劉莉王鳳云韓亮
(廣東藥科大學(xué)1.中藥學(xué)院; 2.健康學(xué)院,廣東 廣州510006)
對貓爪草化學(xué)成分的研究在不斷深入,目前其有效成分主要確定為有機(jī)酸類、糖類、黃酮類、皂苷類、揮發(fā)油類、石油醚類等。 不同化學(xué)成分使用的提取方法不同,主要為不同溶劑萃取后用大孔樹脂進(jìn)行細(xì)分。近年來已明確貓爪草抗癌提取物中的化學(xué)成分主要為有機(jī)酸類,并發(fā)現(xiàn)了其他新的化學(xué)成分,報道如下。
有機(jī)酸類在貓爪草中占重要地位,該提取部位具有良好抗腫瘤作用,其中十六碳酸是抗腫瘤的主要活性成分,王愛武等[2]運(yùn)用二氧化碳超臨界流體萃取法萃取貓爪草中脂肪酸成分,并用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gas chromatography - mass spectrometry)技術(shù)檢測鑒定出12 種成分,確定十六碳酸是貓爪草抗腫瘤的有效部位,為脂肪酸的主要成分,質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到56.98%。 此外,在貓爪草中還發(fā)現(xiàn)多種有機(jī)酸,總峰面積可達(dá)86.46%,具體分析測得有機(jī)酸成分分布有明顯差異,水提液中多元酸居多,醇提液中以一元酸為主,首次檢出含有辛二酸、壬二酸等多種多元酸[3]。 姚成、陳軍等[4]對5 個不同產(chǎn)地的貓爪草進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)其中天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和精氨酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高。 不同產(chǎn)地貓爪草中氨基酸的種類相同,質(zhì)量分?jǐn)?shù)不同。 楊旭等[5]發(fā)現(xiàn)以河南產(chǎn)貓爪草中游離酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,可達(dá)6.18%。 此外,近年來從貓爪草有機(jī)酸中不斷發(fā)現(xiàn)新的化合物,熊英、萇美燕等[6]用多種色譜分離得到十二 烷 二 酸 單 甲 酯 ( 3-hydroxy-11-methoxy-11-oxoundecanoic acid)、十六烷酸、棕櫚酸乙酯、己二酸和硬脂酸,其中十二烷二酸單甲酯為新的化合物。
貓爪草中含有大量的糖,據(jù)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物所測定糖成分高達(dá)16%。 日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)貓爪草含有多種單糖,是提高免疫力與抗腫瘤活性的重要成分之一。研究表明貓爪草中總糖占30%,其中游離葡萄糖最多,采用苯酚-硫酸比色法測得多糖量可達(dá)6.7%[7]。 大多數(shù)研究者提取多糖使用水提醇沉法,后來不斷用超聲、微波法進(jìn)行工藝優(yōu)化。 廖啟元等[8]采用超濾法優(yōu)化多糖脫蛋白工藝,多糖保留率和蛋白脫除率分別為78.2%和77.1%,優(yōu)于Sevag 法和三氯乙酸(TCA)法。HUANG Xuefeng 等[9]采用熱水提取多糖,乙醇沉淀、凝膠過濾柱層析法分離,得到多糖HB-1,可能對乳腺癌有作用;糖的成分測定結(jié)果表明,GLC4(B)占比例最大,達(dá)到62%。 