田海軍，鄭曙明

中藥復(fù)方對(duì)鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的防治效果

田海軍1，鄭曙明2

（1. 信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院，河南 信陽(yáng) 464000，2. 西南大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，重慶 402460）

【】研究中藥復(fù)方對(duì)鯽魚(yú)（）細(xì)菌性敗血癥的防治效果。由茵陳、地錦草、大黃、黃芩、白術(shù)、苦參、板藍(lán)根按一定比例組成中草藥復(fù)方，用索氏提取法以乙醇為溶劑提取中草藥復(fù)方的總有效成分，提取物按質(zhì)量分?jǐn)?shù)0%、0.5%、2.0%，中藥復(fù)方原料粗粉按質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%的添加量制成藥餌（分別記為0%、0.5%、2.0%藥餌組，2.0%生藥組），投喂人工感染溫和氣單胞菌（）的鯽魚(yú)，測(cè)定感染4 d和15 d時(shí)鯽魚(yú)的血清轉(zhuǎn)氨酶（GPT、AST）、甘油三酯（TRIG）、膽固醇（TC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比（白蛋白與球蛋白質(zhì)量濃度比，A/G）等肝功能指標(biāo)，尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、肌酐（CR）等腎功能指標(biāo)，心肌功能指標(biāo)肌酸磷酸激酶（CPK）。2.0%藥餌組在0.5×109cfu/mL和1×109cfu/mL的溫和氣單胞菌攻毒感染下，藥餌防治率分別為82.5%和42.5%，與0%藥餌組相比，藥效極顯著（< 0.01）。相對(duì)于對(duì)照組（健康魚(yú)），感染0.5×109cfu/mL 溫和氣單胞菌病魚(yú)（0%藥餌組）轉(zhuǎn)氨酶、TRIG、TC、TP、ALB、GLB、A/G指標(biāo)下降（< 0.05），BUN、UA、CR、CPK指標(biāo)上升（< 0.05），而其他藥餌組各指標(biāo)均較0%藥餌組改善，恢復(fù)至對(duì)照組水平。中藥復(fù)方對(duì)鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥有一定防治作用，可改善病魚(yú)的肝臟、腎、心肌功能的受損狀態(tài)。以添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%中草藥復(fù)方提取物的藥餌防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的藥效顯著。

鯽魚(yú)；細(xì)菌性敗血癥；血液生化指標(biāo)；中藥復(fù)方；藥效學(xué)

細(xì)菌性敗血癥是危害水產(chǎn)養(yǎng)殖的主要疾病之一，為暴發(fā)性流行病，其危害最重，流行區(qū)域廣，流行周期最長(zhǎng)，幾乎可殃及所有的淡水魚(yú)類，患病魚(yú)從出現(xiàn)癥狀到暴發(fā)性死亡僅3 ~ 5 d，死亡率高達(dá)95%以上，每年因魚(yú)類細(xì)菌性敗血癥造成的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)幾億元[1]。目前用于防治魚(yú)類細(xì)菌性敗血癥的藥物主要是抗生素、消毒劑等化學(xué)藥物，然而化學(xué)漁藥的大量使用會(huì)影響水體的生態(tài)平衡，導(dǎo)致耐藥性病原菌產(chǎn)生，因此急需開(kāi)發(fā)純天然、療效好、無(wú)藥物殘留的中草藥制劑，以防控水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性敗血癥。用中藥防治魚(yú)類病害，成本低廉、綠色環(huán)保、無(wú)藥品殘留等，符合無(wú)公害養(yǎng)殖要求[2]。且實(shí)踐證明，作為免疫增強(qiáng)劑，中草藥有利于水產(chǎn)養(yǎng)殖魚(yú)類病害的群體防治。對(duì)于中草藥藥餌防治水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性敗血癥僅見(jiàn)于陳學(xué)年等[3-8]的中草藥生藥粉末藥餌防治鯽魚(yú)敗血病的試驗(yàn)，有關(guān)復(fù)方提取物對(duì)魚(yú)類細(xì)菌性敗血癥的藥效試驗(yàn)還有待進(jìn)一步研究。

