王結(jié)鑫　丁艷　王倩　褚海清　趙雨　張立明

【摘 要】 目的：測(cè)定枸杞-黃精多糖類、黃酮類化學(xué)成分，優(yōu)化枸杞-黃精顆粒制劑工藝。方法：采用HPLC確定枸杞-黃精多糖類成分與黃酮類成分，多糖類成分色譜柱為安捷倫XDB-C18（4.6mm×250mm，5μm），以磷酸鹽緩沖液（pH 6.8 ）（A）-乙腈（B）為流動(dòng)相，等度洗脫，流速為1mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm，柱溫為30℃;黃銅類成分色譜柱為安捷倫XDB-C18（4.6mm×250mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈∶水∶冰乙酸=5∶94.5∶0.5（A）和乙腈∶水∶冰乙酸=70∶29.5∶0.5（B）;梯度洗脫，流速為1mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm，柱溫為30℃，確定枸杞-黃精中的抗糖尿病生物活性的成分多糖、黃酮。以顆粒劑性狀、成型率、溶化性、吸濕率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)枸杞-黃精組方中填充劑、潤(rùn)濕劑、抗黏性輔料、抗吸濕性輔料進(jìn)行考察篩選，確定枸杞-黃精顆粒制劑最優(yōu)制劑工藝。結(jié)果：枸杞-黃精中含有葡萄糖、甘露糖及蘆丁等抗糖尿病的活性成份;顆粒制劑工藝得到枸杞-黃精干膏粉與微晶纖維素的最佳比例為2∶1;確定潤(rùn)濕劑為3% PVP K30醇溶液（70% ），用量為40%。篩選抗黏性輔料最佳用量為滑石粉1%，硬脂酸鎂0.75%;抗吸濕性輔料最佳用量為甘露醇9%，硫酸鈣6%。經(jīng)本工藝制成的顆粒制劑，取三批次檢查水分、裝量差異、粒度和溶化性，均符合要求。結(jié)論：化學(xué)成分中含有抗糖尿病生物活性成分，枸杞-黃精顆粒制劑工藝穩(wěn)定可行。

【關(guān)鍵詞】 枸杞;黃精;化學(xué)成分;顆粒劑;制劑工藝

【中圖分類號(hào)】R284 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2020）23-0024-08

Study on Chemical Constituents and Granule Preparation Technology of Lycium barbarum-Huangjing

WANG Jiexin1 DING Yan1 WANG Qian1 ZHANG Liming1，2，3*

1.College of Pharmacy，Ningxia Medical University，Yinchuan 750004，China;2.Ningxia Engineering and Technology Research Center for Modernization of Hui Medicine，Yinchuan 750004，China;3.Key Laboratory of Hui Ethnic Medicine Modernization， Ministry of? Education（Ningxia Medical University），Yinchuan 750004，China

Abstract：Objective The chemical constituents of Lycium barbarum-Huangjing polysaccharide and flavonoids were determined， optimization of granular preparation of Lycium barbarum-Huangjing formation. Methods HPLC was used to determine the components of Lycium barbarum - huangjing polysaccharide and flavonoids，the chromatographic conditions of polysaccharides are as follows： the analysis was carried out on a Agilent XDB - C18column （4.6mm×250mm，5μm） ，with the phosphate buffer （pH 6.8） （A） -acetonitrile （B） was used as the mobile phase for isocratic elution，and the flow rate was 1.0 mL·min-1，and the detectionwavelength was set at 250 nm， the column temperature was set at 30 ℃.The conditions of flavonoids chromatography were as follows：Agilent XDB - C18 column （4.6mm×250mm，5μm），The mobile phase was acetonitrile： water： glacial acetic acid = 5∶94.5∶0.5 （A） and acetonitrile： water： glacial acetic acid = 70∶29.5∶0.5 （B） for gradient elute，and the flow rate was 1.0mL·min-1，and the detectionwavelength was set at 250 nm， the column temperature was set at 30 ℃.To determine the components of polysaccharides and flavones in the anti - diabetic bioactivity of Lycium barbarum – huangjing.Taking granule granulation， particle forming rate， particle dissolution and particle moisture absorption rate as the evaluation index， the filler， wetting agent， anti-viscosity excipient and anti-hygroscopic excipient in Lycium barbarum-Huangjing prescription were investigated and screened to determine the optimal preparation process of Lycium barbarum-Huangjing granule preparation and to check whether it met the requirements of pharmacopoeia.Results Lycium barbarum - HuangJing contains anti-diabetic active ingredients such as glucose， mannose sugar and rutin;Get the best ratio of medlar-yellow essence dry paste powder to microcrystalline cellulose is 2∶1; determine the wetting agent is 3% PVP K30 alcohol solution （70%）， the dosage is 40%. The optimum dosage of anti-viscous excipient was 1% talc powder ，0.75% magnesium stearate ，9% mannitol and 6% calcium sulfate. The granule preparation made by this process， take three batches to check the moisture content， loading quantity difference， particle size and solubility， all meet the requirements. Conclusion The chemical components contain anti-diabetic bioactive components， the preparation technology of Lycium barbarum-Huangjing granules is stable and feasible.