不同產(chǎn)地貓爪草中多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)差異明顯,其中以河南信陽淮濱產(chǎn)貓爪草中多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,達(dá)到32.16%[10]。 隨著技術(shù)不斷進(jìn)步,逐漸可以細(xì)分出糖類中不同種化合物。 從貓爪草乙酸乙酯部位分離得到β-D-葡萄糖,從貓爪草水提取液中分離純化得到一種多糖蛋白復(fù)合物多糖(RTG-Ⅲ),其中單糖組成為鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖,總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80.1%[11]。
黃酮類、苷類化合物是貓爪草中重要的化學(xué)活性物質(zhì),其中主要有效成分為異黃酮、皂苷,分別具有抗結(jié)核、提高免疫力作用。 對黃酮類的研究向來較少,對皂苷在肝癌、乳腺癌與胃癌等疾病治療的研究較多。有學(xué)者采用差示分光光度法、以蘆丁作為指標(biāo),測定貓爪草中總黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。 熊英等[12]在貓爪草醋酸乙酯及正丁醇萃取部位中,發(fā)現(xiàn)雙黃酮類化合物,包括粗貝殼杉黃酮-4′-甲醚、榧雙黃酮、羅漢松雙黃酮、白果素、異銀杏素、穗花杉雙黃酮,及3種苷類化合物包括異麥芽酚-α-D-葡萄糖苷、香草酸4-O-β-D-葡萄糖苷、水楊苷。 貓爪草皂苷多存在于貓爪草乙醇提取物中,ZHAO Yun 等[13]從中發(fā)現(xiàn)7 種化合物,其中有熊果酸、齊墩果酸、白樺酸乙酸、3-碘可可醇、乙酸丁馬二醇這5 種常見三萜,隨后又發(fā)現(xiàn)1 種新的三萜類化合物3β-acetoxy-(20S,22E)-dammaran-22-en-25-ol,及胡蘿卜苷。
貓爪草中揮發(fā)油具有抗癌、抗耐藥結(jié)核桿菌活性與提高免疫活性作用[14]。 但揮發(fā)油在藥理作用與臨床方面的相關(guān)研究較少,大多數(shù)是提取工藝優(yōu)化方面的研究。 張海松等[15]用常規(guī)水蒸氣蒸餾法和超聲萃取水蒸氣蒸餾法對貓爪草中揮發(fā)油成分進(jìn)行系統(tǒng)分析,2 種方法鑒定出其共有成分37 種,主要為酯類化合物、酸類化合物、烷烴類化合物、芳香族化合物與醛類化合物。 廖啟元等[16]采用微波輔助加熱代替?zhèn)鹘y(tǒng)加熱方法,找出最佳提取工藝,平均得率為0.94%。
貓爪草提取分離還可得到石油醚、醇、酯類化合物,廣西中醫(yī)藥研究所從貓爪草脂溶物中分離出肉豆蔻、十八烷基酸酯、二十烷酸和豆甾醇。 從70%乙醇提取物中分離得到γ-α-羥甲基-δ-雙戊烯內(nèi)酯,被命名為貓爪草甲素。 經(jīng)柱色譜分離,用理化常數(shù)和光譜分析鑒定化合物結(jié)構(gòu),可從貓爪草95%乙醇提取物中分離得到多種化學(xué)成分[17]。 田景奎等[18-19]從三氯甲烷和乙酸乙酯部分得到眾多酯類化合物,有棕櫚酸乙酯、β-谷甾醇、豆甾醇、油甾醇,隨后又發(fā)現(xiàn)鄰苯二甲酸正丁酯、β-單棕櫚酸甘油酯、β-單硬脂酸甘油酯、2-氨基-3-(3,4-二羥基-苯基)-丙酸甲酯、2-氨基-3-(3,4-二羥基-苯基)-丙酸乙酯、羥基苯甲酸甲酯。
研究還發(fā)現(xiàn)貓爪草中含有生物堿、微量元素與酚類化合物,貓爪草水萃取部位經(jīng)柱色譜分離得到2 個新的生物堿苷,分別為貓爪草苷C、D。 戚中杰等[20]發(fā)現(xiàn)貓爪草中含有1 種生物堿—吡咯丁酸,且在浙江產(chǎn)貓爪草中質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高。
