邢時龍 淦勤

摘要：目的? 探究原發(fā)性肝癌患者血清25-羥基維生素D3[25-（OH）D3]的變化及其與免疫抑制因子IL-10的關(guān)系。方法? 選取2014年2月～2019年7月于我院就診的60例原發(fā)性肝癌患者作為疾病組，另外選擇同期60名健康體檢人群作為健康對照組，采用電化學(xué)發(fā)光法測定兩組血清25-（OH）D3濃度，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定血清IL-10濃度。Spearman法分析25-（OH）D3與IL-10間的相關(guān)性。結(jié)果? 疾病組血清25-（OH）D3濃度低于健康對照組[（13.65±7.92）ng/ml vs （26.15±8.33）ng/ml]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;疾病組IL-10濃度高于健康對照組[（89.71±26.59）ng/ml vs （26.18±8.15）ng/ml]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。血清25-（OH）D3可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤分期密切相關(guān)，與IL-10濃度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.568，P<0.05）。結(jié)論? 原發(fā)性肝癌患者存在25-（OH）D3缺乏現(xiàn)象，且與腫瘤進(jìn)展和免疫抑制密切相關(guān)。

關(guān)鍵詞：原發(fā)性肝癌;25-（OH）D3;IL-10

中圖分類號：R735.7? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.01.030

文章編號：1006-1959（2020）01-00101-03

Relationship Between Serum 25-hydroxyvitamin D3 Level and Immunosuppressive Factor IL-10

in Patients with Primary Liver Cancer

XING Shi-long，GAN Qin

（Department of Hepatobiliary Surgery，Jiujiang First People's Hospital，Jiujiang 332000，Jiangxi，China）

Abstract：Objective? To investigate the changes of serum 25-hydroxyvitamin D3[25-（OH）D3] in patients with primary liver cancer and its relationship with the immunosuppressive factor IL-10.Methods? 60 patients with primary liver cancer who were treated in our hospital from February 2014 to July 2019 were selected as the disease group， and another 60 healthy people were selected as the healthy control group during the same period，the serum 25-（OH）D3 concentration was measured by electrochemical luminescence method， and the serum IL-10 concentration was determined by ELISA. Spearman's method was used to analyze the correlation between 25-（OH）D3 and IL-10.Results? The serum 25-（OH）D3 concentration in the disease group was（13.65±7.92） ng/ml， which was lower than that in the healthy control group（26.15±8.33） ng/ml， the difference was statistically significant （P<0.05）; the IL-10 in the disease group the concentration was higher than that in the healthy control group [（89.71±26.59） ng/ml vs （26.18±8.15） ng/ml]，the difference was statistically significant（P<0.05）. Serum 25-（OH）D3 may be closely related to lymph node metastasis and tumor stage， and negatively correlated with IL-10 concentration（r=-0.568，P<0.05）. Conclusion? 25-（OH）D3 deficiency exists in patients with primary liver cancer， and is closely related to tumor progression and immunosuppression.

Key words：Primary liver cancer;25- （OH） D3;IL-10

原發(fā)性肝癌（primary liver cancer）在全球腫瘤導(dǎo)致死亡病例中占據(jù)第5位，約80%以上的原發(fā)性肝癌均伴隨慢性乙肝或丙肝感染[1]。在中國，多數(shù)患者由慢性乙肝患者演變而來[2]。近年來原發(fā)性肝癌早期篩查技術(shù)、外科手術(shù)技術(shù)以及綜合療法取得較大進(jìn)展。但我國原發(fā)性肝癌逐漸年輕化，且在早期階段并無明顯臨床癥狀，隱匿性強(qiáng)，發(fā)現(xiàn)時常處于晚期階 段[3]，患者預(yù)后較差。目前對原發(fā)性肝癌的具體機(jī)制尚未完全明確，靶向治療效果并不理想[4]。探索原發(fā)性肝癌的發(fā)病機(jī)制，尋找新的診斷和治療靶點(diǎn)，具有重要的臨床意義。在眾多機(jī)制學(xué)說中，病原體與肝臟的免疫斗爭占據(jù)重要地位[5]。研究發(fā)現(xiàn)[6]，25-羥基維生素D3[25-（OH）D3]可調(diào)控機(jī)體固有免疫和適應(yīng)性免疫反應(yīng)，在多種腫瘤中也發(fā)現(xiàn)存在25-（OH）D3缺乏現(xiàn)象。Said E等[7]發(fā)現(xiàn)未經(jīng)治療的慢性乙肝患者中血清25-（OH）D3顯著低于健康對照組，且與乙肝病毒載量存在顯著負(fù)相關(guān)，提示25-（OH）D3可參與抗病毒免疫反應(yīng)過程，推測其同樣參與了原發(fā)性肝癌的致病過程。但目前關(guān)于原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3水平的研究尚無統(tǒng)一定論。因此，本研究選擇我院60例原發(fā)性肝癌患者，探討其血清25-（OH）D3水平及與腫瘤分期、IL-10的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2014年2月～2019年7月于九江市第一人民醫(yī)院就診的原發(fā)性肝癌患者60例作為疾病組，所有患者均經(jīng)病理組織學(xué)或臨床明確診斷，其中男38例，女22例，年齡39～78歲，平均年齡（58.28±19.18）歲。另選取同期于我院體檢中心健康體檢的60例健康人作為健康對照組，其中男37例，女23例，年齡38～76歲，平均年齡（58.90±18.31）歲。兩組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法? 采集兩組晨起空腹靜脈血6 ml，于干燥管中靜置20 min，3500 r/min離心10 min，分離血清，分裝2管，1管隨即送檢，用于檢測血清25-（OH）D3濃度;另一管于-80℃冰箱凍存?zhèn)溆?，測定血清IL-10濃度。血清25-（OH）D3濃度采用深圳新產(chǎn)業(yè)公司SNIBE全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀MAGLUMI 2000及其配套儀器測定;血清IL-10水平采用美國R&D公司的人IL-10測定ELISA試劑盒測定，所有步驟嚴(yán)格依據(jù)說明書執(zhí)行。測定前保證儀器正常，室內(nèi)質(zhì)量控制合格。