Keywords：Lycium Barbarum;Huangjing;Chemical Composition;Granules;Preparation Technology

枸杞-黃精組方在古方中又稱二精方、二精丸，來源于《奇效良方卷之二十一·諸虛門》中，具有補(bǔ)精氣作用。枸杞具有滋補(bǔ)肝腎、益精明目的功效，黃精具有補(bǔ)精益氣等作用，方中枸杞多糖、總黃酮，黃精多糖、總黃酮均具有抗氧化、調(diào)節(jié)糖代謝活性，對(duì)糖尿病具有一定的預(yù)防和治療作用。本課題組前期研究表明枸杞-黃精配伍使用具有很好的降糖作用，且以枸杞-黃精1∶1比例配伍降糖效果最佳[1]，故本實(shí)驗(yàn)擬通過以HPLC方法分析枸杞-黃精中多糖、黃酮類成分，確定枸杞-黃精中抗糖尿病生物活性的成分。以顆粒劑性狀、成型率、溶化性、吸濕率為考察指標(biāo)，對(duì)枸杞-黃精顆粒的制劑工藝進(jìn)行多指標(biāo)綜合優(yōu)化，為二精方進(jìn)一步開發(fā)利用提供研究基礎(chǔ)。

1.儀器與材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器 高效液相色譜儀 （Agilent 1260）;分析天平（梅特勒-托利多）;DHG-9075A型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）;循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）;電子計(jì)重秤（廈門佰倫斯電子科技有限公司）;RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）;粉碎機(jī)（屹立工貿(mào)有限公司）;玻璃干燥器;HH-4水浴鍋（上海力辰邦西科技有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 枸杞（批號(hào)：070101，產(chǎn)地：寧夏，購自寧夏明德飲片廠）;黃精（批號(hào)：070101，產(chǎn)地：四川，石家莊市柏林藥材加工廠）;標(biāo)準(zhǔn)品：D-葡萄糖（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110833-201506）;D-甘露糖（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：140651-201504）;蘆?。ㄖ袊称匪幤窓z定研究院，批號(hào)：100080-200707）;聚乙烯比咯烷酮K30（MYM生物科技有限公司）;微晶纖維素（北京鳳禮精求醫(yī)藥股份有限股份有限公司，批號(hào)：K792）;硬脂酸鎂（上海麥克林生物有限公司，批號(hào)：M813581）;滑石粉（北京鳳禮精求醫(yī)藥股份有限股份有限公司，批號(hào)：20180326）;甘露醇（上海廣諾化學(xué)科技有限公司，批號(hào)：20180810）。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑 乙醇（分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20130128）;三氯甲烷（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20160709）;正丁醇（分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：201340506）;甲醇（分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20151120）;乙腈（色譜純，美國 Fisher 公司）;甲醇（色譜純，美國 Fisher 公司）;三氟乙酸（分析純，上海中秦化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20170915）;1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所，批號(hào)：20100729）;娃哈哈水。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 化學(xué)成分分析

2.1.1 HPLC色譜條件 多糖類成分的色譜條件[2-5]：安捷倫XDB-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，磷酸鹽緩沖液（pH 6.8 ）（A）：乙腈（B）=84：16等度洗脫;流速為1mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為10?? μL。

