楊永強(qiáng)，陳志軍

冠心病是由冠狀動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化引起的心臟病，導(dǎo)致血管狹窄或阻塞、心肌缺血、缺氧或壞死[1]。世界衛(wèi)生組織將冠心病分為5類：無(wú)癥狀心肌缺血、心肌梗塞、心絞痛、缺血性心力衰竭和猝死[2]。冠心病的病因常與高血壓、總膽固醇(TC)或低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、肥胖、吸煙、酗酒、超重、糖尿病、缺乏體育活動(dòng)、飲食不良和心理社會(huì)因素有關(guān)[3-4]。膽紅素是一種抗氧化劑，可以破壞脂質(zhì)，進(jìn)一步降低內(nèi)源性抗氧化酶的活性，保護(hù)心血管細(xì)胞，研究表明，低水平的膽紅素和高水平的尿酸(UA)也會(huì)引起牙冠。心臟病的危險(xiǎn)因素。纖維蛋白可以增加內(nèi)皮素的分泌，抑制一氧化氮的合成，引起冠狀動(dòng)脈痙攣，加速動(dòng)脈粥樣硬化的形成。

核苷酸結(jié)合寡聚結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白1(NLRP1)炎性小體由NLRP1、半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白水解酶-1(caspase-1)和凋亡相關(guān)斑樣蛋白組成?；罨腸aspase-1可誘導(dǎo)白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-18成熟，并參與多種炎癥疾病的病理過(guò)程。本研究旨在探討冠心病患者血清固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1(SREBP-1)、NLRP1、血清人纖維蛋白原(FIB)水平變化意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年6月至2018年12月于珠海醫(yī)院就診的112例冠心病患者為觀察組，男60例，女52例，年齡(55.7±8.4)歲，范圍45～65歲；同時(shí)選取醫(yī)院112例健康體檢者為對(duì)照組，男58例，女54例，年齡(54.9±8.1)歲，范圍45～65歲，2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)典型心絞痛或心肌梗死；(2)心電圖顯示靜息時(shí)心肌缺血，或心電圖負(fù)荷試驗(yàn)陽(yáng)性；(3)45歲以上的患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合上述冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)患者及其家人簽署了知情同意書，并愿意與研究合作。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)痛風(fēng)、糖尿病、血液系統(tǒng)疾病患者；(2)肝功能不全患者；(3)惡性腫瘤患者；(4)腎功能不全患者。

1.2 方法 (1)血脂、膽紅素、血尿酸測(cè)定方法：抽取早晨空腹肘靜脈血3 ml，3 000 r/min(離心半徑r=10 cm)速度離心10 min，取血清于-20 ℃放置保存待用。用日立7180自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、直接膽紅素(DBIL)、間接膽紅素(IBIL)、總膽紅素(TBIL)和UA。(2)FIB、內(nèi)皮素-1(ET-1)、血栓素2(TXB2)測(cè)定方法：抽取早晨空腹肘靜脈血3 ml，3 000 r/min(離心半徑r=10 cm)速度離心10 min左右，取血清于-20 ℃放置保存待用。用日立7180全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定FIB、ET-1、TXB2。(3)IL-1β、IL-18表達(dá)和高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測(cè)方法：早晨使用 25 IU/ml 肝素抗凝管，空腹肘靜脈血10 ml，分離血漿于-20 ℃放置保存待用，采用密度梯度法分離PBMCs，將其分為2個(gè)無(wú)菌干離心管進(jìn)行RNA和蛋白質(zhì)的提取。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血漿IL-1β、IL-18和hs-CRP。(4)SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白檢測(cè)方法：早晨使用25 IU/ml肝素抗凝管，空腹肘靜脈血10 ml，分離血漿于-20 ℃放置保存待用，采用密度梯度法分離PBMCs，將其分為2個(gè)無(wú)菌干離心管進(jìn)行RNA和蛋白質(zhì)的提取。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白免疫印跡分析檢測(cè)SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白。

1.3 觀察指標(biāo) (1)觀察2組患者的血清TC、LDL-C、TG、UA水平。(2)觀察2組患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平。(3)觀察2組患者的FIB、ET-1、TXB2水平。(4)觀察2組患者的血漿IL-1β、IL-18表達(dá)和hs-CRP水平。(5)觀察SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA和蛋白表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)冠心病患者的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清TC、TG、LDL-C、UA水平 觀察組患者的TC、TG、LDL-C、UA水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 觀察組和對(duì)照組患者的TC、TG、LDL-C、UA水平比較(x±s)

注：與對(duì)照組比較aP<0.05。TC為總膽固醇，TG為三酰甘油，LDL-C為低密度脂蛋白膽固醇，UA為尿酸

2.2 HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平 觀察組患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平均低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 觀察組和對(duì)照組患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平比較(x±s)

