劉億托 黎美玲
(佛山市高明區(qū)人民醫(yī)院 佛山 528500)
在中醫(yī)中治療疾病時(shí)是根據(jù)癥候,在脾胃實(shí)證中最為常見(jiàn)的一個(gè)證型為濕熱證,在消化系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的作用[1]。熱休克蛋白是指生物體在不良環(huán)境的作用下所產(chǎn)生的一種應(yīng)激蛋白,針對(duì)胃黏膜完整及減輕胃黏膜炎癥具有維持的功效,且具有重要意義[2]。在本次研究中旨在分析慢性淺表性胃炎脾胃濕熱證與熱休克蛋白70表達(dá)的關(guān)系,現(xiàn)報(bào)道如下。
將2018年1月~2018年12月我院收治135例慢性淺表性胃炎患者作為本次研究對(duì)象,其中80例脾胃濕熱證患者為A組,其余55例脾氣虛證患者為B組,另選取同一時(shí)間非慢性淺表性胃炎50例患者為C組。A組中男40例,女40例,年齡36~64歲,平均年齡(50.0±5.3)歲;B組中男35例,女25例,年齡36~62歲,平均年齡(49.0±5.1)歲;C組中男30例,女20例,年齡36~63歲,平均年齡(49.5±5.2)歲。3組患者各項(xiàng)數(shù)據(jù)資料比較并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05。
(1)取樣:參加本次研究患者均利用電子胃鏡進(jìn)行檢查,于胃竇距離幽門2~3cm部的大彎及小彎除取胃黏膜組織2塊作為標(biāo)本,然后置于多聚甲醛中固定好。(2)試劑與儀器:儀器有BOSTER公司提供;試劑有防脫片磨砂玻璃、DAB顯色試劑盒、BSA封閉劑等。(3)檢測(cè)方法:使用蘇木精-伊紅染色,對(duì)事先準(zhǔn)備好的胃黏膜組織進(jìn)行退脫水、包埋、切片等一系列處理措施,然后經(jīng)蘇木精進(jìn)行襯染,使用鹽酸乙醇金進(jìn)行分化,使用伊紅溶液進(jìn)行浸染等,在脫水后進(jìn)行二甲苯透明、中性樹膠封片。最后利用顯微鏡對(duì)胃黏膜的炎癥程度進(jìn)行觀察。(4)檢測(cè)熱休克蛋白70蛋白表達(dá):對(duì)事先準(zhǔn)備好的胃黏膜標(biāo)本進(jìn)行石蠟包埋、切片等一系列處理,然后加入小鼠抗熱休克蛋白70抗體、生物素化山羊抗小鼠IgG、試劑SABC,經(jīng)DAB進(jìn)行顯色、Mayer蘇木精染色、滴入二甲苯透明、中性樹脂封片。利用光學(xué)顯微鏡對(duì)其進(jìn)行觀察,然后攝取圖像并進(jìn)行分析。
染色的強(qiáng)度積分×染色面積比=熱休克蛋白70表達(dá)。
C組大部分患者并無(wú)胃黏膜炎癥,A組、B組與C組患者患者輕度、重度胃黏膜炎癥程度比較差異顯著(P<0.05),見(jiàn)表1。
表1 3組患者胃黏膜炎癥程度的對(duì)比[n(%)]
分組無(wú)輕度中度重度A組a0304010濕重于熱05105濕熱并重0121510熱重于濕06106B組b0152713C組401000
注:a與C組比較,P<0.05;b與C組比較,P<0.05。
A組與B組患者染色強(qiáng)度積分×染色面積比均比C組患者大,數(shù)據(jù)差異顯著(P<0.05),見(jiàn)表2。
分組染色強(qiáng)度積分×染色面積比A組0.84±0.08b濕重于熱0.74±0.05a濕熱并重0.81±0.07b熱重于濕1.07±0.09bB組0.78±0.06bC組0.34±0.03
注:a與C組比較,P<0.05;b與C組比較,P<0.05。
通過(guò)大量研究證實(shí),脾胃濕熱證與炎癥有著直接的關(guān)系,脾胃濕熱是比較嚴(yán)重的一個(gè)階段,針對(duì)慢性胃炎濕熱型患者來(lái)說(shuō)其臨床表現(xiàn)有平坦性糜爛性胃炎、紅斑滲出等,胃黏膜病理表現(xiàn)有水腫、急性充血等[3~4]。
熱休克蛋白是一種基因調(diào)控蛋白,一旦細(xì)胞受到損害后,細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)構(gòu)型發(fā)生改變,隨之細(xì)胞功能逐漸消退,細(xì)胞發(fā)生應(yīng)激反應(yīng),從而激活熱休克基因,進(jìn)而形成熱休克蛋白[5~6]。熱休克蛋白對(duì)合成細(xì)胞內(nèi)蛋白起到促進(jìn)的作用,從而維持細(xì)胞的的正常形態(tài)與功能,與有害因素進(jìn)行對(duì)抗。熱休克蛋白70是家族最多的一種應(yīng)急蛋白,同時(shí)也是最重要的,可在所有細(xì)胞中有表達(dá)。熱休克蛋白70在減輕胃黏膜炎癥與維持黏膜的完整中發(fā)揮著重要的作用,熱休克蛋白70誘導(dǎo)表達(dá)的量與胃黏膜損傷程度呈相反的關(guān)系,體外培養(yǎng)的胃黏膜上皮通過(guò)高溫、低濃度乙醇等處理之后,增加熱休克蛋白,隨之增加細(xì)胞的耐受力,當(dāng)消化性潰瘍逐漸愈合后,隨之熱休克蛋白70有所提升,也就是說(shuō)熱休克蛋白70促進(jìn)潰瘍的愈合[7~8]。在本次研究中,慢性淺表性胃炎脾胃濕熱證患者熱休克蛋白70水平比較高。
當(dāng)機(jī)體受到邪氣的侵犯之后,陽(yáng)氣會(huì)有所亢奮,起到保護(hù)機(jī)體的作用,在不良環(huán)境因素的作用下促進(jìn)熱休克蛋白70的合成,因此熱休克蛋白70為機(jī)體陽(yáng)氣的范圍。當(dāng)機(jī)體熱證比較明顯時(shí),熱休克蛋白70的表達(dá)也就越多,因此在脾胃濕熱證的各個(gè)亞型中,熱休克蛋白70表達(dá)在脾胃濕熱中最多的是熱重于濕,然后是濕熱并重,最后時(shí)濕重于熱,由此可見(jiàn)熱休克蛋白高表達(dá)與中醫(yī)熱證有著密切的關(guān)系。
綜上所述,熱休克蛋白70為機(jī)體陽(yáng)氣的范圍,在熱證中表達(dá)顯著,熱證與濕證對(duì)熱休克蛋白70的表達(dá)具有一定的影響。