目前,貓爪草中多酚類有效成分的提取工藝優(yōu)化鮮有報道,王銳等[21]確定了最佳提取工藝為乙醇體積分?jǐn)?shù)75%、料液比1 ∶50 (g/mL)、浸提時間1.5 h、浸提溫度70 ℃,在此條件下,貓爪草中多酚的浸出量可達(dá)251.4 μg/g。
由于電網(wǎng)電壓波動通常都是短時出現(xiàn),以往電控維護(hù)人員在電壓穩(wěn)定之后通過手動對變頻器進(jìn)行復(fù)位,即可解決此類為題,但是由于部分工業(yè)及供暖行業(yè)換熱站數(shù)量多且分散。對變頻器進(jìn)行逐個復(fù)位消耗時間過長。變頻器過電壓、欠電壓只能手動復(fù)位的局限性仍大大降低了工作效率,影響居民供暖。
此外,貓爪草中還含有多種微量元素。 陳軍等[22]運(yùn)用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜(ICP-AES)法測定,貓爪草含K、Fe、Cr、Mg、Mn、 Zn、Co、Cu、 Ni、 Se、Sr 等多種常量及微量元素,其塊根中Zn/Cu 值為3 左右,與抗癌中藥中微量元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)Zn 高Cu 低的現(xiàn)象一致。最近,F(xiàn)ENG Ziming[23]發(fā)現(xiàn)貓爪草中有5 個新雜環(huán)化合物,ZHAN Zhilai[24]還在其化合物中發(fā)現(xiàn)了Ternatusine A,一種新型生物堿。 鄧可眾等[25]從貓爪草中分離得到1 個新化合物,其結(jié)構(gòu)為(R) -3-[2-( 3,4-二羥基苯甲?;?-4,5-二羥基苯基]-2-羥基丙酸,命名為貓爪草酸。
貓爪草主要藥理作用是抗腫瘤,并受到廣泛關(guān)注,但是其臨床應(yīng)用與研究較少。 抗結(jié)核應(yīng)用比抗腫瘤更廣,多是膠囊,在初期可輔助治療。 此外,增強(qiáng)免疫活性也是其重要作用,存在于大量多糖與皂苷中,對抗腫瘤也起到促進(jìn)作用。
貓爪草可清肝瀉火、散結(jié)消癭,提取物中有多種化學(xué)活性物質(zhì)。 早期有學(xué)者推斷出貓爪草有治療腫瘤的效果,認(rèn)為其抗癌成分主要是脂肪酸,此外還有研究發(fā)現(xiàn)其皂苷成分、醇提物也可以抑制腫瘤[26]。 崔秀君等[27]用4 個劑量的提取物,分別測試對3 種瘤株的抑制率,發(fā)現(xiàn)除水提物與石油醚提取物抑制率不到50%外,石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物均達(dá)到50%以上,乙酸乙酯提取物與正丁醇提取物抑制腫瘤效果明顯,尤其以乙酸乙酯部位的十六碳酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,十六碳酸是抗腫瘤主要成分,且在質(zhì)量濃度0.25~1 mg/mL 范圍內(nèi)效果最佳。 貓爪草總皂苷在體外也可明顯抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞,抑制人乳腺癌細(xì)胞的生長。 童曄玲[28]研究證實(shí)貓爪草總皂苷高劑量組瘤重與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),不同劑量貓爪草總皂苷的抑瘤率可達(dá)13.8%~32.6%,其作用是促進(jìn)機(jī)體非特異性免疫功能,間接地抑制腫瘤生長、促進(jìn)正常細(xì)胞生長、減慢腫瘤的生長速度。 王愛武[29]發(fā)現(xiàn)貓爪草提取物不僅對癌株有抑制作用,還對腫瘤壞死因子具有較強(qiáng)的誘生作用,其中又以其70%乙醇浸膏誘生作用最強(qiáng)。