黃酮類成分的色譜條件[6-9]：安捷倫XDB-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，流動(dòng)相為乙腈∶水∶冰乙酸=5∶94.5∶0.5（A）和乙腈∶水∶冰乙酸=70∶29.5∶0.5（B）;梯度洗脫條件：0～14min：100%～86%（A）;14～22min：86%～84%（A）;22～40min：84%～70%（A）;40～60min：70%～100%（A）;流速為1mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為10μL。

2.1.2 供試品溶液制備 將枸杞與黃精分別按照1∶1的比例混合，加入75%的乙醇，70℃回流提取1.5h，過濾，回流提取2次，合并濾液，即得醇提取液[10]。將醇提液濃縮并醇沉（使醇含量達(dá)到80%左右），靜置過夜，過濾，沉淀用80%乙醇潤(rùn)洗多次，干燥后得到粗多糖，將粗多糖加水溶解，加入氯仿-正丁醇（4∶1）混合溶液脫蛋白，劇烈振蕩后3000r/min 離心10min，得上清液，在上清液中加入無水乙醇（使醇含量達(dá)80%左右），靜置過夜后過濾，所得沉淀依次用 95%乙醇、無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，烘干得精制多糖[11]。取藥物多糖10mg，精密稱定置試管中，加三氟乙酸2mL，使溶解密封，于100℃ 烘箱中水解8h，吹干，殘?jiān)蛹状?mL，使溶解，吹干，重復(fù)3次，加水 2mL使溶解，即得藥物多糖水解液。在水解液中加 1.2mL的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP） 甲醇溶液，1mL 0.3mol·L-1的氫氧化鈉溶液，混勻，置70℃ 水浴加熱 30min，取出，冷卻至室溫，加0.3mol·L-1鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至中性，混勻，用等體積三氯甲烷萃取3次，取水層，針筒式微孔濾膜過濾，濾液作為多糖的供試品溶液[3-5]。

將枸杞與黃精提取，石油醚脫脂，殘?jiān)尤?0%乙醇，60℃超聲兩次，每次30min，濾過，合并濾液，減壓濃縮，濃縮液經(jīng)HPD-600型大孔樹脂，蒸餾水除去水溶性雜質(zhì)后，50%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，針筒式微孔濾膜過濾，濾液作為黃酮的供試品溶液[12-13]。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備 精密稱取葡萄糖、甘露糖分別置于試管中，分別加入5mL 0.3mol·L-1的NaOH溶液，振蕩溶解，取溶解后的溶液100μL，加入0.5mol·L-1的PMP甲醇溶液50μL，70℃水浴中反應(yīng)30min后冷卻至室溫，加0.3mol·L-1的鹽酸100μL中和，混勻，用等體積三氯甲烷萃取3次，取水層，針筒式微孔濾膜過濾，濾液作為多糖類成分對(duì)照品溶液。

精密稱取蘆丁，置于10 mL容量瓶中，加乙醇溶解并定容至10mL。色譜分析時(shí)，對(duì)照品溶液過針筒式微孔濾膜，續(xù)濾液即為黃酮類成分對(duì)照品溶液。

2.2 干膏粉的制備[14] 將枸杞-黃精（1∶1）藥材進(jìn)行粉碎，過20目篩。將藥粉回流提取3次，每次1h，料液比均為1∶10，過濾，合并3次濾液，濾液減壓濃縮至一定濃度，加入4%微晶纖維素（MCC）混勻，置于烘箱中烘干后進(jìn)行粉碎，過5號(hào)篩，得干膏粉。

2.3 制劑工藝參數(shù)考察 采用濕法制粒法。在濕法制粒中，填充劑和黏合劑對(duì)顆粒質(zhì)量有較大影響，故以制粒情況（捏之成團(tuán)，觸之即散）、成型率、吸濕率、溶化性為參考指標(biāo)，選擇輔料，對(duì)制粒工藝進(jìn)行考察。

2.3.1 填充劑 將微晶纖維素作為填充劑，以制粒情況、成型率、吸濕率和溶化性為指標(biāo)篩選干膏粉與微晶纖維素最佳比例。

2.3.2 潤(rùn)濕劑的選擇 本實(shí)驗(yàn)分別以純化水、乙醇水溶液（70%）、3% PVP K30 醇溶液（70% ） 為潤(rùn)濕劑制粒，以制粒情況和顆粒成型率為指標(biāo)篩選潤(rùn)濕劑。