1.3觀察指標(biāo)? 比較兩組血清25-（OH）D3和IL-10水平及不同年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否以及不同TNM分期的原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3濃度差異，原發(fā)性肝癌腫瘤分期依據(jù)美國癌癥聯(lián)合委員會制定的分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行[8]。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法? 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。計量資料采用（x±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析;計數(shù)資料采用（%）表示，組間比較采用？字2檢驗(yàn);相關(guān)性分析采用Spearman法分析。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組血清25-（OH）D3和IL-10水平比較? 疾病組血清25-（OH）D3濃度低于健康對照組，IL-10水平高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3與臨床參數(shù)間的關(guān)系? 不同年齡、性別的原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清25-（OH）D3水平低于未轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）; TNM分期Ⅲ+Ⅳ患者血清25-（OH）D3水平低于Ⅰ+Ⅱ期患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.3原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3和IL-10的相關(guān)性? Spearman相關(guān)性分析顯示，原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3與IL-10呈負(fù)相關(guān)（r=-0.568，P<0.05），見圖1。

3討論

探究原發(fā)性肝癌潛在的病因?qū)W機(jī)理對于開發(fā)新的治療靶點(diǎn)尤為關(guān)鍵[9]。25-（OH）D3在包括慢性乙肝的慢性肝病中存在普遍缺乏，且和疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)。既往報道證實(shí)其在多種腫瘤患者中缺乏[10]，然而目前關(guān)于25-（OH）D3與原發(fā)性肝癌患者的臨床報道較少，25-（OH）D3在局部組織的代謝活性可能在調(diào)控多種基因中扮演重要角色，這些基因涉及增殖、凋亡、分化、炎癥、侵襲、轉(zhuǎn)移以及血管生成和微小RNA轉(zhuǎn)換過程，其異常直接或間接介導(dǎo)了腫瘤發(fā)生和進(jìn)展[11]。最新研究顯示25-（OH）D3缺乏或不足與肝癌發(fā)病風(fēng)險增加密切相關(guān)，其血清濃度與肝癌風(fēng)險呈負(fù)相關(guān)關(guān)系[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，與健康對照組相比，原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3濃度下降，進(jìn)一步分析患者血清25-（OH）D3濃度與臨床指標(biāo)間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)不同年齡、性別的原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3水平基本一致，而在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中血清25-（OH）D3濃度則低于未轉(zhuǎn)移患者，且處于腫瘤TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者的25-（OH）D3水平亦低于Ⅰ+Ⅱ期患者。以上結(jié)果提示血清25-（OH）D3可能與原發(fā)性肝癌進(jìn)展存在密切關(guān)聯(lián)，處于進(jìn)展期的患者通常血清25-（OH）D3濃度較低，但兩者之間的因果關(guān)系并不清楚，有待于進(jìn)一步研究。既往研究證實(shí)25-（OH）D3可通過抑制組蛋白去乙酰化酶-2的表達(dá)并增強(qiáng)P21表達(dá)，進(jìn)而抑制HCC腫瘤細(xì)胞的增殖，發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。而本研究發(fā)現(xiàn)的原發(fā)性肝癌患者低水平25-（OH）D3，可能是腫瘤進(jìn)展的表現(xiàn)亦或者由于25-（OH）D3濃度降低而導(dǎo)致機(jī)體抗腫瘤效應(yīng)不足，這有待于進(jìn)一步利用動物實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證。此外，F(xiàn)inkelmeier F等[12]發(fā)現(xiàn)25-（OH）D3與原發(fā)性肝癌患者較差的生存預(yù)后情況密切相關(guān)，這些結(jié)果均提示25-（OH）D3參與了肝癌的進(jìn)展，并可能作為潛在的生物標(biāo)志物。