貓爪草中有多種化合物可抑制結(jié)核桿菌,提高結(jié)核病的治療效果。 近年ZHANG Lin 等[30]研究證實(shí),貓爪草乙醇提取物對結(jié)核桿菌有明顯的抑制作用,相對于異煙肼、利福平毒性小,并且在一定劑量下無急性毒性。 其中經(jīng)大孔樹脂洗脫的70%醇提物抑制結(jié)核桿菌的抑菌濃度最低,可達(dá)6.25 mg/mL,其次是貓爪草膠囊,為12.5 mg/mL。 有研究發(fā)現(xiàn)貓爪草中抗結(jié)核桿菌的單一成分是小毛根內(nèi)酯,復(fù)合成分多為多糖和皂苷,還有貓爪草提取物。 此外,熊友誼等[31]研究出貓爪草石油醚提取物對多種耐藥菌株具有細(xì)胞內(nèi)、外的抑制活性。 王萬朋等[32]證實(shí)貓爪草中單體成分2-醛基吡咯丁酸及其同系物2-羧基吡咯丁酸抑菌活性良好,其中吡咯丁酸能夠抑制多種菌株。 對于結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株,貓爪草膠囊在聯(lián)合常規(guī)抗結(jié)核藥物治療短期肺結(jié)核案例中,治愈率明顯升高。
多糖是貓爪草調(diào)節(jié)免疫功能的主要活性成分之一。 王會敏等[33-34]發(fā)現(xiàn)貓爪草多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用,能夠增強(qiáng)ANA-1 細(xì)胞增殖能力,可明顯提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率和吞噬指數(shù),促進(jìn)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、腹腔巨噬細(xì)胞增殖作用,200 mg/L 時對巨噬細(xì)胞增殖作用最強(qiáng)。 除多糖外,皂苷、醇類提取物也發(fā)揮著增強(qiáng)免疫力的作用。 張振凌等[35]研究表明,貓爪草多糖及其皂苷對巨噬細(xì)胞吞噬功能、溶血素和淋巴細(xì)胞都有一定的影響,對小鼠有免疫興奮作用,貓爪草醇類提取物也在小鼠巨噬細(xì)胞在抗病毒天然免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用。 劉芊伊等[36]發(fā)現(xiàn)貓爪草中醇類提取物可影響小白鼠巨噬細(xì)胞極化,使其免疫力活性加強(qiáng)。
貓爪草還具有抑菌、保肝、抗氧化的作用,其中石油醚、內(nèi)酯化合物、醇類化合物發(fā)揮了重要的作用。 有研究發(fā)現(xiàn)貓爪草石油醚提取物能夠顯著抑制多藥耐藥結(jié)核菌株的生長,從而達(dá)到抑菌效果。 不同貓爪草對標(biāo)準(zhǔn)菌株和耐藥菌株均有抑菌作用,尤其在石油醚萃取部位抑菌濃度最低為2 mg/mL。 何瀟[37]對貓爪草多糖的抗肝損傷活性研究發(fā)現(xiàn),貓爪草多糖能明顯減輕和修復(fù)肝炎癥損傷、降低肝中炎性因子的分泌、降低肝氧化損傷。 體外實(shí)驗也證實(shí)貓爪草多糖對人肝細(xì)胞損傷有明顯保護(hù)作用,同時還能促進(jìn)肝細(xì)胞的增殖。 韓紅霞等[38]采用貓爪草多糖對D-gal 衰老模型小鼠抗氧化作用的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),多糖可延緩小鼠組織及細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能衰退,增強(qiáng)衰老小鼠免疫功能,較好地維護(hù)模型小鼠體內(nèi)氧化、抗氧化平衡狀態(tài)。
