●孫青松 馬超凡 王 佟 常昭宇 林自涵 李沐森

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動物科技學(xué)院 吉林 吉林 132109）

棕熊亦稱灰熊，是陸地上食肉目體形最大的哺乳動物之一，頭大而圓，體形健碩，肩背隆起。棕熊屬環(huán)北極分布的喜寒冷動物，主要棲息在寒溫帶針葉林中，在高山草甸也能生活[1]。我國許多動物園都馴養(yǎng)有棕熊，由于圈養(yǎng)條件改變了棕熊的生活環(huán)境，致使棕熊不同程度患有棕熊圓線蟲、棕熊蛔蟲、棕熊蟯蟲和棕熊球蟲等常見的寄生蟲病，對棕熊的健康造成很大危害。輕者可使棕熊消化不良，消瘦，貧血，重者破壞其腸道，引起出血、水腫，更嚴(yán)重者會造成機(jī)體細(xì)胞的破壞。如蛔蟲可破壞棕熊的腸道上皮細(xì)胞，引起出血性腸炎，也可以引起蛔蟲性肺炎；蟯蟲不斷刺激棕熊的肝臟和膽管，會引起棕熊膽管炎、膽囊炎甚至肝硬化。為了更好地保護(hù)棕熊，本研究對吉林市江南公園內(nèi)的棕熊進(jìn)行了寄生蟲感染狀況調(diào)查，旨在研究棕熊的寄生蟲流行情況及制定科學(xué)的寄生蟲防治措施，使棕熊健康生活，改善公園內(nèi)棕熊的生活福利。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗器械 玻璃燒杯、玻璃試管、試管夾、試管架、玻璃棒、膠頭滴管、火柴、酒精燈、載玻片、蓋玻片、鑷子、離心機(jī)、光學(xué)顯微鏡、錦綸篩兜、40 目金屬篩、60 目金屬篩。

1.1.2 試驗試劑 10%的氫氧化鈉溶液、飽和蔗糖溶液、50%的甘油水溶液、煤油。

1.1.3 樣本采集 根據(jù)吉林市江南公園棕熊的生活環(huán)境特點，在2019 年7～10 月，每個月采集4 份糞便，每份大約500g，編號后裝入自封袋中，共計16份，并收集棕熊當(dāng)日脫落的體表皮屑和毛發(fā)放入冰箱中待檢。

1.2 檢查方法

1.2.1 消化道寄生蟲檢查

1.2.1.1 直接涂片檢查法。于載玻片上將少量棕熊糞便與1～2 滴鹽水混勻，涂布成透過其能看到紙上字跡的薄層。用玻璃片搗碎大的雜質(zhì)顆粒后蓋上蓋玻片，分別用10 倍和40 倍物鏡檢查。

1.2.1.2 飽和蔗糖溶液漂浮法。取棕熊糞便20～30g，置于200～300mL的燒杯中，先加入少量飽和蔗糖溶液（5～10mL），用玻璃棒搗成漿糊狀，然后加入200～250mL的飽和蔗糖溶液，攪拌均勻，通過40～60目銅篩過濾，濾液收集于燒杯中，靜置15～30min。再用鐵絲圈蘸取液體表膜，落在載玻片上，蓋上蓋玻片，進(jìn)行鏡檢。

1.2.1.3 離心沉淀法。取棕熊糞便 20～30g，置于200～300mL的燒杯中，先加少量自來水（5～10mL），用玻璃棒搗成糊狀，然后加入清水200～250mL，攪拌均勻，通過40～60 目銅篩過濾，濾液用燒杯收集，然后分裝于離心管中，用天平配平后放入離心機(jī)中離心，轉(zhuǎn)速為 2 000～3 000r/min，時間為 1～3min，取出后倒出上清，沉淀物加清水?dāng)嚢?，再離心，反復(fù)操作至上清液透明為止，最后倒去上清液，留取兩倍沉淀量溶液，吹打混勻后吸取糞液鏡檢。

1.2.1.4 錦綸篩兜淘洗法。取棕熊糞便20～30g，加水?dāng)嚢杈鶆?，先?jīng)糞篩濾去粗渣，將濾液倒在網(wǎng)兜里淘洗，瀝干，除去色素及其他雜質(zhì)，取兜內(nèi)容物鏡檢。

1.2.2 蟲卵計數(shù) 利用麥克馬斯特氏法進(jìn)行計數(shù)，將 4g棕熊糞便與 56mL漂浮液混合，使體積達(dá)60mL，充分?jǐn)嚢?，用紗布或糞篩過濾，用膠頭滴管吸取混合液，立即注滿麥克馬斯特計數(shù)板的每個計數(shù)室，靜置計數(shù)板至少5min，完成漂浮過程，開始對兩個計數(shù)室里的蟲卵計數(shù)，將兩個計數(shù)室蟲卵數(shù)之和乘以200，再除以4，即得每克糞便中的蟲卵數(shù)（EPG)。

