 12∶00－1∶1 0 0 11∶00－0∶1 0 0 10∶00－9∶0 0 0 09∶00－8∶0 d 3.34 13 1±49.6 1 2 a 9.0021 2±97.5 0 3 b 93.53 8±07.5 6 2 bc 7 39.0 1 7.96±40 2 cd 1 69.3 1 5.21±28 2 cd 6 05.8 2 4.58±26 2/s間時(shí)現(xiàn)出波1 E次1第a 0.64 3±1.1 a 1 3.0 5±2.7 a 9 1.4 5±2.2 a 2.64 3.13±a 0 1.6 1.63±a 0 1.2 1.00±數(shù)次總波1 E a 1 17.5 7±29.1 a 57.60 2±64.3 a 2.1113 9±02.2 2 a 2.58 5 0.24±6 a 0.94 4 2.52±4 a 7.85 2 4.14±2/s間時(shí)總波1 E a 9.56 8±22.5 a 14.31 2±16.2 a 45.80 8±69.1 a 0.10 1 2.00±1 a 4.55 1 7.00±1 a 4.72 1 2.90±1/s間時(shí)續(xù)持均平波1 E 0.880.630.750.630.63 0.50數(shù)體個(gè)的波1 E有c 8 61.3 2±48.2 1 3 a 36.82 6±93.2 5 3 a 66.67 9±16.4 5 3 b 8 25.7 1 9.16±36 3 c 9 02.8 1 7.18±24 3 c 3 06.7 1 7.27±18 3/s間時(shí)現(xiàn)出波2 E次1第a 0.35 3±0.1 a 1 0.7 5±0.2 a 3 2.4 5±1.2 a 1.07 1.00±a 9 1.3 0.75±a 4 1.6 0.88±數(shù)次總波2 E a 3.41 1±1.2 a 8 1.3 9±0.4 a 34.40 9±16.5 a 4.64 1 3.25±1 a 1.95 2 2.00±1 a 2.31 2 1.92±1/s間時(shí)總波2 E a 3.41 1±1.2 a 9 0.6 4±0.2 a 2 6.3 2±4.5 a 7.32 6.63±a 1 8.4 6.08±a 2 6.3 3.41±/s間時(shí)續(xù)持均平波2 E 0.130.130.380.500.38 0.25數(shù)體個(gè)的波2 E有a 5 20.0 7±30.3 a 57.84 1±64.8 a 0.9214 7±18.8 2 a 4.09 6 3.49±7 a 2.03 5 4.52±5 a 6.39 4 6.05±3/s間時(shí)總）波2 E+（E1 E a 0.35 6±0.8 a 1 0.5 2±0.6 a 4 0.4 0±0.7 a 0.44 0.52±a 6 0.4 0.51±a 5 0.4 0.38±波E個(gè)整占間時(shí)總1 波E例比的間時(shí)a 0.05 2±0.0 a 2 0.0 1±0.0 a 1 0.1 5±0.0 a 0.12 0.11±a 9 0.1 0.11±a 2 0.2 0.12±波E個(gè)整占間時(shí)總波2 E例比的間時(shí)。）0.05（P＜著顯異差示表母字寫小同不后字?jǐn)?shù)行一同；差準(zhǔn)標(biāo)±值均平為據(jù)數(shù)：注

E2 波最早在 08∶00―10∶00 和 16∶00―17∶00 出現(xiàn)，10∶00―11∶00 和 17∶00―19∶00次之，在 11∶00―12∶00 和 15∶00―16∶00 出現(xiàn)最晚；在 15∶00―17∶00，E2 波總次數(shù)、總時(shí)間、平均持續(xù)時(shí)間和有E2 波的個(gè)體數(shù)均低于其他時(shí)間段，但差異未達(dá)到顯著水平（P＞0.05），在其他時(shí)間段 E2 波總次數(shù)、 總時(shí)間等參數(shù)差異不大。 在11∶00―12∶00，E 波總時(shí)間略高于其他時(shí)間段，但所有時(shí)段之間均無顯著差異（P＞0.05）；在整個(gè)E 波總時(shí)間中，E1 波時(shí)間占比高，E2 波時(shí)間占比低，且在各個(gè)時(shí)段之間差異不顯著。