2.3.3 潤(rùn)濕劑中乙醇濃度的考察 本實(shí)驗(yàn)按干膏粉和輔料的量加入40%的不同濃度乙醇（60%、70%、80%）配置的3%PVP K30 醇溶液，揉捏后快速過篩制粒，將濕顆粒于60℃干燥后整粒。以制粒情況、顆粒成型率為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

2.3.4 潤(rùn)濕劑用量的考察 按藥粉與微晶纖維素2∶1稱取3份混合藥粉，按總量10%、20%、30%的量添加潤(rùn)濕劑，揉捏后快速過篩制粒，所得濕顆粒于60℃烘干后整粒。以制粒情況、顆粒成型率為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

2.4 顆粒處方優(yōu)化 根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)制粒情況，發(fā)現(xiàn)在制粒過程中，軟材略黏篩，影響顆粒的成型率;枸杞與黃精中含有大量多糖類成分，且多糖類成分易吸濕。因此，對(duì)顆粒方進(jìn)行優(yōu)化，添加抗黏性與抗吸濕性輔料，從而提高顆粒成型率，改善顆粒穩(wěn)定性。

2.4.1 抗黏性輔料篩選[15] 顆粒的黏性較強(qiáng)，故需加入抗黏性輔料以改善其黏性，從而提高顆粒質(zhì)量。在處方工藝初步篩選的基礎(chǔ)上，固定微晶纖維素用量，選擇滑石粉、硬脂酸鎂為抗黏性輔料，設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)表;以成型率、吸濕率、溶化性為指標(biāo)，篩選抗黏性輔料。

取適量干膏粉，按照表1的設(shè)計(jì)方案，將原料與輔料混合均勻制備顆粒，分別測(cè)定顆粒成型率、吸濕率、溶化性，計(jì)算綜合評(píng)分。

綜合評(píng)分=（最小吸濕率值/吸濕率值） ×50 + （成型率值/最大成型率值） ×50。

2.4.2 抗吸濕性輔料的篩選[16-17] 顆粒的吸濕性較強(qiáng)，故需加入抗吸濕性輔料以改善其吸濕性，從而提高顆粒質(zhì)量。在處方工藝初步篩選的基礎(chǔ)上，固定微晶纖維素用量，選擇甘露醇、硫酸鈣為抗吸濕性輔料，以成型率、吸濕率、溶化性為指標(biāo)，設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，具體見表2，篩選抗吸濕性輔料。

取適量干膏粉，按照下方表2的設(shè)計(jì)方案，將原料與輔料混合均勻制備顆粒，分別測(cè)定顆粒成型率、吸濕率、溶化性，計(jì)算綜合評(píng)分。

綜合評(píng)分=（最小吸濕率值/吸濕率值） ×50 + （成型率值/最大成型率值） ×50。

2.5 檢查 照《中國藥典（2015版，第四部）》中有關(guān)顆粒劑質(zhì)量評(píng)價(jià)規(guī)定，對(duì)所得枸杞-黃精顆粒進(jìn)行水分、粒度、裝量差異、溶化性進(jìn)行檢查[18]。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 化學(xué)成分分析

3.1.1 枸杞-黃精中多糖類化學(xué)成分分析 根據(jù)“2.1.2”項(xiàng)下“供試品溶液制備”制備枸杞-黃精的多糖類成分供試品溶液，進(jìn)行HPLC檢測(cè)，以“2.1.3”項(xiàng)下“標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備”葡萄糖、甘露糖的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，進(jìn)行HPLC檢測(cè)，按照“2.1.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行HPLC檢測(cè)。認(rèn)為供試品溶液中具有相同保留時(shí)間的色譜峰為共有峰。精密吸取供試品溶液10μL，注入HPLC色譜儀，記錄HPLC色譜圖，生成枸杞-黃精多糖、葡萄糖、甘露糖圖譜，S1-S3分別代表枸杞-黃精（1∶1）多糖、葡萄糖、甘露糖。比較供試品多糖類成分與標(biāo)準(zhǔn)品蒲萄萄、甘露糖圖譜，發(fā)現(xiàn)多糖類成分中含有葡萄糖、甘露糖。如圖1所示。

