湯逸飛，黃 芳，陳欣慰，張國(guó)平

（嘉興市農(nóng)業(yè)綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心，浙江 嘉興 314050）

隨著鄉(xiāng)村旅游不斷開(kāi)發(fā)和發(fā)展，鮮食桑椹作為觀光采摘果桑園的項(xiàng)目，受到游客的喜愛(ài)。桑椹作為木本類植物桑樹(shù)結(jié)的果實(shí)，其主要病害為桑椹菌核?。ò坠。?，目前病害主要的防治方法是在花果期施用化學(xué)農(nóng)藥。然而，桑椹花果期僅約1個(gè)月，連續(xù)施藥給桑椹產(chǎn)生一定的質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而影響農(nóng)民的效益和桑椹觀光采摘游休閑產(chǎn)業(yè)發(fā)展。關(guān)于蘋(píng)果［1，2］、草莓［3，4］、葡萄［5］等水果已有相關(guān)的研究報(bào)道，而鮮食桑椹農(nóng)藥殘留膳食攝入分析還未見(jiàn)。本文通過(guò)檢測(cè)與評(píng)估，明確嘉興市果桑園桑椹中主要的農(nóng)藥殘留種類以及需重點(diǎn)關(guān)注的農(nóng)藥風(fēng)險(xiǎn)因子，為桑椹的安全生產(chǎn)、消費(fèi)以及質(zhì)量安全監(jiān)管提供一定的借鑒和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源

嘉興市果桑園開(kāi)園時(shí)間因桑椹成熟度而定，考慮到4月至5月為全年桑椹集中成熟上市時(shí)間，故本研究從4月10日開(kāi)始抽樣，5月17日結(jié)束，共85份樣品，其中79份樣品品種為“粵椹大十”（無(wú)籽），6份樣品品種為“臺(tái)灣四季果?！保ㄗ辖鹈凵＃?。每次采樣后將樣品去除花萼和果柄后進(jìn)行勻漿并貯存于低溫冰箱中以待處理。

1.2 儀器及試劑

檢測(cè)儀器：7890B/7000C氣相色譜/質(zhì)譜儀（美國(guó)Agilent公司）；LC-20AD/QTRAP4500液相色譜/質(zhì)譜儀（日本島津公司/美國(guó)AB Sciex公司）。

輔助設(shè)備：Scout SE-SE202F電子天平（美國(guó)OHAUS公司）；3205食品加工機(jī)（德國(guó)博朗公司）；ROTINA 420R離心機(jī)（德國(guó)Hettich公司）；XW-80A旋渦混合器（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

主要試劑：Wondapak QuEChERS提取鹽試劑包I和Wondapak QuEChERS凈化管II，由日本島津技邇公司提供；實(shí)驗(yàn)用水為超純水（電阻率為18.2 MΩ·cm）；乙腈、甲醇、丙酮、正己烷均為色譜級(jí)；有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

1.3 檢測(cè)參數(shù)及質(zhì)量控制

檢測(cè)參數(shù)為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部明令禁止或限制使用的高毒農(nóng)藥和本地生產(chǎn)中使用的共71種農(nóng)藥。農(nóng)藥殘留的方法回收率為70%～130%，檢出限范圍為≤1 ug/kg［6，7］。檢測(cè)結(jié)果參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)［8］判定農(nóng)藥殘留量是否超過(guò)限量，尚未制定桑椹或小漿果和其他小型桑椹的農(nóng)藥殘留限量規(guī)定的結(jié)果不判定。

1.4 農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法

根據(jù)江景勇［9］等將桑椹消費(fèi)人群從年齡段分成2～4歲幼兒、18～30歲青年、60～70歲老年人群三個(gè)組別，從性別分成男性和女性兩個(gè)組別。不同人群體質(zhì)量與膳食攝入量引用中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與健康指標(biāo)2002年數(shù)據(jù)。不同人群的體質(zhì)量、水果攝入量和大份攝入量調(diào)查結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同消費(fèi)者群體的平均體質(zhì)量和水果攝入量［9］Table 1 Average Body Mass and Fruit Intake of Different Consumer Groups