25-（OH）D3可調(diào)控機(jī)體免疫系統(tǒng)，祁曉平等[13]研究顯示，25-（OH）D3能夠有效保護(hù)大鼠抵抗致死劑量的LPS，這種保護(hù)作用可能與25-（OH）D3調(diào)控Treg細(xì)胞有關(guān)。在肝癌患者中，已經(jīng)證實(shí)代表Treg細(xì)胞的IL-10存在異常上調(diào)現(xiàn)象，即肝癌患者存在嚴(yán)重的免疫抑制現(xiàn)象[14，15]。本研究結(jié)果也間接證實(shí)了該結(jié)論，即原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3與IL-10濃度呈負(fù)相關(guān)，提示肝癌中25-（OH）D3可能通過調(diào)控Treg細(xì)胞參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

總之，本研究初步證實(shí)原發(fā)性肝癌患者血清25-（OH）D3異常下調(diào)，其與免疫抑制性細(xì)胞因子IL-10存在負(fù)相關(guān)性，且低水平的25-（OH）D3與肝癌患者腫瘤分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能有關(guān)。

參考文獻(xiàn)：

[1]Siegel RL，Miller KD，Jemal A.Cancer Statistics，2017[J].CA Cancer J Clin，2017（67）：7-30.

[2]季盛，卓蘊(yùn)慧.221例乙型肝炎相關(guān)性肝癌患者的流行病學(xué)分析[J].肝臟，2012，17（12）：865-866.

[3]張典，姜鳳良，胡志芳，等.原發(fā)性肝癌的預(yù)防措施[J].中國老年學(xué)雜志，2018，38（17）：4317-4319.

[4]Kumari R，Sahu MK，Tripathy A，et al.Hepatocellular carcinoma treatment： hurdles， advances and prospects[J].Hepat Oncol，2018，5（2）：HEP08.

[5]Peters MG.Hepatitis B Virus Infection：What Is Current and New[J].Top Antivir Med，2019，26（4）：112-116.

[6]Skrajnowska D，Bobrowska-Korczak B.Potential Molecular Mechanisms of the Anti-cancer Activity of Vitamin D[J].Anticancer Res，2019，39（7）：3353-3363.

[7]Said E，Agawy WE，Ahmed R，et al.Serum Vitamin D Levels in Treatment-na？觙ve Chronic Hepatitis B Patients[J].Journal of Translational Internal Medicine，2017，5（4）：230-234.

[8]陶一明，馮鐵誠，王志明.原發(fā)性肝癌患者TNM 分期與術(shù)后生存關(guān)系：SEER 數(shù)據(jù)庫分析[J].中國普通外科雜志，2016，25（7）：952-956.

[9]文天夫.原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2017年版）解讀[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2018（1）：32-34.

[10]Chirumbolo S.Vitamin D3 in cancer prevention and therapy： the nutritional issue[J].Hormone Molecular Biology and Clinical Investigation，2015，23（3）：71-78.

[11]Kennel KA，Drake MT.Vitamin D in the cancer patient[J].Current Opinion in Supportive and Palliative Care，2013，7（3）：272-277.

[12]Finkelmeier F，Kronenberger B， KoBerle V，et al.Severe 25-hydroxyvitamin D deficiency identifies a poor prognosis in patients with hepatocellular carcinoma - a prospective cohort study[J].Alimentary Pharmacology & Therapeutics，2014，39（10）：1204-1212.

[13]祁曉平，李培，惲?xí)r峰，等.1，25-二羥基25-（OH）D3對致死劑量脂多糖攻擊的大鼠CD4+CD25+Treg細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用[J].中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2011，14（9）：676-679.

[14]劉勇，周彪，曾金，等.肝癌患者外周血Th17/Treg細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)及IL-17對肝癌細(xì)胞侵襲的影響[J].中國老年學(xué)雜志，2018，38（3）：700-702.

[15]康慧琴，孟娟，行超然，等. 慢性丙肝及肝硬化患者外周血Th17/Treg細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)及意義[J]. 中國醫(yī)藥科學(xué)，2017，7（15）：248-251.

收稿日期：2019-08-21;修回日期：2019-08-30

編輯/王朵梅