★ 解衛(wèi)星 蔡?hào)|明 張忠立 劉亞 張曉琳 馬建瑞 王建輝*（.威爾芬（北京）科技發(fā)展有限公司 北京 0300；.江西中醫(yī)藥大學(xué)芳香植物健康研究所 南昌 30004）

苦橙（Citrus aurantiumL.）是蕓香科（Rutaceae）柑橘屬（Citrus）植物，原產(chǎn)自阿爾及利亞、摩洛哥、突尼斯、西班牙等許多國(guó)家［1］，如今突尼斯和摩洛哥的產(chǎn)量最高，品質(zhì)也相當(dāng)［2］。橙花精油是從苦橙花中萃取出來(lái)的天然活性物質(zhì)，具有淡雅的花香和果香，被廣泛應(yīng)用于食品、化妝品和法系芳香療法等領(lǐng)域［3］。在日化產(chǎn)品中，橙花精油是香水配方中一個(gè)重要原料，可以修飾素蘭香型的頂香，同時(shí)也是花香配料中的秘密武器；在食品中，橙花精油被廣泛用在許多軟飲料香精中［4］，同時(shí)因其溫和、安全的特征，在兒童食品中也可廣泛應(yīng)用。在法系芳香療法領(lǐng)域，橙花精油可以緩解神經(jīng)緊張、壓力、失眠、焦慮等癥狀。橙花精油除其獨(dú)特的香氣優(yōu)勢(shì)外，還具有多種功效，研究表明橙花精油能鎮(zhèn)痛和抗炎［1，5］，同時(shí)橙花精油具有較強(qiáng)的抑菌功能，能夠廣泛的抑制細(xì)菌和真菌。

甜橙（Citrus sinensis（L.） Osbeck）是蕓香科（Rutaceae）柑橘屬（Citrus）植物。我國(guó)栽培的甜橙品種主要有臍橙、夏橙、血橙和錦橙，目前種植面積和產(chǎn)量位居世界第一，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［6-7］。中國(guó)江西贛南有180 萬(wàn)畝甜橙種植地，有70%～80%的花為雄性退化的不育花和畸形花，如果直接丟掉，會(huì)大大造成資源的浪費(fèi)。國(guó)內(nèi)應(yīng)用廣泛的摩洛哥苦橙花精油存在運(yùn)輸不便、供貨時(shí)間長(zhǎng)和高成本等問(wèn)題，因甜橙與苦橙為同一種屬的植物，為了合理的利用資源，彌補(bǔ)摩洛哥苦橙花精油的市場(chǎng)不足，開(kāi)拓國(guó)內(nèi)甜橙花精油的市場(chǎng)。本研究以中國(guó)江西贛南甜橙花為原料，通過(guò)制備其精油，研究其與摩洛哥苦橙花精油成分和功效的異同，為后續(xù)開(kāi)拓中國(guó)的橙花精油市場(chǎng)及提高中國(guó)橙花的利用率提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器 美國(guó)安捷倫7890A-5977E

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。摩洛哥的苦橙花精油，水為雙蒸餾水。采集中國(guó)江西贛南橙樹(shù)（美國(guó)紐荷爾橙與本地橙雜交所培育，產(chǎn)地：江西信豐）上的新鮮甜橙花，過(guò)夜晾干，備用。

1.2 中國(guó)江西贛南甜橙花精油制備 采用水蒸氣

蒸餾裝置，準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量的中國(guó)江西贛南甜橙花置于蒸餾瓶上，按固液比1∶2 加入雙蒸餾水，蒸餾6h 后，分離收集，得到橙花精油。