桑椹的急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)可用%ARfD表示，其計(jì)算公式［1-5，9］為：

式（1）中，ESTI—每日急性膳食攝入量，以不同人群日消耗桑椹大份餐所攝入的最大單種農(nóng)藥殘留量為依據(jù)，鑒于在果桑園桑椹可能是游客消費(fèi)的主要品種，為保護(hù)絕大多數(shù)人攝入安全的需要，此處的桑椹攝入量采用水果一天的大份攝入量計(jì)算，以mg/（kg·d）為單位；ARfD—?dú)埩艮r(nóng)藥的急性參考劑量，該數(shù)值引用世界衛(wèi)生組織（WHO）數(shù)據(jù)，以mg/kg為單位。式（2）中，Lp—桑椹每日消費(fèi)大份餐，采用水果一天的大份攝入量計(jì)算，以kg/d為單位；HR—桑椹樣品中檢出種類的最高農(nóng)藥殘留量，以mg/kg為單位，bw—不同人群平均質(zhì)量，以kg為單位。

桑椹的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)可用%ADI表示，其計(jì)算公式［1-5，9］為：

式（3）中，NEDI—估計(jì)每日平均攝入量，以不同人群日消耗平均攝入的平均單種農(nóng)藥殘留量為依據(jù)，鑒于在果桑園桑椹可能是游客消費(fèi)的主要品種，為保護(hù)絕大多數(shù)人攝入安全的需要，此處的桑椹攝入量采用水果一天的攝入量計(jì)算，以mg/（kg·d）為單位；ADI—?dú)埩艮r(nóng)藥的每日允許攝入量，該數(shù)值引用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)［8］，以mg/（kg·d）為單位。式（4）中，p——均桑椹的攝入量，此處的桑椹攝入量采用水果一天的攝入量計(jì)算，以kg為單位；R—桑椹樣品中檢測(cè)到種類的農(nóng)藥殘留平均值，以mg/kg為單位。

桑椹的慢性累積膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是將桑椹樣品中作用機(jī)制相似的農(nóng)藥分組進(jìn)行累積性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，桑椹的累積性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)可用累積%ADI表示，其計(jì)算公式［1-5，9］為：

式（5）中，AR—指示農(nóng)藥殘留的累積當(dāng)量濃度，以mg/kg為單位；ADI指示農(nóng)藥—指示農(nóng)藥殘留的每日允許攝入量，該數(shù)值引用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)［8］并進(jìn)行分組處理得到，以mg/（kg·d）為單位。式（6）中，Ci—i種農(nóng)藥殘留濃度，以mg/kg為單位；RPFi—i種農(nóng)藥殘留相對(duì)指示農(nóng)藥殘留的相對(duì)強(qiáng)度系數(shù)RPF值；式（7）中，BMD是指引用（美國(guó)）環(huán)境保護(hù)局測(cè)算該種農(nóng)藥乙酰膽堿酯酶活性差異不超過(guò)10%時(shí)的劑量［10］，BMD指示農(nóng)藥—指示農(nóng)藥BMD值，BMDi—i種農(nóng)藥BMD值。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藥殘留水平

嘉興目前桑椹中農(nóng)藥殘留檢出率較高，一定程度上證明了防治桑椹菌核病的需求是相當(dāng)大的。在85份桑椹樣品中，66份樣品確證檢出農(nóng)藥殘留，占77.65%，一些桑椹樣品雖然甲基硫菌靈殘留未檢測(cè)到，但其降解產(chǎn)物多菌靈痕量殘留依舊能在一段較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)檢測(cè)到；66份樣品共確證檢出12種農(nóng)藥殘留，其中1種農(nóng)藥殘留是中等毒性農(nóng)藥，沒(méi)有檢測(cè)到高毒農(nóng)藥殘留，在實(shí)地調(diào)查也發(fā)現(xiàn)一些果桑園最近幾年才翻墾新建，土壤中可能未降解的農(nóng)藥殘留被桑樹(shù)隨無(wú)機(jī)鹽、水分等物質(zhì)輸送而被吸收。檢出的12種農(nóng)藥殘留中，6種檢出率在5%以上，以甲基硫菌靈殘留和多菌靈殘留檢出率最高，分別為65.88%和62.35%，由于甲基硫菌靈是唯一登記用于桑樹(shù)的農(nóng)藥，故兩項(xiàng)檢出率高也屬正常現(xiàn)象。檢出農(nóng)藥殘留中僅有辛硫磷制定小漿果和其他小型水果（包括桑椹）的農(nóng)藥殘留限量（MRL）規(guī)定。沒(méi)有桑椹樣品在此階段檢測(cè)中有農(nóng)藥殘留超標(biāo)的現(xiàn)象（表2）。

