鄧小杰, 范兆卓, 顏欣超, 任清長, 胡忠澤
(安徽科技學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,安徽 鳳陽 233100)
姜黃(CurcumalongaL.)屬姜科姜黃屬植物,原產(chǎn)于熱帶、亞熱帶地區(qū),根莖可做藥用[1]。姜黃素(curcumin)是姜黃中的一種天然多酚,由姜黃根莖中提取,含有二氟甲烷核心,有天然的抗癌作用[2]。因其藥理學(xué)功能廣泛,價(jià)格便宜,容易獲得,且對人體的毒副作用小,深受國內(nèi)外研究學(xué)者的青睞[3]。藥理學(xué)中,姜黃素多用于治療疾病和抗癌藥物的研發(fā)。Khan等[4]研究發(fā)現(xiàn),將姜黃素制成納米顆??稍黾蛹?xì)胞對姜黃素的吸收,增強(qiáng)其抗癌作用。Zhao等[5]研究得出,姜黃素可降低蛋白尿和腎臟炎癥,具有治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的潛在價(jià)值。動(dòng)物生產(chǎn)中,對姜黃素的研究尚屬初期[6]。姜黃素亦具有改善動(dòng)物肉品質(zhì)[7]、促進(jìn)生長[8]、增強(qiáng)免疫力[9]、緩解應(yīng)激等多種功能。為了更加深入的了解姜黃素的作用機(jī)理,解析其對機(jī)體血液生化指標(biāo)的影響顯得尤為重要。目前,關(guān)于姜黃素對家禽血清生化指標(biāo)和酶活性的影響鮮有報(bào)道,由此,本試驗(yàn)以AA肉雞為研究對象,在日糧中添加一定量姜黃素,探討姜黃素對肉雞部分血清生化指標(biāo)的影響,以豐富姜黃素的生物學(xué)功能,為姜黃素在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論支撐。
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 健康的1日齡AA肉雞225只,購于江蘇新沂遠(yuǎn)大畜禽有限公司。
1.1.2 試驗(yàn)試劑 姜黃素(AR,上海三愛思試劑有限公司);金霉素(10%,內(nèi)蒙古金河獸藥廠);乳酸脫氫酶(LDH),谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),脂肪酶(LPS),葡萄糖(GLU),尿素氮(BUN),尿酸(UA)測定試劑盒購于南京建成生物工程研究所。
1.2.1 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)雞采用厚墊料地面平養(yǎng),自由飲水、采食,舍內(nèi)溫度在1日齡時(shí)為35 ℃,第2周開始每周降低2~3 ℃,最后控制在23±1 ℃,濕度50%~55%,24 h光照,免疫及消毒按肉雞常規(guī)飼養(yǎng)方法進(jìn)行。
1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將225只健康1日齡AA肉雞隨機(jī)分成對照組Ⅰ和試驗(yàn)組Ⅱ、Ⅲ,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)15只,Ⅰ組飼喂基礎(chǔ)日糧,Ⅱ組飼喂基礎(chǔ)日糧與一定量的金霉素(10%),Ⅲ組飼喂基礎(chǔ)日糧與一定量的姜黃素(表1)。
表1 試驗(yàn)分組設(shè)計(jì)
試驗(yàn)根據(jù)國家肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合本地情況設(shè)計(jì)基礎(chǔ)日糧。基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。
表2 實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成與營養(yǎng)水平
注:1.每kg飼料含:VA 54 000 IU, VB1 2 mg, VB2 15 mg, VB1 230 mg, VD3 10 800 IU, VE 1.5 IU, VK3 5 mg,VB3 30 mg, VBc 500 mg, D-泛酸鈣25 mg。
2.每千克飼料含: Fe 3 000 mg, Cu 1 000 mg, Zn 3 400 mg, Mn 13 400 mg, Se 152 mg, I 132 mg。
1.3.1 血清采集 分別于3、6周齡清晨6點(diǎn)(已禁食12 h),每個(gè)重復(fù)取2只(1公1母),進(jìn)行心臟采血,于4 ℃冰箱中靜置,析出血清,離心后等分成3份,冷凍保存待測。
1.3.2 血清酶活性測定 乳酸脫氫酶(LDH)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、脂肪酶(LPS),均采用試劑盒測定,操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。