3.1.2 中黃酮類化學(xué)成分分析 根據(jù)“2.1.2”項(xiàng)下“供試品溶液制備”制備枸杞-黃精的黃酮類成分供試品溶液，進(jìn)行HPLC檢測(cè)，以“2.1.3”項(xiàng)下“標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備”蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，進(jìn)行HPLC檢測(cè)，按照“2.1.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行HPLC檢測(cè)。認(rèn)為供試品溶液中具有相同保留時(shí)間的色譜峰為共有峰。精密吸取供試品溶液10μL，注入HPLC色譜儀，記錄HPLC色譜圖，生成枸杞-黃精黃酮類成分、標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁圖譜。比較供試品黃酮類成分及標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁譜圖，可以確定供試品黃酮中含有蘆丁。如圖2所示。

3.2 方法學(xué)考察

3.2.1 線性關(guān)系考察 以“2.1.3項(xiàng)下”的“標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備”方法制備的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用溶解試劑稀釋并在容量瓶中定容。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品的濃度分別為0.17mg/mL、0.84mg/mL、1.67mg/mL、2.51mg/mL、3.34mg/mL、4.18mg/mL;甘露糖標(biāo)準(zhǔn)品的濃度分別為0.19mg/mL、0.95mg/mL、1.90mg/mL、2.85mg/mL、3.80mg/mL、4.75mg/mL;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為0.16mg/mL、0.32mg/mL、1.60mg/mL、3.20mg/mL、4.80mg/mL、6.40mg/mL、8.00mg/mL。將各個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液分別進(jìn)樣。上述各溶液在選定的色譜條件下經(jīng)HPLC測(cè)定后，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性回歸方程、R2及線性范圍見表3，結(jié)果顯示標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)在0.9996～1.0000 ，表明方法線性關(guān)系良好。

3.2.2 精密度實(shí)驗(yàn) 取枸杞-黃精多糖類成分、黃酮類成分供試品溶液分別連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄HPLC色譜圖，結(jié)果見表4。葡萄糖、甘露糖、蘆丁對(duì)應(yīng)的色譜峰峰面積（A）的RSD在2.01%～2.72%，保留時(shí)間（T）RSD在0.48%～3.36%，符合特征圖譜要求，表明儀器精密度良好。

3.2.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取枸杞-黃精多糖類成分樣品、黃酮類成分供試品溶液，于0、3、6、9、12、24h分別進(jìn)樣，記錄HPLC色譜圖，結(jié)果見表4。葡萄糖、甘露糖、蘆丁對(duì)應(yīng)的色譜峰峰面積（A）的RSD在1.07%～2.95%，保留時(shí)間（T）RSD在0.04%～2.96%，符合特征圖譜要求，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

3.2.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取枸杞-黃精多糖類成分樣品、黃酮類成分樣品，分別平行制備多糖類成分供試品、黃酮類成分供試品溶液6份，分別進(jìn)樣，記錄HPLC色譜圖，結(jié)果見表4。葡萄糖、甘露糖、蘆丁對(duì)應(yīng)的色譜峰峰面積（A）的RSD在0.01%～3.06%，保留時(shí)間（T）RSD在0.0004%～0.98%，符合特征圖譜要求，表明方法的重復(fù)性良好。

3.2.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密吸取已測(cè)定的供試品溶液1.0mL，置于進(jìn)樣瓶中，精密吸取“2.1.1”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)品溶液1.0mL，搖勻，平行制備6份，根據(jù)加入標(biāo)準(zhǔn)品的量與測(cè)得量計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表4。加樣回收率為93.07%～105.11%，RSD為0.009%～0.68%，說明該方法的準(zhǔn)確度良好。

3.3 干膏粉與填充劑比例篩選結(jié)果 由表5可知，干膏粉與MCC比例為2∶1時(shí)成型率最高，故選取干膏粉與微晶纖維素最佳比例為2∶1。

3.4 潤(rùn)濕劑篩選結(jié)果 由表6可知，干膏粉與MCC比例為2∶1時(shí)，潤(rùn)濕劑為3% PVP K30 醇溶液（70%） 成型率最高，故以3% PVP K30 醇溶液（70%）為潤(rùn)濕劑。

3.5 潤(rùn)濕劑中乙醇濃度篩選結(jié)果 由表7可知，干膏粉與MCC比例為2∶1時(shí)，潤(rùn)濕劑中乙醇濃度為70% 時(shí)成型率最高，故以3% PVP K30 醇溶液（70%）為潤(rùn)濕劑。