嘉興市果桑園桑椹中農(nóng)藥多殘留現(xiàn)象普遍，如圖1所示，僅有22.35%的樣品農(nóng)藥殘留沒(méi)有檢出，49.41%的樣品有1～2種農(nóng)藥殘留檢出，24.71%的樣品有3～4種農(nóng)藥殘留檢出，3.53%的樣品有5種以上農(nóng)藥殘留檢出。單份樣品農(nóng)藥殘留檢出種類最高為6種。

2.2 急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

圖1 嘉興市果桑園桑椹樣品中農(nóng)藥殘留檢出種類數(shù)量及分布情況Figure 1 The Types,Number and Distribution of Pesticide Residues Detected from Samples of Mulberry Fruits in Mulberry Orchard of Jiaxing City

表2 桑椹中12種農(nóng)藥的殘留水平Table 2 Residue Levels of 12 Pesticides in Mulberry Fruits

世界衛(wèi)生組織認(rèn)為沒(méi)有必要（UNNECESSARY）設(shè)定甲基硫菌靈和嘧菌酯2種農(nóng)藥殘留的急性參考劑量，多效唑、辛硫磷和異菌脲3種農(nóng)藥殘留暫時(shí)未規(guī)定ARfD值，其余7種農(nóng)藥殘留的ARfD值及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果見(jiàn)表3［11］。不同人群通過(guò)食用桑椹攝入多菌靈殘留、吡唑醚菌酯殘留、腐霉利殘留、吡蟲(chóng)啉殘留、甲萘威殘留、毒死蜱殘留和蟲(chóng)螨腈殘留的急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)不同，其%ARfD值均低于100%，分別為32.19%～97.96%、0.06%～0.20%、1.79%～5.44%、0.27%～0.81%、0、0和0.01%～0.02%?？傮w而言，不同人群風(fēng)險(xiǎn)程度依次為2～4歲女孩＞2～4歲男孩＞18～30歲女性＞18～30歲男性＞60～70歲女性＞60～70歲男性。其中，60～70歲男性風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)數(shù)值較其他群體偏低，而2～4歲女孩風(fēng)險(xiǎn)最高，最高的多菌靈殘留要達(dá)到97.96%，但還處在安全范圍（100%）內(nèi)。在不同人群中，女性人群通過(guò)鮮食桑椹攝入農(nóng)藥的急性風(fēng)險(xiǎn)均高于男性人群。7種農(nóng)藥中，急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)大小順序?yàn)槎嗑`殘留＞腐霉利殘留＞吡蟲(chóng)啉殘留＞吡唑醚菌酯殘留＞蟲(chóng)螨腈殘留＞甲萘威殘留=毒死蜱殘留，多菌靈殘留在2～4歲幼兒群體中%ARfD值超過(guò)90%，需關(guān)注。

表3 嘉興市果桑園桑椹樣品中7種農(nóng)藥殘留對(duì)不同群體的急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)Table 3 Acute Dietary Intake Risk of 7 Pesticide Residues in Samples Mulberry Fruits from Mulberry Orchard in Jiaxing City

表4 嘉興市果桑園桑椹樣品中12種農(nóng)藥殘留對(duì)不同群體的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)Table 4 Chronic Dietary Intake Risk to Different Age Groups of 12 Pesticide Residues in Samples Mulberry Fruits from Mulberry Orchard in Jiaxing City