1.3 GC-MS 檢測(cè)精油成分 分別取0.5μL 的中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油進(jìn)行GCMS 測(cè)試。GC 條件：HP-INNOWAX 型毛細(xì)管柱（30m× 0.25mm×0.25μm）；升溫程序：初始溫度60℃，以4℃/min 的速率升至 100℃，然后以2℃/min 的速率升至 200℃，保持5min，最后以4℃/min 的速率升至240℃，保持30min。載氣流速為1mL/min，分流進(jìn)樣，分流比40∶1，進(jìn)樣量 0.12μL，進(jìn)樣口溫度250℃。MS 條件：EI 源電子能量為70eV；電子倍增器電壓為1.00kV，質(zhì)量掃描范圍30～500；離子源溫度230℃，接口溫度為250℃。利用NIST11 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫(kù)和公司自建譜庫(kù)對(duì)采集到的質(zhì)譜圖進(jìn)行檢索，采用色譜峰面積歸一化法定量。

1.4 「精油四象限」論述精油功效特點(diǎn) 法國(guó)芳香療法專(zhuān)家法蘭貢在1990 年與潘威爾醫(yī)師合著《精確芳療學(xué)》一書(shū)，此書(shū)基于醫(yī)學(xué)臨床與芳香分子研究的證據(jù)，結(jié)合古希臘著名醫(yī)生希波克拉底的氣質(zhì)體液說(shuō)，將精油當(dāng)中的化學(xué)分子做了分類(lèi)即化學(xué)型的分類(lèi)，并發(fā)展出一套稱(chēng)為「精油四象限」的精油化學(xué)結(jié)構(gòu)模型［8］。本研究采用「精油四象限」，論述中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油功效特點(diǎn)。

2 結(jié)果與分析

圖1～2 分別為中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油總離子流圖。兩張圖譜只對(duì)大于3 倍噪音信號(hào)的峰進(jìn)行積分。從兩張圖中可以直觀看出，兩種橙花精油的化合物種類(lèi)和相對(duì)百分含量是有差異的。

圖1 中國(guó)江西贛南甜橙花精油總離子流

圖2 摩洛哥苦橙花精油總離子流

表1 是對(duì)中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油化合物的直觀統(tǒng)計(jì)，由表1 數(shù)據(jù)可知，兩種橙花精油總揮發(fā)性化合物個(gè)數(shù)為59 種，通過(guò)譜庫(kù)檢索和人工解析，可以鑒定出55 種化合物，占總離子流圖的93.22%。其中江西贛南甜橙花精油揮發(fā)性化合物為45 種，鑒定出43 種化合物，占總離子流圖的95.55%；摩洛哥苦橙花精油總揮發(fā)性化合物為40 種，鑒定出38 種化合物，占總離子流圖的95.00%。江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油共有化合物個(gè)數(shù)為26 種，占總化合物種類(lèi)的44.07%。江西贛南甜橙花精油主要化合物為檜烯（17.168%）和芳樟醇（12.632%）；摩洛哥苦橙花精油主要化合物為芳樟醇（33.121%）和乙位蒎烯（10.796%）。