貓爪草不僅能有效消除甲亢癥狀,且在調(diào)節(jié)人體細(xì)胞免疫方面顯示出獨(dú)特優(yōu)勢,減輕了西醫(yī)治療甲亢藥物所導(dǎo)致的白細(xì)胞減少、肝功能損害、皮疹等不良應(yīng)的發(fā)生,降低復(fù)發(fā)率,提高了療效。 近年來研究證實(shí)炎癥是影響腫瘤細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的第七大因素,貓爪草具
有顯著的抗急性炎癥作用,能為抗腫瘤提供輔助治療。楊嘉等[39]發(fā)現(xiàn)復(fù)方貓爪草水提物的抗感染作用明顯,抑制了小鼠耳腫脹、使腹腔毛細(xì)血管通透性增加,同樣也能緩解足趾腫脹。 王玲、王開金等[40]發(fā)現(xiàn),貓爪草膠囊對咽痛、咽癢、干咳、黏膜水腫等治療效果良好,總有效率可達(dá)79.25%。
當(dāng)前,貓爪草臨床應(yīng)用主要在治療腫瘤、肺結(jié)核方面,隨著技術(shù)不斷發(fā)展,臨床實(shí)踐證明它在淋巴結(jié)結(jié)核、結(jié)節(jié)性紅斑、腸系膜淋巴結(jié)炎、甲亢等方面亦有重要的應(yīng)用價值。
貓爪草膠囊及貓爪草單、復(fù)方煎劑等,對肺癌、惡性淋巴瘤、乳腺腫瘤、甲狀腺瘤及婦科子宮肌瘤等均具有較好的治療作用。 治療腫瘤尤以復(fù)方制劑為主,李穗暉[41]在仙魚湯(由仙鶴草、魚腥草、貓爪草等藥物組成)治療支氣管肺癌40 例的療效研究中發(fā)現(xiàn),仙魚湯能緩解氣短、咳嗽、血痰、乏力癥狀,治療后瘤體穩(wěn)定率治療組為82.5%,有良好的抗肺癌效果。 還有研究用貓爪草配伍三棱、鰲甲、當(dāng)歸等藥物治療巨大隆突型皮膚纖維肉瘤多例,結(jié)果顯示也有明顯療效,術(shù)后隨訪未見復(fù)發(fā)。 且貓爪草配伍白頭翁治療癭瘤;貓爪草配半枝蓮、白英治胃癌、食道癌;配葶藶子還用來治療宮頸癌[42]。 但該劑型不便應(yīng)用與推廣,應(yīng)開發(fā)在保證療效前提下,能更方便、快捷使用的新型藥物。
許多研究案例采用貓爪草膠囊間接輔助肺結(jié)核的治療,結(jié)果顯示效果良好,是治療結(jié)核的優(yōu)化選擇[43]。此外貓爪草湯劑、水煎劑對肺結(jié)核療效顯著,應(yīng)用較多。 梁紅文[44]研究了含貓爪草膠囊化療方案對耐藥肺結(jié)核的療效,將112 例耐藥肺結(jié)核患者應(yīng)用貓爪草膠囊聯(lián)合治療1 年后,痰菌陰轉(zhuǎn)率達(dá)73.2%,病灶吸收率71.4%,均較治療前顯著提高,不良反應(yīng)發(fā)生率顯著降低。 有學(xué)者發(fā)現(xiàn)貓爪草復(fù)方也許可以達(dá)到抗結(jié)核作用,藍(lán)劍[45]研究采用貓爪草水煎劑聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)抗結(jié)核方案治療頸淋巴結(jié)結(jié)核的臨床療效,選取在深圳市福田區(qū)慢性病防治院就診的患者504 例,觀察到組治愈率達(dá)93.2%,療效顯著。 陳啟顯[46]觀察貓爪草瘦肉湯與西藥聯(lián)合治療2 型糖尿病合并肺結(jié)核的臨床療效,將60 例2 型糖尿病合并肺結(jié)核初治患者隨機(jī)分為治療組和對照組,均治療2 個月為1 個療程,結(jié)果治療組有效率達(dá)96.6%,表明貓爪草瘦肉湯與西藥聯(lián)合治療2型糖尿病合并肺結(jié)核初治患者療效顯著。