表5 3組農(nóng)藥各自對(duì)應(yīng)的BMD值、RPF值和累積%ADI值Table 5 Corresponding BMD，RPF and Cumulative%ADI of Three Groups of Pesticides

2.3 慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

桑椹中12種農(nóng)藥殘留%ADI值計(jì)算結(jié)果顯示（表4），不同人群通過(guò)食用桑椹攝入檢出的12種農(nóng)藥的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)不同，甲基硫菌靈、多菌靈、吡唑醚菌酯、腐霉利、嘧菌酯、多效唑、吡蟲(chóng)啉、甲萘威、辛硫磷、毒死蜱、蟲(chóng)螨腈和異菌脲12種農(nóng)藥殘留的%ADI在不同群體中分別為0.16%～0.96%、0.72%～4.34%、0.04%～0.21%、0.04%～0.22% 、0～0.01% 、0.09%～0.52%、0.05%～0.32%、0～0.01% 、0.41%～2.49%、0、0和0.04%～0.23%，數(shù)值均遠(yuǎn)小于100%，桑椹的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)處在可接受的安全水平。

2.4 慢性累積膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

將涉及慢性累積膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的農(nóng)藥殘留種類分成3組：第1組是農(nóng)藥化學(xué)結(jié)構(gòu)中均為氨基甲酸酯的甲基硫菌靈、多菌靈和甲萘威，以甲萘威作為該組的指示農(nóng)藥；第2組是農(nóng)藥化學(xué)結(jié)構(gòu)中均帶有磷原子的辛硫磷和毒死蜱，以毒死蜱作為該組的指示農(nóng)藥；第3組是農(nóng)藥化學(xué)結(jié)構(gòu)中均帶有氯原子的吡唑醚菌酯、腐霉利、多效唑、吡蟲(chóng)啉、蟲(chóng)螨腈和異菌脲，以多效唑作為該組的指示農(nóng)藥。計(jì)算結(jié)果顯示2～4歲男孩、2～4歲女孩、18～30歲男性、18～30歲女性、60～70歲男性和60～70歲女性群體的累積%ADI值分別為0.004%～10.59%、0.005%～11.33%、0.001%～2.36%、0.001%～3.44%、0.001%～1.88%和0.001%～2.19%，均遠(yuǎn)小于100%，說(shuō)明桑椹中農(nóng)藥殘留慢性累積膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)較低（表5）。

3 結(jié)論

本研究測(cè)定嘉興市果桑園85份桑椹樣品中71種農(nóng)藥殘留，共檢出12種農(nóng)藥殘留。桑椹農(nóng)藥殘留膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果均處于可控水平。甲基硫菌靈、多菌靈、吡唑醚菌酯、腐霉利、嘧菌酯、多效唑、吡蟲(chóng)啉、甲萘威、毒死蜱、蟲(chóng)螨腈和異菌脲11種農(nóng)藥殘留尚未制定MRL值，占農(nóng)藥殘留種類的91.67%。吡蟲(chóng)啉、甲萘威、辛硫磷、毒死蜱和蟲(chóng)螨腈5種殺蟲(chóng)劑農(nóng)藥殘留的來(lái)源尚不明確。吡唑醚菌酯、腐霉利、嘧菌酯、多效唑和異菌脲5種殺菌劑農(nóng)藥的使用還均未在果桑上登記。目前在作為桑椹菌核病的特效藥而推薦使用的甲基硫菌靈易降解成多菌靈，其降解產(chǎn)物殘留在2～4歲幼兒群體中%ARfD值超過(guò)90%，可能對(duì)嬰幼兒存在安全隱患。桑椹的花果期與噴灑農(nóng)藥間隔時(shí)間較短，目前對(duì)在桑椹上的甲基硫菌靈殘留進(jìn)行動(dòng)態(tài)消解規(guī)律的試驗(yàn)報(bào)道較少，因此很有必要對(duì)噴施甲基硫菌靈后的采摘時(shí)間進(jìn)行研究和規(guī)范，以保證一定的安全間隔期。