本課題組依據(jù)中醫(yī)藥理論及水產(chǎn)動(dòng)物醫(yī)學(xué)理論，通過(guò)瓊脂–孔洞擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)及藥餌防治試驗(yàn)篩選出對(duì)細(xì)菌性敗血癥病原菌抑菌效果較佳，由茵陳、地錦草、大黃、黃芩、白術(shù)、苦參、板藍(lán)根按一定比例組成的中草藥復(fù)方[9]。筆者測(cè)定健康鯽魚(yú)經(jīng)攻毒感染細(xì)菌性敗血癥后的血液生化指標(biāo)，建立鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥血液生化病理模型，通過(guò)藥餌對(duì)病魚(yú)肝、腎、心肌功能以及造血功能的恢復(fù)作用研究該中草藥復(fù)方的藥效，為魚(yú)病防治藥物開(kāi)發(fā)和水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)魚(yú) 信陽(yáng)市水產(chǎn)科學(xué)研究所提供健康鯽（），規(guī)格均勻，體質(zhì)量（40±0.5）g。

1.1.2 試驗(yàn)用菌液 試驗(yàn)致病菌溫和氣單胞菌（）病株XSKS-2由信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供，分離自信陽(yáng)市水產(chǎn)科學(xué)研究所養(yǎng)殖場(chǎng)有典型細(xì)菌性敗血癥癥狀的鯽魚(yú)。通過(guò)病株對(duì)健康鯽魚(yú)的回歸感染試驗(yàn)，確定溫和氣單胞菌的感染劑量。

1.1.3 藥餌 復(fù)方中草藥由下列中藥原料按質(zhì)量分?jǐn)?shù)配制：茵陳18% ~ 22%，地錦草18% ~ 22%，大黃18% ~ 22%，黃芩8% ~ 12%，白術(shù)8% ~ 12%、苦參8% ~ 12%，板藍(lán)根8% ~ 12%。復(fù)方中七味中草藥原藥購(gòu)自信陽(yáng)市仲景大藥房，用超微粉碎機(jī)（15 kW）粉碎成原藥粗粉。用索氏提取器以乙醇為溶劑連續(xù)回流提取復(fù)方中草藥，提取物分別按質(zhì)量分?jǐn)?shù)0%、0.5%、2.0%添加量均勻噴灑在飼料上制成藥餌（即0%、0.5%、2.0%藥餌組），另外用復(fù)方原料粗粉按質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%的添加量制成藥餌（2.0%生藥組）。

1.1.4 養(yǎng)殖池 1.2 m × 0.6 m × 0.8 m玻璃缸，不間斷充氧，水溫(23.0±0.5)℃，每天換水量不超過(guò)1/3。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)預(yù)試驗(yàn)，細(xì)菌攻毒試驗(yàn)選取0.5×109、1.0×109cfu/mL兩個(gè)濃度梯度（預(yù)試驗(yàn)攻毒感染發(fā)病率為55% ~ 85%），藥餌防治試驗(yàn)設(shè)0%、0.5%、2.0%藥餌組及2.0%生藥組，即并設(shè)空白對(duì)照組（健康鯽魚(yú)，未進(jìn)行人工攻毒感染，投喂普通飼料），共9個(gè)試驗(yàn)組（表1），每試驗(yàn)組設(shè)2平行組， 1組用于藥餌防治率試驗(yàn)，另1組用于血液生化指標(biāo)測(cè)定取樣。每組試驗(yàn)魚(yú)40尾，試驗(yàn)前健康鯽魚(yú)先暫養(yǎng)2周，再投喂藥餌1周，然后各試驗(yàn)組腹腔注射相應(yīng)濃度的溫和氣單胞菌菌懸液進(jìn)行攻毒感染試驗(yàn)。