注：與對(duì)照組比較aP<0.05。HDL-C高密度脂蛋白膽固醇，DBIL為直接膽紅素，IBIL為間接膽紅素，TBIL為總膽固醇

2.3 FIB、ET-1、TXB2水平 觀察組患者的血清FIB、ET-1、TXB2水平均高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 觀察組和對(duì)照組患者的FIB、ET-1、TXB2水平比較(x±s)

注：與對(duì)照組比較aP<0.05。FIB為纖維蛋白原，ET-1為內(nèi)皮素-1，TXB2為血栓素2

2.4 IL-1β、IL-18表達(dá)和hs-CRP水平 觀察組患者的血漿 IL-1β、IL-18 表達(dá)和 hs-CRP 水平高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 觀察組和對(duì)照組患者的血漿IL-1β、IL-18表達(dá)和hs-CRP水平比較(x±s)

注：與對(duì)照組比較aP<0.05。IL為白細(xì)胞介素，hs-CRP為高敏C反應(yīng)蛋白

2.5 SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA和蛋白表達(dá)水平觀察組患者的SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表5。

表5 觀察組和對(duì)照組患者的SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白表達(dá)水平比較

注：與對(duì)照組比較aP<0.05；NLRP1為核苷酸結(jié)合寡聚結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白1，SREBP-1為固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1，caspase-1為半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1

3 討論

冠心病的主要原因是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化。冠狀動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化與脂質(zhì)代謝紊亂、炎癥激活和內(nèi)皮功能障礙有關(guān)。其發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜。在正常人體內(nèi)，膽紅素可以促進(jìn)膽固醇的代謝，保護(hù)低密度脂蛋白免受氧化，是體內(nèi)不可缺少的物質(zhì)。如果身體的膽紅素水平低，容易發(fā)生冠心病，因?yàn)槟懠t素水平的降低會(huì)減少膽固醇的分解，增加血脂，從而增加冠心病的風(fēng)險(xiǎn)。因此，膽紅素水平的降低可能導(dǎo)致冠心病。最近的研究表明，隨著脂質(zhì)代謝和糖代謝紊亂，UA水平的升高會(huì)對(duì)細(xì)胞造成巨大的損害，損害冠狀動(dòng)脈壁，并導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化的形成。而本次研究也表明觀察組患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平均低于對(duì)照組(P<0.05)，這說(shuō)明血脂水平發(fā)生異常與冠心病的發(fā)生具有一定關(guān)系。

部分患者長(zhǎng)期存在高血糖，導(dǎo)致心肌血管內(nèi)皮缺氧和內(nèi)皮損傷。血管內(nèi)皮損傷后，多種細(xì)胞因子被釋放，如內(nèi)皮素ET-1、TXB2具有血管收縮作用，TXB2也具有較強(qiáng)的血小板聚集作用，同時(shí)伴有高脂血癥，加速動(dòng)脈硬化的發(fā)生。纖維蛋白原是由肝臟合成的凝塊蛋白具有促進(jìn)血小板聚集，增加血液粘度和外周阻力的作用。趨化單核/巨噬細(xì)胞在內(nèi)膜下遷移，以促進(jìn)紅細(xì)胞粘附和血栓形成，且纖維蛋白水平越高，風(fēng)險(xiǎn)越大。本次研究結(jié)果表明，觀察組患者的血清FIB、ET-1、TXB2水平均高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明冠心病的發(fā)生與高FIB有關(guān)。

在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化早期，單核細(xì)胞受血管內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)，分化為巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞可以吞下氧化后的低密度脂蛋白膽固醇，形成泡沫細(xì)胞，進(jìn)而促進(jìn)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。本次研究結(jié)果表明，觀察組患者的血漿IL-1β、IL-18表達(dá)和hs-CRP水平高于對(duì)照組(P<0.05)進(jìn)一步證實(shí)了IL-1β和IL-18參與冠心病的發(fā)展過(guò)程。

在本研究中，冠心病患者的NLRP1炎性體表達(dá)增加并且與體內(nèi)IL-1β和IL-18水平一致，說(shuō)明NLRP1炎性參與了冠心病患者體內(nèi)炎癥水平的變化。SREBP-1主要調(diào)控脂肪酸和糖代謝，并且參與調(diào)節(jié)腫瘤、脂肪變性和巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)。研究結(jié)果表明，觀察組患者的SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明冠心病患者SREBP-1與NLRP1炎性體表達(dá)升高。

綜上所述，冠心病的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，脂質(zhì)代謝和炎癥是其發(fā)展的重要原因。研究結(jié)果也表明，F(xiàn)IB、SREBP-1與NLRP1炎性體表達(dá)升高與冠心病的發(fā)病有關(guān)。為以SREBP-1和NLRP1炎性體為靶點(diǎn)防治冠心病等炎癥性疾病提供新的臨床方向。