3.6 潤(rùn)濕劑用量篩選結(jié)果 由表8可知，當(dāng)干膏粉與MCC比例為2∶[KG-*3/5]1時(shí)，潤(rùn)濕劑為3% PVP K30 醇溶液（70%），用量為40% 時(shí)成型率最高，故以3% PVP K30 醇溶液（70%），用量為40% 為顆粒潤(rùn)濕劑。

3.7 抗黏性輔料正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果 由表9、表10可知，各因素影響程度依次為 C > B > A，最優(yōu)工藝為A1B3C2 ，即在原處方（干膏粉與微晶纖維素比例2∶1）基礎(chǔ)上，滑石粉用量1%，硬脂酸鎂用量0.75%，潤(rùn)濕劑乙醇濃度為70%。

3.8 抗吸濕性輔料篩選結(jié)果 由表11、表12可知，各因素影響程度依次為 C > B > A，最優(yōu)工藝為A3B2C2 ，即在原處方（干膏粉與微晶纖維素比例2∶1，滑石粉用量1%，硬脂酸鎂用量0.75%）基礎(chǔ)上，甘露醇用量9%，硫酸鈣用量6%，潤(rùn)濕劑乙醇濃度為70%。

3.9 檢查項(xiàng)下結(jié)果 由表13可知，水分小于8%，裝量差異在±5%內(nèi)，粒度和溶化性均符合規(guī)定。

4 結(jié)論與討論

枸杞是寧夏道地藥材，最早將其作為藥用部位記錄在《名醫(yī)別錄》[19]，其功效是滋補(bǔ)肝腎、益精明目。枸杞中具有多種成分如枸杞多糖、枸杞色素、黃酮類化合物、生物堿等，其中大量研究表明枸杞多糖利用價(jià)值相對(duì)較高[20]。黃精是運(yùn)用歷史悠久的藥食同源藥物[21]，其具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰，健脾潤(rùn)肺的功效。本課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn)，枸杞-黃精多糖提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病具有降糖作用[1]，因此在此次研究中測(cè)定了枸杞-黃精中多糖、黃酮類的成分，通過與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比發(fā)現(xiàn)，活性成分有葡萄糖、甘露糖以及蘆丁。但通過比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液HPLC峰發(fā)現(xiàn)，仍有較多峰未確定其成分，后期還需繼續(xù)對(duì)其成分進(jìn)行深入分析。枸杞-黃精顆粒的制備工藝采用正交設(shè)計(jì)等方法，對(duì)濕法制粒工藝進(jìn)行考察和優(yōu)化，篩選出適合枸杞-黃精組方顆粒的制粒工藝，為制劑質(zhì)量評(píng)價(jià)及有效期的確定提供可靠的依據(jù)。

中藥顆粒制劑主要是在湯劑和糖漿劑的基礎(chǔ)上發(fā)展的中藥劑型，相對(duì)于傳統(tǒng)湯劑來說，具有方便服用、便于攜帶、易于調(diào)配、劑量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn);而相對(duì)于片劑來說，顆粒劑的溶解時(shí)間短、藥物溶出迅速、患者吸收快、患者生物利用度高等優(yōu)點(diǎn)。本研究采用濕法制粒，該方法在國內(nèi)應(yīng)用較早，是一種傳統(tǒng)的制粒方法。筆者在大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上對(duì)枸杞-黃精顆粒的最優(yōu)成型工藝進(jìn)行探索，得出其最佳制備工藝為：干膏粉與微晶纖維素比例為2∶1，滑石粉用量1%，硬脂酸鎂用量0.75%，甘露醇用量9%，硫酸鈣用量6%，潤(rùn)濕劑為3% PVP K30醇溶液（70%），用量為40%。通過對(duì)顆粒劑的有關(guān)檢查，均符合規(guī)定，證明該制備工藝穩(wěn)定可行。

參考文獻(xiàn)

[1]王淵學(xué).二精方多糖提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及對(duì)實(shí)驗(yàn)性Ⅱ型糖尿病小鼠血糖、血脂的影響[D].銀川：寧夏醫(yī)科大學(xué)，2015.

[2]倪青. 精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)背景下的糖尿病中醫(yī)藥防治思路[J]. 醫(yī)學(xué)研究雜志， 2018，47（2）：1-4，12.