1.2.2 藥餌防治率 發(fā)病后每d記錄各試驗(yàn)組魚(yú)存活數(shù)，連續(xù)記錄1周。存活率及藥餌防治率結(jié)果采用方差分析和檢驗(yàn)。

表1 試驗(yàn)區(qū)組設(shè)計(jì)

1.2.3 血液生化指標(biāo)測(cè)定 人工感染后4 d（細(xì)菌性敗血癥暴發(fā)高峰期）、15 d（細(xì)菌性敗血癥病程穩(wěn)定期）時(shí)取1至4組試驗(yàn)組及對(duì)照組共計(jì)5組，每組取魚(yú)6尾進(jìn)行尾靜脈采血。用URIT-3000PLUS 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、甘油三酯（TG）、膽固醇（TC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比（A/G）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、肌酐（CR）、間接膽紅素（IBIL）、肌酸磷酸激酶（CPK）等血液生化指標(biāo)[9]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同細(xì)菌濃度攻毒感染下各藥餌組試驗(yàn)魚(yú)的存活率

在菌液濃度為0.5×109cfu/mL時(shí)，2.0%藥餌組鯽魚(yú)存活率最高，添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%復(fù)方提取物的藥餌對(duì)鯽魚(yú)存活率為82.5%；其次為2.0%生藥組，鯽魚(yú)存活率為77.5%。在菌液濃度1×109cfu/mL時(shí)，2.0%藥餌組鯽魚(yú)存活率最高，為42.5%；其次為2.0%生藥組，鯽魚(yú)存活率為37.5%（表2）。

經(jīng)過(guò)檢驗(yàn)及方差分析，在0.5×109cfu/mL及1.0×109cfu/mL菌液濃度下，2.0%藥餌組和2.0%生藥組與0%組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（< 0.01），0.5%藥餌組與0%藥餌組、2.0%藥餌組和2.0%生藥組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。總體而言，在兩種濃度菌液感染下，質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的復(fù)方提取物的藥效均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(< 0.01)。

表2 不同藥餌濃度和不同細(xì)菌濃度時(shí)患病魚(yú)的死亡情況

2.2 血液生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

血液生化指標(biāo)中反映肝臟功能狀態(tài)的有轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、膽固醇、血清總蛋白、血清白蛋白、血清球蛋白等，當(dāng)肝臟細(xì)胞受到損傷時(shí)血清轉(zhuǎn)氨酶升高，其他指標(biāo)下降[10-14]。感染4 d時(shí)0%藥餌組（感染細(xì)菌性敗血癥的病魚(yú)）谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性較對(duì)照組（健康鯽魚(yú)）顯著下降（< 0.05），其他藥餌組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05），但高于0%藥餌組（< 0.05）。感染15 d時(shí)各藥餌組測(cè)定值與對(duì)照組相近（> 0.05）（圖1）。

圖2可見(jiàn)，感染4 d時(shí)，各組間谷草轉(zhuǎn)氨酶活性差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05），僅0%藥餌組較對(duì)照組有下降趨勢(shì)；感染15 d時(shí)，各組間谷草轉(zhuǎn)氨酶活性差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05），僅0%藥餌組較對(duì)照組有上升趨勢(shì)。

圖3可見(jiàn)，感染4 d時(shí)，0%、0.5%藥餌組血清膽固醇低于對(duì)照組（< 0.05），2%藥餌組和生藥2%組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）；感染15 d時(shí)，0%藥餌組血清膽固醇比對(duì)照組顯著下降（< 0.05），其他藥餌組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

Fig.3 Serum cholesterol levels in serum 4 and 15 d after injection

圖4可見(jiàn)，感染4 d時(shí)，0%藥餌組甘油三酯比對(duì)照組下降（< 0.05），2%藥餌組和生藥2%組高于0%藥餌組（< 0.05），但與對(duì)照組無(wú)顯著差異 (> 0.05)；感染15 d時(shí)0%藥餌組甘油三酯比對(duì)照組下降（< 0.05），其他藥餌組高于0%藥餌組（< 0.05），與對(duì)照組測(cè)定值接近（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