1.3.3 血清生化指標(biāo)測定 葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA),測定方法同上。
用Excel 2007處理試驗(yàn)原始數(shù)據(jù),使用SPSS 22.0分析軟件進(jìn)行單因素方差分析,并用Duncan's法進(jìn)行多重比較,數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
由表3得知,3周齡時(shí),與Ⅰ組相比,Ⅲ組血清LDH活力降低了26.92%(P<0.05),Ⅱ組差異不顯著(P>0.05);Ⅱ、Ⅲ組血清ALT活力分別降低了8.25%和7.24%(P<0.05),AST活力分別降低了5.06%和4.56%(P<0.01),LPS活力分別降低了21.73%和27.98%(P<0.01)。Ⅱ、Ⅲ兩組比較,Ⅲ組血清LDH活性低于Ⅱ組(P<0.0 5),ALT、AST、LPS活性兩組差異均不顯著(P>0.05)。
表3 姜黃素對3周齡肉雞血清酶活性的影響
注:同行數(shù)字上標(biāo)字母相鄰表示差異顯著(P<0.05),字母非相鄰為差異極顯著(P<0.01),字母相同為差異不顯著(P>0.05)。下同。
由表4可知,6周齡時(shí),與Ⅰ組相比,Ⅱ、Ⅲ血清組LDH活力分別降低了17.06%和39.00%(P<0.05);3組血清ALT活力差異均不顯著(P>0.05);AST活性分別降低了2.48%和2.98%(P<0.01);LPS活性Ⅱ組比Ⅰ組升高了2.45倍(P<0.01),Ⅲ組比Ⅰ組升高了1.40倍(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ兩組比較,Ⅲ組血清LDH和LPS活性顯著低于Ⅱ組(P<0.05);ALT和AST活性兩組差異不顯著(P>0.05)。
表4 姜黃素對6周齡肉雞血清酶活性的影響
由表5可知,3和6周齡時(shí),血清GLU含量3組差異均不顯著(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ組血清UA和BUN含量均顯著低于Ⅰ組(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ兩組比較,4種生化指標(biāo)含量差異均不顯著(P>0.05)。
表5 姜黃素對肉雞血清生化指標(biāo)的影響
LDH是機(jī)體無氧代謝的重要參與者,動(dòng)物在應(yīng)激和患病狀態(tài)下血清活性會(huì)明顯升高[10]。本試驗(yàn)中,3和6周齡時(shí),姜黃素組血清LDH活性比對照組分別降低了26.92%(P<0.05)和39.00%(P<0.01),說明姜黃素對肉雞血清LDH活性有抑制作用,且隨著日齡的增長抑制作用更加明顯。血清ALT和AST水平可作為肝臟是否受損的重要指標(biāo),其水平升高時(shí),表示肝臟可能受損[11]。曹麗萍等[12]發(fā)現(xiàn),用姜黃素(5.0 g/kg)飼喂患急性肝損傷的建鯉,可顯著性抑制血清ALT和AST的活性,說明姜黃素具有保肝作用。本試驗(yàn)以250 mg/kg劑量的姜黃素飼喂AA肉雞得到同樣的結(jié)果,說明姜黃素對肉雞的保肝作用更加顯著。LPS由胰腺合成,參與脂肪代謝中甘油三脂(TG)的分解[13]。Feng等[14]研究表明,姜黃素和小檗堿聯(lián)合治療非酒精性脂肪肝(NAFLD)的療效優(yōu)于洛伐他汀,其增強(qiáng)作用與脂肪代謝有關(guān)。本試驗(yàn)中,3周齡時(shí)姜黃素組血清LPS活性比對照組降低了27.98%(P<0.01),6周齡時(shí)含量有所上升,但差異不顯著(P>0.05),其原因可能與脂肪沉積主要發(fā)生在體成熟之后有關(guān),但從本試驗(yàn)結(jié)果仍可看出姜黃素對肉雞的脂肪代謝有一定影響。
GLU是機(jī)體主要的能源物質(zhì),血清GLU水平可反映機(jī)體對碳水化合物的吸收程度和營養(yǎng)水平[15]。余嘉瑤等[16]試驗(yàn)得出,日糧中添加姜黃素能有效促進(jìn)二糖消化和葡萄糖吸收。本試驗(yàn)中,與對照組相比,姜黃素組血清GLU水平在3和6周齡均無顯著性差異(P>0.05),提示姜黃素對機(jī)體糖代謝無顯著性影響。BUN是蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物,其濃度常作為體內(nèi)氮資源高效利用的指標(biāo)[17]。Coma等[18]研究指出,當(dāng)血清BUN水平降低時(shí),表明機(jī)體氨基酸平衡良好。本實(shí)驗(yàn)中,在第3和6周齡時(shí),姜黃素組血清BUN濃度均顯著低于對照組(P<0.05),說明姜黃素能夠促進(jìn)肉雞對氮的沉積,提高蛋白質(zhì)的利用率。UA由肝臟產(chǎn)生,并由腎臟分泌,血清中含量過高則會(huì)引起動(dòng)物痛風(fēng)和代謝性疾病[19]。本試驗(yàn)中,姜黃素組血清UA濃度在3和6周齡均顯著低于對照組,說明姜黃素具有降低肉雞血清UA 水平的功能。