徐路瓊，賀坤華，趙 瑜

云南省曲靖市第一人民醫(yī)院輸血科,云南曲靖 655000

Duffy血型系統(tǒng)是一種重要的血型系統(tǒng)，該血型系統(tǒng)中包括6種抗原，其中Fya和Fyb抗原的免疫原性不強(qiáng)，但其相應(yīng)抗體可引起速發(fā)型或遲發(fā)型溶血性輸血反應(yīng)以及新生兒溶血病[1]。在中國人群中，F(xiàn)y(a-b+)屬于稀有血型，因此，抗-Fya并不常見。筆者在上海市血液中心進(jìn)修期間，在1例肝內(nèi)膽管結(jié)石手術(shù)備血的患者血清中檢出抗-Fya，現(xiàn)將鑒定過程和備血策略分析如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 蔣某，女，71歲，漢族，江蘇南京人，有妊娠史，無輸血史，無藥物過敏史。血常規(guī)結(jié)果顯示，血紅蛋白(Hb)130 g/L，血小板(PLT)計數(shù)185×109/L。肝膽結(jié)石手術(shù)備血時發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體，故送至上海市血液中心鑒定抗體，要求備4個單位懸浮紅細(xì)胞。

1.2試劑與儀器 抗-A、抗-B血型定型試劑(批號：20171227)，抗-D(IgM)血型定型試劑(批號:20171811)，Ac、Bc、Oc試劑(批號:20195312)，抗人球蛋白試劑、抗-IgG、抗-C3d，批號：20185001、20185102、20185201)，篩選細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(批號：20197016)，國產(chǎn)譜細(xì)胞1～10(批號：20190530)，聚凝胺試劑(批號：20197502)均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供；Sanquin進(jìn)口譜細(xì)胞1～16、IgG抗-Fya、IgG抗-Fyb(批號：8000256600、8000236190、8000232692)。離心機(jī)(KA-2200)為日本久保田公司產(chǎn)品；孵育器、離心機(jī)(Incubator 37 SⅠ，centrifuge12 SⅡ)為瑞士達(dá)亞美公司產(chǎn)品，電熱恒溫水浴箱(BHW2)由北京市醫(yī)療設(shè)備廠提供。

1.3方法 ABO、RhD血型鑒定采用試管法；Duffy血型鑒定采用微柱疑膠法;交叉配血試驗采用經(jīng)典抗人球蛋白試驗、鹽水法、凝聚胺法。均按文獻(xiàn)[2]相關(guān)說明進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1血型鑒定 結(jié)果顯示，患者血型為O型、RhD陽性、Fy(a-b+)。

2.2直接抗人球蛋白試驗 結(jié)果顯示，多抗、單抗-IgG、單抗-C3、ABs對照凝集強(qiáng)度均為陰性。質(zhì)控試劑為陽性。因此，患者直接抗人球蛋白試驗結(jié)果為陰性。

2.3抗體篩選試驗 采用試管法在室溫下用生理鹽水直接離心，患者血清與篩選細(xì)胞均不凝集；經(jīng)典抗人球蛋白法和聚凝胺法結(jié)果顯示，患者血清與篩選細(xì)胞均出現(xiàn)凝集，提示患者血清中存在IgG性質(zhì)的抗體。見表1。

表1 抗體篩選試驗

注：+表示陽性，0表示陰性，/表示此項無數(shù)據(jù)。

2.4國產(chǎn)譜細(xì)胞對不規(guī)則抗體的鑒定 采用國產(chǎn)譜細(xì)胞對患者血清不規(guī)則抗體進(jìn)行鑒定，在國產(chǎn)譜細(xì)胞中除6號譜細(xì)胞稍弱外，其他譜細(xì)胞出現(xiàn)強(qiáng)度一致的凝集，疑似抗-Fya，見表2。

2.5進(jìn)口譜細(xì)胞對不規(guī)則抗體的鑒定 采用Sanquin進(jìn)口譜細(xì)胞進(jìn)一步對不規(guī)則抗體進(jìn)行鑒定，Poly法結(jié)果顯示，抗-Fya格局明顯，可以排除其他的不規(guī)則抗體。結(jié)合抗原檢測，可以確定血清中存在抗-Fya，見表3。