圖5可見(jiàn)，感染4 d時(shí)，0%藥餌組血清總蛋白比對(duì)照組顯著下降（< 0.05），其他藥餌組高于0%藥餌組（< 0.05），與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）；感染15 d時(shí)，所有實(shí)驗(yàn)組無(wú)顯著差異（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

圖6可見(jiàn)，感染4 d、15 d時(shí)，各試驗(yàn)組的血清白蛋白變化一致，均表現(xiàn)為0%藥餌組比對(duì)照組顯著下降（< 0.05），其他藥餌組高于0%藥餌組（< 0.05），但與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

圖7可見(jiàn)，感染4 d、15 d時(shí)，各試驗(yàn)組的血清球蛋白變化一致，均表現(xiàn)為0%藥餌組比對(duì)照組顯著下降（< 0.05），其他藥餌組高于0%藥餌組（< 0.05），但與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

Fig .7 Serum globulin concentrations in serum 4 and 15 d after injection

圖8可見(jiàn)，感染4 d時(shí)，0%藥餌組血清白球比（白蛋白和球蛋白的質(zhì)量濃度比值）比對(duì)照顯著下降（< 0.05），其他藥餌組高于0%組（< 0.05），但與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）；感染15 d時(shí)，0%藥餌組比對(duì)照組顯著下降（< 0.05），其他藥餌組高于0%藥餌組（< 0.05），但與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

圖9可見(jiàn)，感染4 d、15 d時(shí)，各試驗(yàn)組血清肌酐變化一致，均表現(xiàn)為0%藥餌組血清肌酐高于對(duì)照組及其他藥餌組（< 0.05），但其他各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

圖10可見(jiàn)，感染4 d、15 d時(shí)，0%藥餌組血清尿素氮濃度比對(duì)照組及其他藥餌組顯著上升（< 0.05），其他藥餌組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）

The data with a same letter means no significant difference (> 0.05)

圖10 感染4、15 d時(shí)血清尿素氮濃度

Fig.10 Serum urea nitrogen concentration in serum 4 and 15 d after injection

圖11可見(jiàn)，感染4 d、15 d時(shí)，0%藥餌組血清尿酸比對(duì)照組及其他藥餌組顯著上升（< 0.05），其他藥餌組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

由圖12可見(jiàn)，感染4、15 d時(shí)，0%藥餌組血清間接膽紅素（造血功能指標(biāo)）均比對(duì)照組及其他藥餌組顯著上升（< 0.05），其他藥餌組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

由圖13可見(jiàn)，感染4 d、15 d時(shí)，0%藥餌組肌酸磷酸激酶（心肌功能指標(biāo)）比對(duì)照組及其他藥餌組顯著升高（< 0.05），其他藥餌組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。

凡含相同字母者表示組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）

3 討論

3.1 復(fù)方配伍機(jī)制及藥理作用

復(fù)方中草藥是以茵陳、黃芩為君藥，茵陳黃芩作為基礎(chǔ)方有清熱利濕、利膽、保護(hù)肝功能，解熱，抗炎，改善微循環(huán)，并有抗凝血及抑制多種致病性細(xì)菌的作用。以大黃、地錦草、板藍(lán)根為臣藥，大黃瀉下攻積、清泄?jié)駸?，板藍(lán)根抗菌消炎，地錦草涼血化瘀止血，三味臣藥配伍可利水通淋，促進(jìn)細(xì)菌內(nèi)毒素排出。以苦參、白術(shù)為佐藥，苦參甘平，可健脾益氣，白術(shù)燥濕健脾。兩味佐藥有提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)機(jī)體恢復(fù)的功效。