表1 中國(guó)江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油成分構(gòu)成

（續(xù)表）

表2 中國(guó)江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油成分對(duì)比表

表2 為江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油的成分對(duì)比表，從表中數(shù)據(jù)可知，江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油成分組成主要為單萜烯、單萜烯醇、倍半萜烯、酯類(lèi)化合物、倍半萜烯醇、單萜烯醇和氧化物7 大類(lèi)化合物。在7大類(lèi)成分對(duì)比中各有異同。中國(guó)江西贛南甜橙花精油含量最高的為單萜烯化合物（52.010%），摩洛哥苦橙花精油含量最高的為單萜烯醇化合物（43.154%）。在7 大類(lèi)化合物中差異最為明顯的主要為單萜烯、單萜烯醇和酯類(lèi)化合物。兩種橙花精油在單萜烯化合物種類(lèi)相似度為93.333%，但是江西贛南甜橙花精油較摩洛哥苦橙花精油的單萜烯總含量高14.812%，差異較大，且江西贛南甜橙花精油的主單萜烯成分為檜烯（17.168%）、檸檬烯（6.255%）和羅勒烯（6.113%），而摩洛哥苦橙花精油的主單萜烯成分為檸檬烯（15.300%）、乙位蒎烯（10.796%）和羅勒烯（4.918%）；江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油單萜烯醇化合物種類(lèi)上相似度為66.667%，但摩洛哥苦橙花精油總單萜烯醇的相對(duì)百分含量較江西贛南甜橙花精油高18.231%，差異較大，其主要差異來(lái)自于芳樟醇含量的差異。酯類(lèi)化合物在兩種精油的差異最為明顯，摩洛哥苦橙花精油的酯類(lèi)化合物種類(lèi)為4 種，總含量為9.899%，而在江西贛南橙花精油中未檢出。兩種橙花精油的在倍半萜烯、單萜烯醛、倍半萜烯醇和氧化物的差異較小，兩種精油的倍半萜烯化合物種類(lèi)個(gè)數(shù)一致，且化合物種類(lèi)相似度為66.67%，但是總含量上江西贛南甜橙花精油較摩洛哥苦橙花精油高2.266%；江西贛南甜橙花精油的單萜烯醛較摩洛哥苦橙花精油的個(gè)數(shù)多2 個(gè)，且總含量高2.008%；兩種橙花精油在倍半萜烯醇的總含量和單個(gè)化合物的相對(duì)百分含量是非常接近的，差異在摩洛哥苦橙花精油只比江西贛南甜橙花精油多一個(gè)桉油烯醇（0.095%）；兩種橙花精油的氧化物種類(lèi)和個(gè)數(shù)都一致，只是相對(duì)百分含量上略微有差異。從整體上來(lái)看，江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油的異同主要體現(xiàn)在，化合物種類(lèi)大體相同，在7 大類(lèi)化合物中，整體相似度為67.568%，差異主要體現(xiàn)在化合物的相對(duì)百分含量上。

精油化合物的組成與其功效息息相關(guān)。通過(guò)兩種精油七大類(lèi)化合物的異同，借助法系芳香療法「精油四象限」理論，繪得圖3～4。

圖3 中國(guó)江西贛南甜橙花精油成分四象限

圖4 摩洛哥苦橙花精油成分四象限圖

在「精油四象限」中，橫坐標(biāo)左側(cè)，是極性分子，越向左親水性越好；橫坐標(biāo)右側(cè)，是非極性分子，越向右親油性越好；縱坐標(biāo)上方，帶負(fù)電，越向上安撫舒緩效果越好；縱坐標(biāo)下方，帶正電，越向下提振和激勵(lì)效果越好［8］。通過(guò)圖3 和圖4 縱坐標(biāo)上方的數(shù)據(jù)對(duì)比得出，摩洛哥苦橙花精油在上方的成分高于中國(guó)江西贛南甜橙花精油，尤其是差異比較突出的酯類(lèi)化合物（9.899%），因此推測(cè)出摩洛哥苦橙花精油在安撫舒緩上的效果比中國(guó)江西贛南甜橙花精油好。從「精油四象限」圖下方數(shù)據(jù)對(duì)比分析，可以清晰的看出，中國(guó)江西贛南甜橙花精油在四象限的下方總含量（84.582%）和摩洛哥苦橙花精油（86.927%）是很接近的，從而推測(cè)兩款精油在提振和激勵(lì)整體效果上是比較接近的；但是中國(guó)江西贛南甜橙花精油在下方成分的分布上，右側(cè)單萜烯的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于左側(cè)單萜烯醇的含量，而摩洛哥苦橙花精油在下方左右兩側(cè)的成分含量分布較均勻。單萜烯的主要生理功效為抗病毒、抗菌，激勵(lì)、溫暖、止痛及消炎，而單萜烯醇的主要生理功效為強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)劑，保護(hù)免疫系統(tǒng)，促進(jìn)皮膚細(xì)胞修復(fù)及再生［7］。摩洛哥苦橙花精油的單萜烯醇含量較江西贛南甜橙花精油高18.231%，且其含量差異主要來(lái)自具有調(diào)理素作用的芳樟醇的差異，因此推測(cè)摩洛哥苦橙花精油在調(diào)節(jié)、保護(hù)免疫系統(tǒng)作用和幫助生物良好的適應(yīng)環(huán)境的變化上要優(yōu)于中國(guó)江西贛南甜橙花精油。江西贛南甜橙花精油的單萜烯含量較摩洛哥苦橙花精油高14.812%，且其差異主要來(lái)自具有抗菌、抗炎的檜烯含量上［9-10］，因此推測(cè)江西贛南甜橙花精油在抗菌、抗病毒和抗炎的功效上優(yōu)于摩洛哥苦橙花精油。從極性上分析兩種精油的差異可知，在「精油四象限」橫坐標(biāo)右側(cè)是非極性分子，越向右親油性越好，而具有親油特性的精油可以輕易的滲入皮膚，由此可以推測(cè)，中國(guó)江西贛南甜橙花精油比摩洛哥苦橙花精油的皮膚滲透性好，在化妝品中更利于吸收。