2.3 不同時(shí)段中棉蚜刺探波形與非刺探波形時(shí)間的比較及聚類分析

圖1 棉蚜在不同時(shí)段中刺探波形和非刺探波形時(shí)間占相應(yīng)時(shí)段總時(shí)間的百分比

通過比較棉蚜在不同時(shí)段刺探波形 （C 波、Pd波、F 波和 E 波）和非刺探波形（Np 波）時(shí)間占相應(yīng)時(shí)段總時(shí)間（簡(jiǎn)稱“總時(shí)間”）的百分比（圖1）發(fā)現(xiàn)，在各個(gè)時(shí)段中， 各種EPG 波形時(shí)間占總時(shí)間的比例存在較大差異。C 波和Np 波為優(yōu)勢(shì)波形，2 個(gè)波形的時(shí)間和占總時(shí)間的80%以上。 Np 波時(shí)間在08∶00―10∶00 和 16∶00―18∶00 中的比例較其他時(shí)間段少，且在08∶00―10∶00 和 16∶00―17∶00 中的比例相差極小； 而在15∶00―16∶00中最高， 占波形總時(shí)間的50%以上。 C 波時(shí)間在08∶00―10∶00 和 16∶00―17∶00 所占比例較高，均超過 80%；而在 11∶00―12∶00 和 15∶00―16∶00 中， 所占比例較低， 均低于波形總時(shí)間的50%。 Pd 波時(shí)間所占比例在各個(gè)時(shí)段中差異不大，在 16∶00―17∶00 略高于其他時(shí)段，在 15∶00―16∶00 所占比例最低。F 波時(shí)間在 15∶00―16∶00中所占比例最高，占總時(shí)間的10%以上，在其他3個(gè)時(shí)段差異不大。 E 波時(shí)間在11∶00―12∶00 中所占比例較高，在其他時(shí)段差異不大。

采用最長(zhǎng)距離法以棉蚜在不同時(shí)段中4 種刺探波形（C 波、Pd 波、F 波和 E 波）的時(shí)間為指標(biāo)進(jìn)行聚類分析， 可以把試驗(yàn)的8 個(gè)時(shí)段大致分為3類：第Ⅰ類為 08∶00―09∶00、09∶00―10∶00、16∶00―17∶00 和 17∶00―18∶00， 第Ⅱ類為10∶00―11∶00、11∶00―12∶00 和 18∶00―19∶00，第Ⅲ類為 15∶00―16∶00（圖2）。 對(duì)以上3 類時(shí)段中的4 種刺探波形時(shí)間進(jìn)行方差分析發(fā)現(xiàn)，其均存在顯著差異（P＜0.05）：C 波和 Pd 波時(shí)間在第Ⅰ類中顯著高于其他2 類，在第Ⅲ類中這2種波形時(shí)間最短；F 波和E 波時(shí)間在3 類分組之間無顯著差異。以上結(jié)果說明棉蚜在這3 類時(shí)間段上的刺探行為的主動(dòng)性存在差異（表3）。

圖2 棉蚜在8 個(gè)時(shí)間段刺探行為的聚類分析結(jié)果

表3 3 類時(shí)段中4 種刺探波形的時(shí)間比較 s

3 討論

刺吸式昆蟲的刺探過程從口針接觸植物表面開始，穿刺表皮至韌皮部的多層細(xì)胞，最終到達(dá)韌皮部吸食植物汁液。 EPG 技術(shù)作為一種研究刺吸式昆蟲取食行為的電生理技術(shù)，具有試驗(yàn)周期短、試驗(yàn)環(huán)境可控、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，可以在室內(nèi)條件下，根據(jù)輸出波形的不同，分析昆蟲生理活動(dòng)的差異[10,12]。