作用機(jī)理：1）抗炎，復(fù)方總黃酮成分可通過(guò)抑制一氧化氮合酶，減少毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放一氧化氮，調(diào)節(jié)花生四烯酸的代謝，抑制前列腺素E2 (PGE2) 和白三烯(LTC4) 的合成，其中以黃芩素和黃芩甙作用最強(qiáng)[15-16]。2）殺菌解毒，復(fù)方中的黃酮、蒽醌、有機(jī)酸等有效成分有強(qiáng)烈的抑菌作用，對(duì)消除細(xì)菌毒素對(duì)組織的損傷效果較佳[17-18]。黃芩有清熱解毒作用，通過(guò)降低腦脊液cAMP含量而拮抗內(nèi)毒素致熱活性，黃芩的抗自由基作用是通過(guò)提高線粒體、溶酶體等內(nèi)源性超氧化物歧化酶、琥珀酸脫氫酶等酶的活性而加速清除的，地錦草、黃酮也有清除和抑制羥基自由基的作用，黃芩地錦草還有止血、改善血管微循環(huán)，直接破壞內(nèi)毒素的作用[19-20]。

3.2 復(fù)方中草藥對(duì)病魚(yú)肝臟功能的影響

魚(yú)類在感染細(xì)菌后，血液生化指標(biāo)會(huì)發(fā)生相應(yīng)改變，血清轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、膽固醇、總蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比等生化指標(biāo)可反映肝臟的功能狀態(tài)，當(dāng)肝臟受到病原等因素的損傷時(shí)血清轉(zhuǎn)氨酶會(huì)升高，其他指標(biāo)會(huì)下降。本研究中，鯽魚(yú)患細(xì)菌性敗血?。?%藥餌組）4 d時(shí)，轉(zhuǎn)氨酶下降，甘油三酯、膽固醇、血清總蛋白、血清白蛋白、血清球蛋白等其他肝功能指標(biāo)下降，表明溫和氣單胞菌感染亦造成魚(yú)體肝功能改變。齊口裂腹魚(yú)（）感染嗜水氣單胞菌（）后，血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、球蛋白和甘油三酯含量與對(duì)照組均無(wú)差異顯著性，但總蛋白和球蛋白在攻毒后4 h時(shí)最低，之后有逐漸升高趨勢(shì)，而甘油三脂則隨著時(shí)間的延長(zhǎng)有逐漸降低趨勢(shì)[21]，與本研究結(jié)果不盡一致。本研究血清轉(zhuǎn)氨酶下降的原因可能是由病魚(yú)嚴(yán)重的充血、出血、溶血所致；血清中甘油三酯、膽固醇、血清總蛋白、血清白蛋白、血清球蛋白等下降說(shuō)明病魚(yú)肝臟損傷、合成功能下降；血清總蛋白、血清白蛋白、血清球蛋白和魚(yú)類免疫功能有關(guān)，說(shuō)明鯽魚(yú)患細(xì)菌性敗血癥后免疫機(jī)能降低。與0%藥餌組相比，投喂藥餌組轉(zhuǎn)氨酶下降趨勢(shì)減緩，血清甘油三酯、膽固醇、總蛋白、白蛋白、球蛋白等與對(duì)照組的健康鯽魚(yú)測(cè)定值無(wú)顯著差異，說(shuō)明中草藥復(fù)方藥餌改變了病魚(yú)轉(zhuǎn)氨酶的變化，促進(jìn)了轉(zhuǎn)氨酶指標(biāo)的恢復(fù)，說(shuō)明藥餌改善了肝組織的炎癥損傷，使肝功能恢復(fù)到接近健康鯽魚(yú)（對(duì)照組）水平。

魚(yú)類細(xì)菌性敗血癥的病理模型可描述為：溫和氣單胞菌侵入魚(yú)體后，先在腸道內(nèi)增殖，再經(jīng)門動(dòng)脈循環(huán)進(jìn)入肝臟、腎臟及其他組織，引起肝臟、腎臟等器官以及血液病變，繼而出現(xiàn)全身癥狀[23]。本研究的復(fù)方中草藥有保護(hù)魚(yú)類肝功能，抗炎，改善微循環(huán)，并有抗凝血及抑制多種致病菌的作用，促進(jìn)了患細(xì)菌性敗血癥鯽魚(yú)肝功能的恢復(fù)。