[3]楊秋香. 當(dāng)歸多糖對(duì)2型糖尿病預(yù)防及治療作用的初步研究[D]. 武漢：華中科技大學(xué)， 2013.

[4]KANAGASABAPATHY G， KUPPUSAMY U R， ABD MALEK S N， et al. Glucan-rich polysaccharides from Pleurotussajor-caju（Fr.） Singer prevents glucose intolerance， insulin resistance andinflammation in C57BL/6J mice fed a high-fat diet[J]. BMC Complementary and Alternative Medicine， 2012 （12）， 261.

[5]熊雄， 王懿萍， 王岳峰， 等. 黃連多糖的降血糖活性研究[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥， 2013，24（10）：2351-2353.

[6]趙文竹. 玉米須功能因子活性評(píng)價(jià)及其降血糖機(jī)理研究[D]. 長(zhǎng)春：吉林大學(xué)， 2014.

[7]GUO Y， LI， LI J， et al. Anti-hyperglycemic activity of polysac-charides from calyx of Physalis alkekengi var.franchetii Makinoon alloxan-induced mice[J]. Int J Biol Macromol， 2017，24（99）：249.

[8]侯紅瑞， 陳玲， 孫國勇， 等. 知母多糖對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病大鼠的降血糖作用[J]. 食品工業(yè)科技， 2018，39（12）：69-72，78.

[9]ZHANG Y， REN C， LU G， et al. Anti-diabeticeffect of mulberry leaf polysaccharide by inhibiting pancreatic islet cellapoptosis and ameliorating insulin secretory capacity in diabetic rats[J]. International Immunopharmacology， 2014，（1）： 248–257.

[10]XU L，YANG J. Anti-diabetic effectmediated by Ramulus mori- polysaccharides[J]. Carbohydrate Polymers， 2015（117）： 63–69.

[11] ZHAO Y， YANG X， REN D， et al. Preventive effects of jujube polysaccharides on fructose- induced insulin resistance and dyslipidemia in mice[J]. Food Funct， 2014，5（8）：1771- 1778.

[12]WU C Y， WANG H， HE X X， et al. The hypoglycemic and antioxidant effects of polysaccharides from the petioles and pedicels of Euryale ferox Salisb on alloxan- induced Hyperglycemic mice[J]. Food Funct， 2017，8（10）：3803-3813.

[13]CAO C L， HUANG Q， ZHANG B， et al. Physicochemical characterization and in vitro hypoglycemic activities of polysaccharides from Sargassum pallidum by microwave-assistedaqueous two-phase extraction[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2018 （109） ：357–368.

[14]付亭亭，韓天燕，左文寶，等.黑果枸杞顆粒成型工藝研究[J].中國新藥雜志， 2018，27（13）：1560-1564.

[15]李范珠，李永吉.中藥藥劑學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：183-187.

[16]左文寶，王榮，楊建宏，等.補(bǔ)青顆粒成型工藝優(yōu)化[J].中成藥， 2018，40（8）：1737-1740.

[17]李琦.小兒飲舒顆粒的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)， 2018.

[18]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（四部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社， 2015：104.

[19]李靜，余意，張小波，等.藥用枸杞本草考證[J].世界中醫(yī)藥，2019，14（10）：2593-2597.

[20]楊涵雨，袁以凱，付開聰.哈尼族藥食同源植物黃精的利用價(jià)值與栽培要點(diǎn)[C].//云南省科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)、中共楚雄州委、楚雄州人民政府.第八屆云南省科協(xié)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集——專題二：農(nóng)業(yè).云南省科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)、中共楚雄州委、楚雄州人民政府：云南省機(jī)械工程學(xué)會(huì)，2018：381-384.

[21]朱彩平.枸杞多糖的結(jié)構(gòu)分析及生物活性評(píng)價(jià)[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.

（收稿日期：2020-07-20 編輯：程鵬飛）

基金項(xiàng)目：國家自然基金項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：81760839;國家級(jí)大創(chuàng)項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：201810752004。

作者簡(jiǎn)介：王結(jié)鑫（1995-），女，漢族，碩士研究生在讀，研究方向?yàn)樘烊凰幬锱c中藥活性物質(zhì)研究及開發(fā)利用。E-mail：wangjiexin69@163.com

通信作者：張立明（1971-），漢族，碩士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)樘烊凰幬锏难芯?。E-mail： nyzlm@163.com