賁佳楠，張馨心，宮福帥，秦佳梅

（通化師范學(xué)院·吉林通化·134002）

暴馬丁香主要分布在我國的三北地區(qū)，東北是主產(chǎn)區(qū)[1]，是一種綜合利用率極高的樹種[2～4]。樹皮入藥稱暴馬子皮，具有止咳平喘、清肺化痰等功效，廣泛用于岑暴紅止咳片或膠囊的生產(chǎn)[5]。含多種藥用活性成分[6，7]，其中齊墩果酸具有護(hù)肝降酶、促進(jìn)肝細(xì)胞再生、抗炎、強(qiáng)心、利尿、降血糖、降血脂、鎮(zhèn)靜的作用[8]。還有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞的生成和轉(zhuǎn)移等作用[9]。是治療心腦血管和癌癥方面疾病的是重要原料之一。因其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，不易人工合成，只能從植物中提取[10]。因此，本實(shí)驗(yàn)將探究溫度對超聲提取暴馬丁香中齊墩果酸提取的影響，為了更好地利用和保護(hù)暴馬丁香資源提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料為2017年11月26日采自吉林省白山臨江的暴馬丁香的干皮和2018年5月13日采自同地暴馬丁香的枝條、葉片，將干皮和枝條剪成1～3cm小段，裝入尼龍紗袋中晾曬，葉片于室內(nèi)陰干。用FZ102型植物粉碎機(jī)粉碎，過40目篩，裝袋、標(biāo)識，備用。原植物經(jīng)通化師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院植物教研室秦佳梅教授鑒定為暴馬丁香 [Syringa reticulata（BL.）var.mandshurica(Maxim.)Hara]。

1.2 試劑

齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品購自上海金穗生物醫(yī)藥有限公司，純度≥98%；乙醇、甲醇、香蘭素、濃硫酸等化學(xué)試劑均為分析純；純凈水。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用BS210S型電子天平精密稱取0.006g齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品，置于5mL容量瓶中，加甲醇定容，搖勻。分別精密量取 20、40、60、80、10、120μL 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液分別置于6個(gè)不同的試管中，于PC-1000型數(shù)顯式電熱恒溫水浴鍋中加熱，揮干甲醇。取出放冷，分別向6個(gè)試管加入8%香草醛—乙醇溶液0.5mL和72%的濃硫酸5mL，搖勻，放置至管壁無殘留液。將各試管置于60℃恒溫水浴上加熱10min，取出立即冷水浴15min。用721E型分光光度計(jì)于540nm處測吸光值[10]。以齊墩果酸質(zhì)量濃度（X，mg/L）為橫坐標(biāo)、吸光值（Y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見圖1，得回歸方程為：Y=0.027x+0.1179，R2=0.9996＞0.999， 表明齊墩果酸的質(zhì)量濃度在4.4～26.1mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

圖1 齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

1.3.2供試溶液制備

分別精密稱取1.0g試材，按液料比為20∶1加入70%的乙醇，置于超聲波清洗機(jī)中用300w超聲頻率[11]，分別在 30、40、50、60、70℃的溫度條件下， 超聲提取30min，放冷至室溫，加入70%乙醇補(bǔ)足重量，搖勻，過濾。精密量取續(xù)濾液10mL，加水15mL，置水浴上蒸去乙醇和水。殘?jiān)蛹状歼m量使其溶解，轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，并加甲醇稀釋至刻度搖勻，作為供試品溶液。三次重復(fù)。

1.3.3 提取樣品的測定

將1.3.2供試樣品溶液，按標(biāo)準(zhǔn)曲線1.3.1項(xiàng)下方法測吸光值，代入標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算。

1.4 數(shù)據(jù)處理

本實(shí)驗(yàn)得出數(shù)據(jù)均利用DPSV7.05版及Excel進(jìn)行處理分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度對暴馬丁香枝條中齊墩果酸提取的影響

表1 不同溫度對暴馬丁香枝條中齊墩果酸提取結(jié)果

表1結(jié)果表明，在提取溫度為30～50℃時(shí)，提取的齊墩果酸隨溫度的升高而增大，50℃條件下提取的齊墩果酸含量達(dá)2.7533%。但繼續(xù)增加溫度，提取的齊墩果酸含量則降低。在5%水平，50℃和60℃之間差異不顯著，且50℃條件下的與其他溫度條件的差異均達(dá)到顯著水平。在1%水平，50℃條件下的只與30℃之間達(dá)極顯著差異，與其他條件之間的差異不顯著。

2.2 暴馬丁香葉、枝條、樹皮中齊墩果酸的含量測定

依1.3.2方法，選50℃提取測定，結(jié)果見表2。枝條中的齊墩果酸含量最高，為2.9993%。其次為干皮的，達(dá)2.1951%。最后為葉片的，為1.9885%。

表2 白山臨江暴馬丁香葉，枝條，皮中齊墩果酸的含量

3 結(jié)論與討論

3.1 暴馬丁香中齊墩果酸提取條件

目前齊墩果酸的提取方法研究較多的是醇提法和水提法，本實(shí)驗(yàn)通過超聲輔助提取法，方法簡單、時(shí)間短，可用于批量生產(chǎn)。在其他超聲條件不變的情況下，超聲溫度為50℃時(shí)提取效果最佳。

3.2 資源利用

齊墩果酸廣泛存在于多種植物中，如龍芽檧木[11]、木瓜[12]、女貞子[13]、凌霄花[14]等。高曉潔等（2018）[15]對浙產(chǎn)6種威靈仙類藥材中齊墩果酸的含量進(jìn)行測定，結(jié)果為威靈仙、揚(yáng)子鐵線蓮、粗齒鐵線蓮、毛蕊鐵線蓮、柱果鐵線蓮中齊墩果酸含量分別為0.381%，0.172%，0.395%，0.00184%，1.70%。而本實(shí)驗(yàn)中檢測暴馬丁香枝條中含量最多高達(dá)2.9993%。暴馬丁香不同部位齊墩果酸含量為枝條＞干皮＞葉。與王化[16]等（2015）采用RP-HPLC法測定暴馬丁香中齊墩果酸的的含量結(jié)果一致。對暴馬丁香枝條的利用可不剝皮，直接用于提取。