3.3 復(fù)方中草藥對(duì)病魚(yú)腎臟功能的影響

尿素氮、尿酸、肌酐是蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物，血液中尿素氮、尿酸和肌酐的濃度間接地反映腎臟的排泄功能，腎功能下降時(shí)，血清尿素氮、尿酸、肌酐指標(biāo)會(huì)升高[24]。米瑞芙[25]研究表明，鰱（）患敗血病后尿素、尿酸、肌酐顯著增加。龐啟華等[22]研究表明，人工感染豚鼠氣單胞菌 () CSS42菌株的豐產(chǎn)鯽尿酸濃度顯著升高，表明病魚(yú)腎功能出現(xiàn)障礙。本研究中感染4、15 d的病魚(yú)（0%藥餌組）血清尿素氮、尿酸、肌酐比對(duì)照組（健康魚(yú)）及其他藥餌組顯著上升，說(shuō)明病魚(yú)腎功能受損；其他藥餌組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明藥餌改善了病魚(yú)腎臟的受損狀態(tài)，使藥餌組病魚(yú)的腎功能恢復(fù)至正常水平。

3.4 復(fù)方中草藥對(duì)病魚(yú)造血功能的影響

間接膽紅素（IBIL）主要由紅細(xì)胞破壞而來(lái)，當(dāng)體內(nèi)紅細(xì)胞被大量破壞，產(chǎn)生大量的間接膽紅素，則超過(guò)肝臟代償能力，血中間接膽紅素含量升高，是造血功能和肝膽疾病的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)[11]。鰱（）患敗血病后血清膽紅素顯著增加[25]。本研究中，與對(duì)照組（健康魚(yú)）相比，感染后的病魚(yú)（0%藥餌組）間接膽紅素顯著升高，這與病魚(yú)造血組織和肝臟的病變有關(guān)，當(dāng)溫和氣單胞菌侵襲造血組織（器官），引起溶血，體內(nèi)紅細(xì)胞大量破壞，產(chǎn)生大量的間接膽紅素，超過(guò)肝臟代償能力。各藥餌組病魚(yú)間接膽紅素與0%藥餌組相比較則下降，且與對(duì)照組健康魚(yú)無(wú)顯著性差異，這是因?yàn)?，?fù)方中的黃芩、地錦草成分有止血、改善血管微循環(huán)，減輕了細(xì)菌對(duì)造血組織（器官）的損傷。

3.5 復(fù)方中草藥對(duì)病魚(yú)心肌功能的影響

魚(yú)類多種細(xì)胞均含有肌酸磷酸激酶，但僅心肌和骨骼肌的肌酸磷酸激酶含量能改變血清中肌酸磷酸激酶的含量。當(dāng)心肌細(xì)胞受損或通透性增高時(shí)，則將該酶釋放到血液中，骨骼肌嚴(yán)重出血，肌纖維的變性、壞死及明顯的病理改變也是血清肌酸磷酸激酶升高的原因?；加屑?xì)菌性敗血癥的病魚(yú)未見(jiàn)骨骼肌出血現(xiàn)象，因此，罹患該病病魚(yú)肌酸磷酸激酶升高則由心肌功能受損所致。本研究中，感染溫和氣單胞菌的病魚(yú)肌酸磷酸激酶指標(biāo)顯著上升，因此，病魚(yú)心肌功能受損，投喂藥餌的病魚(yú)與0%藥餌組比較，肌酸磷酸激酶指標(biāo)下降，且與對(duì)照組健康魚(yú)血清肌酸磷酸激酶測(cè)定值無(wú)顯著性差異，表明藥餌改善了心肌的受損狀態(tài)。