不少臨床實(shí)踐證明貓爪草膠囊治療頸淋巴結(jié)結(jié)核療效顯著,李予雯[47]將80 例肺結(jié)核合并2 型糖尿病患者采用西醫(yī)進(jìn)行降血糖與抗結(jié)核治療,采用貓爪草膠囊治療的參與組明顯有效率(72.5%)顯著高于傳統(tǒng)治療組明顯有效率(37.5%),并且2 組患者均未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應(yīng)或不良事件。 黃海[48]讓110 例頸淋巴結(jié)結(jié)核患者加服貓爪草進(jìn)行治療,結(jié)果治療組的臨床治愈達(dá)94.3%,且副作用較小。
貓爪草局部應(yīng)用或服用可促進(jìn)病灶的軟化、液化,改善局部血液循環(huán),使療程縮短,是良好的輔助治療藥物。 于偉[49]將86 例患兒隨機(jī)分為2 組,對照組常規(guī)應(yīng)用異煙肼抗結(jié)核治療,治療組在此基礎(chǔ)上加用貓爪草膠囊,臨床治愈率達(dá)到97.7%,沒有毒副作用。 陸云等[50]將80 例患兒在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用貓爪草膠囊,2 個月治療組和對照組的治愈率分別達(dá)72.5%和40.0%,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義,治療組療程亦明顯縮短。
貓爪草還具有多種治療作用,應(yīng)用較廣,值得開發(fā)利用。 程鋒剛[51]對貓爪草膠囊聯(lián)合抗癆藥物治療結(jié)核性結(jié)節(jié)性紅斑的臨床研究得出,貓爪草能有效改善皮膚局部血液循環(huán)及病灶周圍營養(yǎng)條件,同時有提高機(jī)體免疫力的作用。 張艷[52]將284 例腸系膜淋巴結(jié)炎患兒,應(yīng)用貓爪草膠囊進(jìn)行治療,取得較好臨床效果,可避免長期使用抗生素產(chǎn)生腸道菌群失調(diào),產(chǎn)生耐藥菌株。 此外,在治療甲亢方面,經(jīng)各項檢查確診為甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)患者168 例中,中西醫(yī)藥物結(jié)合治療組有效率達(dá)96%[53]。 丁力等[54]對21 例附睪結(jié)核行抗結(jié)核化療患者加貓爪草膠囊進(jìn)行個性化方案治療,結(jié)果21 例附睪結(jié)核在化療結(jié)束時有19 例附睪腫塊消失,用藥顯效率達(dá)100%,腫塊消退率達(dá)95.2%,療效較好,無副作用與復(fù)發(fā)。
貓爪草因具備抗腫瘤活性等良好的藥理作用而逐漸受到重視,現(xiàn)已成為國家重點(diǎn)發(fā)展三類藥材之一。
我國已建立貓爪草種植基地,其中河南淮濱縣種植基地成立了專業(yè)合作社,王家崗鄉(xiāng)成為了中原貓爪草第一鄉(xiāng),申請了貓爪草原產(chǎn)地認(rèn)證標(biāo)志,并注冊了金河灘牌貓爪草商標(biāo)。 還建立了中國貓爪草網(wǎng)站利用互聯(lián)網(wǎng),以加大貓爪草產(chǎn)品的宣傳推介力度,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷韓國、日本等其他地區(qū)[55]。
但總體來看,目前貓爪草的開發(fā)還處于初級階段,存在來源不規(guī)范、劑型與生產(chǎn)廠家單一、有效成分化學(xué)成分尚未明確、推廣與臨床應(yīng)用較少等問題,值得進(jìn)一步研究與利用。 應(yīng)加強(qiáng)其化學(xué)成分、藥理作用和臨床應(yīng)用等方面的研究,為完善貓爪草抗腫瘤研究、提高貓爪草新劑型開發(fā)與應(yīng)用提供參考,進(jìn)而促進(jìn)貓爪草資源的充分利用,打開國內(nèi)外市場。