本研究分析了棉蚜在一天8 個(gè)不同時(shí)段中刺探主動(dòng)性的差異，結(jié)果表明：棉蚜在試驗(yàn)階段中，均表現(xiàn)出了嘗試刺探的意愿；并且在08∶00―10∶00和16∶00―18∶00，棉蚜嘗試刺探意愿強(qiáng)烈，短暫爬行、停息或?qū)な?，口針頻繁在葉肉細(xì)胞間隙和葉肉細(xì)胞中刺探，多次在韌皮部篩管細(xì)胞中分泌唾液和被動(dòng)吸食。 以上EPG 現(xiàn)象均反映出棉蚜在這段時(shí)間中，刺探主動(dòng)性強(qiáng)、刺探次數(shù)多和取食葉片汁液頻繁等特點(diǎn)。產(chǎn)生此現(xiàn)象的原因可能有：（1）環(huán)境因素。 在這段時(shí)間中，環(huán)境溫度和光照強(qiáng)度均處于適宜的范圍，有利于棉蚜的刺探和吸食。（2）昆蟲因素。在長(zhǎng)期進(jìn)化過程中，昆蟲產(chǎn)生了一定的節(jié)律性，能夠調(diào)節(jié)本身的行為和生理變化，使其與外部環(huán)境變化相適應(yīng)。（3）植物因素。植物在不同時(shí)間產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)種類和濃度，以及對(duì)昆蟲的吸引力的不同，可能也是產(chǎn)生上述現(xiàn)象的原因之一。

對(duì)不同時(shí)段中棉蚜各種EPG 波形時(shí)間的比較及聚類分析結(jié)果顯示，棉蚜在葉片表面爬行、尋找刺探位點(diǎn)和在葉肉細(xì)胞間隙中刺探的時(shí)間較多，占整個(gè)取食過程時(shí)間的80%以上，甚至超過90%，且在各個(gè)時(shí)段之間的差異非常明顯。棉蚜口針位于葉肉細(xì)胞間隙和細(xì)胞內(nèi)的刺探時(shí)間在08∶00―10∶00和16∶00―18∶00 的比例最高， 且大幅高于其他時(shí)段，說明在這段時(shí)間中，棉蚜口針在細(xì)胞內(nèi)和間隙中移動(dòng)， 持續(xù)尋找合適取食部位。 棉蚜口針在15∶00―16∶00 遇到較強(qiáng)的機(jī)械阻力， 這可能與棉花自身的防御反應(yīng)和自身的植物節(jié)律密切相關(guān)，產(chǎn)生這種現(xiàn)象的具體原因目前尚不清楚。 棉蚜在10∶00―12∶00 和 18∶00―19∶00， 在韌皮部分泌唾液、被動(dòng)吸食汁液的時(shí)間較長(zhǎng)，說明在這段時(shí)間中，棉蚜對(duì)于韌皮部汁液喜好程度高。 這可能與環(huán)境溫度和光照強(qiáng)度有關(guān)， 因?yàn)榄h(huán)境溫度的升降、光照強(qiáng)度的強(qiáng)弱，都有可能刺激棉蚜口針在植物韌皮部停留。 以上結(jié)果顯示，棉蚜在8 個(gè)不同時(shí)段的取食、刺探行為的變化，初步反映棉蚜在時(shí)間上存在不同的刺探主動(dòng)性，可為棉蚜取食行為的研究提供參考和新思路，豐富EPG 技術(shù)應(yīng)用方面的內(nèi)容。

4 結(jié)論

利用刺吸電位儀記錄棉蚜在一天中8 個(gè)不同時(shí)段的取食、刺探行為，比較分析結(jié)果顯示，在試驗(yàn)條件下，08∶00―10∶00 和 16∶00―18∶00，棉蚜刺探主動(dòng)性強(qiáng)、刺探次數(shù)多且時(shí)間長(zhǎng)、取食葉片汁液頻繁。 這些結(jié)果可為棉蚜取食行為的進(jìn)一步研究提供參考。