表2 國產(chǎn)譜細(xì)胞對不規(guī)則抗體的鑒定

注：+表示陽性；0表示陰性。

表3 采用Sanquin進(jìn)口譜細(xì)胞對不規(guī)則抗體的鑒定

注：+表示陽性；0表示陰性；/表示此項無數(shù)據(jù)。

2.6抗體效價測定 結(jié)果顯示，IgG抗-Fya效價為4。

2.7備血方案制訂 由于短時間內(nèi)無法找到相合血液，血液中心沒有給患者備血；患者年齡較大，未采取術(shù)前自體備血；聯(lián)系其他血站，也無Fy(a-b+)的血液庫存；患者直系親屬距離較遠(yuǎn)，不具備在家系中篩查同型血液的條件。因此建議臨床醫(yī)生充分評估后改變手術(shù)方式，減少術(shù)中出血，避免輸注血液?；颊邽楦蝺?nèi)膽管結(jié)石(左肝管)，原定手術(shù)切肝取石，將手術(shù)方式改為膽囊切除、膽總管探查取石，手術(shù)順利沒有輸血。

3 討 論

截至2018年2月7日，國際輸血協(xié)會(ISBT)確認(rèn)血型系統(tǒng)共36個，血型抗原共332個。Duffy血型系統(tǒng)于1950年被發(fā)現(xiàn)，1995年，ISBT將該血型系統(tǒng)編號為008[3]。Duffy血型系統(tǒng)中包含6個抗原，分別為Fya、Fyb、Fy3、Fy4、Fy5、Fy6，F(xiàn)ya和Fyb是最常見的兩個抗原，用血清學(xué)方法可以將Duffy血型系統(tǒng)分為4種表現(xiàn)型Fy(a+b-)、Fy(a-b+)、Fy(a+b+)和Fy(a-b-)，這4種血型在中國人群中的頻率分別為90.8%、0.3%、8.9%、0.0%[4-5]?？?Fy較為少見，大多是免疫過程產(chǎn)生，多數(shù)是妊娠刺激因素產(chǎn)生的抗-Fy，也存在其他原因產(chǎn)生的抗-Fy3[6]。

由于人種、民族、地域的不同，Duffy血型抗原的多態(tài)性存在較大差別[7]，因此商品化的抗篩細(xì)胞、譜細(xì)胞抗原也有差異。本例患者血清與國產(chǎn)譜細(xì)胞出現(xiàn)強(qiáng)度一致的全凝集，無法鑒定抗體的特異性，而Sanquin進(jìn)口譜細(xì)胞抗-Fya格局明顯，因此，對全凝集反應(yīng)強(qiáng)度一致、無明確反應(yīng)格局的抗體或弱抗體的檢測，應(yīng)選擇不同的試劑譜細(xì)胞鑒定[8]。

絕大多數(shù)中國人群血液中存在Fya抗原，缺乏Fya抗原者為稀有血型，這類患者一旦免疫產(chǎn)生抗-Fya則很難找到相配合的血液[9]。目前，稀有血型患者輸血途徑有自體輸血、親屬間的互助獻(xiàn)血、求助稀有血型庫。本例患者血清中檢出IgG性質(zhì)的抗-Fya，短時間內(nèi)無法找到相配合的血液，血站沒有備血。而患者的臨床診斷結(jié)果為膽總管結(jié)石和肝內(nèi)膽管結(jié)石(左肝管)，主治醫(yī)師與家屬詳細(xì)溝通后家屬考慮切肝出血風(fēng)險較大，患者家屬同意行膽囊切除，膽總管探查取石，手術(shù)順利沒有輸血。可見對于存在IgG抗-Fya的患者，在無法提供Fy(a-b+)血液的情況下，肝膽結(jié)石手術(shù)可通過改變手術(shù)方式避免輸血。

不規(guī)則抗體在缺乏相應(yīng)抗原免疫再刺激時，在體內(nèi)會逐漸減弱，直至效價為零，無法測得。不同性質(zhì)的不規(guī)則抗體在體內(nèi)的消減速度存在很大的差異[10]。國外有報道顯示，個別病例抗-D在體內(nèi)持續(xù)存在超過50年[11]。本例患者71歲，無輸血史，有妊娠史，育有一子，現(xiàn)年46歲，如果該抗體是妊娠產(chǎn)生的，則該抗-Fya在體內(nèi)持續(xù)超過40年。