1.2.3 體表寄生蟲檢查

1.2.3.1 煤油浸泡法。用鑷子取少量的棕熊皮屑置于載玻片上，滴幾滴煤油于載玻片上，在其上加蓋另一片載玻片，用手搓動兩片載玻片，互相擠壓和摩擦，使皮屑破碎，置于低倍光學(xué)顯微鏡下觀察[2]。

1.2.3.2 皮屑溶解法。取少量的棕熊皮屑或毛發(fā)加入到玻璃試管中，再向玻璃試管中加入適量10%的氫氧化鈉溶液，然后放置于酒精燈火焰上加熱溶解，一邊加熱一邊呈“8”字形勻速晃動玻璃試管，等待皮屑溶解，之后棄去上清液，用膠頭滴管吸取少量沉淀物滴于載玻片上，蓋上蓋玻片后放置于光學(xué)顯微鏡下，用低倍鏡檢查是否有螨蟲或者蟲卵[3]。

2 試驗結(jié)果

2.1 寄生蟲蟲卵及形態(tài)特征

在低倍鏡下觀察到的寄生蟲蟲卵及形態(tài)特征，見圖1。

圖1 錦綸篩兜淘洗法檢出的棕熊糞便中的寄生蟲卵

2.2 結(jié)果分析

檢查結(jié)果表明，江南公園內(nèi)圈養(yǎng)的棕熊均感染了寄生蟲病，以線蟲為主。糞樣中的線蟲卵有3 種，球蟲卵囊1 種，感染情況見表1；寄生蟲總感染率及感染強(qiáng)度見表2。

本試驗從江南公園的棕熊體內(nèi)共檢出4 種寄生蟲，分別為棕熊圓線蟲、棕熊蟯蟲、棕熊蛔蟲和棕熊球蟲。棕熊圓線蟲的感染率為50%，感染強(qiáng)度為500 枚/g；棕熊蟯蟲感染率為31.25%，感染強(qiáng)度為300 枚/g；棕熊蛔蟲的感染率為25%，感染強(qiáng)度為250 枚/g；棕熊球蟲的感染率18.75%，感染強(qiáng)度為180 枚/g。無體表寄生蟲寄生。

表1 江南公園棕熊寄生蟲感染情況調(diào)查

表2 棕熊糞檢寄生蟲總感染情況

3 分析與討論

通過對棕熊糞便進(jìn)行直接涂片法、飽和蔗糖溶液漂浮法、離心沉淀法及錦綸篩兜淘洗法檢查，以及對棕熊皮屑采用皮屑溶解法、煤油浸泡法等方法檢查，結(jié)果表明江南公園的棕熊分別感染了棕熊圓線蟲、棕熊蛔蟲、棕熊蟯蟲和棕熊球蟲寄生蟲病，其中以棕熊圓線蟲感染最為嚴(yán)重，棕熊蟯蟲和棕熊蛔蟲次之。因為棕熊糞便是在地面上采集的，采集時有的可能已被污染，所以寄生蟲卵不一定全是棕熊體內(nèi)排出的。棕熊舍內(nèi)地面有一定的土壤，為土源性寄生蟲的繁殖提供了條件，江南公園每年春、秋兩季都會對圈養(yǎng)的棕熊進(jìn)行1 次驅(qū)蟲，但依舊有寄生蟲感染，建議公園管理人員加強(qiáng)對棕熊的飼養(yǎng)管理，并加大驅(qū)蟲力度，根據(jù)棕熊感染的寄生蟲種類聯(lián)合用藥。

3.1 治療方案

3.1.1 棕熊圓線蟲 用丙硫咪唑治療，用5mg/kgBW的劑量拌料飼喂。

3.1.2 棕熊蛔蟲 可用左旋咪唑，每千克體重口服1 片，每晚服 1 次，連續(xù)服用 2 次。

3.1.3 棕熊蟯蟲 可用腸蟲清（阿苯達(dá)唑），成年棕熊每天每頭用400mg的劑量拌料飼喂，連用6d。

3.1.4 棕熊球蟲 可用氨丙啉按 10～15mg/kgBW劑量拌料飼喂，連用4～5d為1 個療程。

3.2 預(yù)防措施

春秋兩季定期對棕熊進(jìn)行驅(qū)蟲；做好食品衛(wèi)生檢驗；提高棕熊的飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生；加強(qiáng)飼養(yǎng)管理；公園管理人員應(yīng)禁止游客擅自投喂棕熊。