由溫和氣單胞菌、嗜水氣單胞菌等細(xì)菌性感染的病魚(yú)，其血液生理生化指標(biāo)數(shù)均有顯著改變，但具體指標(biāo)究竟是增加還是減少，文獻(xiàn)報(bào)道不一致。鰱魚(yú)患敗血病后肌酸磷酸激酶顯著增加[25]，感染豚鼠氣單胞菌的豐產(chǎn)鯽肌酸激酶活性極顯著降低(< 0.01)，病魚(yú)心肌功能出現(xiàn)障礙[22]。史成銀等[26]認(rèn)為，這可能與疾病的病程有關(guān)，并在Klontz等[27]研究中也有類似報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，健康鯽魚(yú)感染細(xì)菌性敗血癥后，病魚(yú)血液生化指標(biāo)的變化與鰱魚(yú)患敗血病后血液生化指標(biāo)變化[25 ]類似。但究竟是不是患細(xì)菌性敗血癥病魚(yú)血液生化指標(biāo)變化的普遍現(xiàn)象，還有待更進(jìn)一步研究。目前缺乏健康鯽及患病魚(yú)血液生理生化指標(biāo)長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)支撐，更需建立魚(yú)類細(xì)菌性敗血癥病理生理模型[28-32]，這是一項(xiàng)長(zhǎng)期的任務(wù)。

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Prevention and Treatment Effect of Chinese Herbal Compound on Crucian Carp Bacterial Septicaemia

TIAN Hai-jun1, ZHENG Shu-ming2

(1.,464000,; 2.,,402460,)

To study the prevention and treatment effect of the Chinese herbal compound on bacterial septicemia of crucian carp,.Chinese herbal medicine mix from herba artemisiae, euphorbia humifusa atractylodes, radix et rhizoma rhei, radix scutellaria, ginseng, radix isatidis were prepared, and the total effective components of Chinese herbal medicine compound was prepared by soxhlet extraction method using ethanol as solvent. The extract was prepared by mass fraction 0%, 0.5% and 2.0%, and the raw material of the compound was prepared by mass fraction 2.0% (recorded as 0%, 0.5%, 2.0% of the bait group and 2.0% of the crude drug group, respectively). Crucian carp were artificially infected with, and infection was evaluated at day 4 and day 15. Serum biochemical parameter including transaminase (GPT, AST), triglyceride (TRIG), cholesterol (TC), total protein (TP), albumin (ALB), globulin(GLB), albumin to globulin ratio (A/G) liver function indicators, such as urea nitrogen (BUN), uric acid (UA), creatinine (CR), such as renal function indexes, myocardial function index of creatine phosphokinase (CPK) were analyzed.Under the conditions of 0.5×109cfu/mL and 1×109cfu/mLinfection, the control rates of baits in the 2% baits group were 82.5% and 42.5%, respectively. As compared with the 0% baits group, the efficacy was extremely significant (<0.01). Compared with the control group (healthy fish), the indexes of transaminase, TRIG, TC, TP, ALB, GLB, and A/G of the fish infected with 0.5×109cfu/mLdisease (0% diet group) were decreased (0.05), and the indexes of BUN, UA, CR, and CPK were increased (0.05), while the indexes of the other bait group were improved compared with the 0% bait group and recovered to the level of the control group.The compound could prevent and cure bacterial septicaemia of crucian carp, and improve the function of liver, kidney and myocardium. Compound extract of Chinese herbal medicine (2%) added with baits has significant efficacy in preventing and treating bacterial septicemia of crucian carp.

; bacterial septicaemia; blood biochemical indicators;Compound Chinese herbal medicine; therapeutic effect

S943.117.42+9

A

1673-9159（2020）02-0103-08

10.3969/j.issn.1673-9159.2020.02.015

2019-08-09

河南省科技廳科技攻關(guān)項(xiàng)目（122102110146）“新型環(huán)境友好型漁藥的研制與安全性評(píng)價(jià)研究”

田海軍（1980－）男，碩士，副教授，研究方向?yàn)樗鷦?dòng)物病理與病害。Email: thj_666@163.com

鄭曙明（1958—）女，教授。Email:zhsm22@126.com

田海軍，鄭曙明. 中藥復(fù)方對(duì)鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的防治效果[J]. 廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，40（2）：103-110.

（責(zé)任編輯：劉慶穎）