3 討論

通過(guò)中國(guó)江西贛甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油成分對(duì)比可知，中國(guó)江西贛南甜橙花精油揮發(fā)性化合物為45 種；摩洛哥苦橙花精油揮發(fā)性化合物為40 種，兩種精油成分種類(lèi)不盡相同，兩種橙花精油共有化合物為26 種，在總化合物種類(lèi)的占比為44.07%。江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油成分組成主要為單萜烯、單萜烯醇、倍半萜烯、酯類(lèi)化合物、倍半萜烯醇、單萜烯醇和氧化物7 大類(lèi)化合物。其中單萜烯、單萜烯醇和酯類(lèi)化合物的在兩種橙花精油中的差異較為明顯。單萜烯化合物在中國(guó)江西贛南甜橙花精油含量最高，而單萜烯醇化合物在摩洛哥苦橙花精油含量最高。兩種橙花精油在單萜烯化合物種類(lèi)相似度為93.333%，但是含量差異較大；在單萜烯醇化合物種類(lèi)上相似度和相對(duì)百分含量上都差異較大，其主要差異來(lái)自于芳樟醇含量的差異。酯類(lèi)化合物在兩種精油的差異最為明顯，摩洛哥苦橙花精油的酯類(lèi)化合物含量為9.899%，在江西贛南橙花精油中卻未檢出。其余四種化合物（倍半萜烯、單萜烯醛、倍半萜烯醇和氧化物）的總含量和單個(gè)化合物的相對(duì)百分含量是較為接近的。從整體上來(lái)看，江西贛南甜橙花精油與摩洛哥橙花苦精油的異同主要體現(xiàn)在，化合物種類(lèi)大體相同，在7 大類(lèi)化合物中，整體相似度為67.568%，差異主要體現(xiàn)在化合物的相對(duì)百分含量上。通過(guò)兩種橙花精油所含化合物在「精油四象限」分布對(duì)比可知，摩洛哥苦橙花精油因其比較突出的酯類(lèi)化合物在安撫舒緩上的效果優(yōu)于中國(guó)江西贛南甜橙花精油。因兩種橙花精油在「精油四象限」的下方總含量比較接近，因此中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油在提振和激勵(lì)整體效果上是比較類(lèi)似的。但是因?yàn)閮煞N橙花精油在下方左右兩側(cè)的分布存在差異，導(dǎo)致了中國(guó)江西贛南甜橙花精油在抗菌、抗病毒、抗炎和皮膚滲透性的功能上優(yōu)于摩洛哥苦橙花精油，而摩洛哥苦橙花精油在調(diào)節(jié)、保護(hù)免疫系統(tǒng)作用和幫助生物良好的適應(yīng)環(huán)境的變化上要優(yōu)于中國(guó)江西贛南甜橙花精油。目前為止，國(guó)內(nèi)橙花精油市場(chǎng)較少，本研究對(duì)于江西贛南甜橙花資源的利用和打開(kāi)中國(guó)橙花精油的市場(chǎng)奠定了理論基礎(chǔ)。