孟 薇

（阜新市檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證中心，遼寧 阜新 123000）

高效液相色譜法最早源于20世紀(jì)60年代，其被廣泛應(yīng)用于石油化工、環(huán)保、醫(yī)藥及生命科學(xué)領(lǐng)域中，并于藥品檢驗(yàn)中取得一定成效。1985年，我國在藥品檢驗(yàn)中滲入了高效液相色譜法，其被視為藥品質(zhì)量控制主要方法[1]。高效液相色譜法進(jìn)一步下細(xì)化了經(jīng)典液相色譜法，具有應(yīng)用效果明顯、效率高等特點(diǎn)。相比于經(jīng)典液相色譜法，其應(yīng)用了顆粒較小的均勻規(guī)則的固定相，具有較高的分離效率及較小的傳質(zhì)阻抗[2]。與此同時(shí)，高效液相色譜法輸送流動(dòng)相應(yīng)用了高壓輸送泵，其有助于縮短時(shí)間，同時(shí)合理應(yīng)用較高靈敏度的檢測(cè)器，靈敏度高，同時(shí)業(yè)務(wù)發(fā)展高效液相色譜法奠定了基礎(chǔ)。

1 簡析高效液相色譜法

高效液相色譜法又被稱為高壓液相色譜、高分離度液相色譜和高速液相色譜及近代柱色譜。高效液相色譜法是現(xiàn)階段使用范圍較廣、應(yīng)用效果高且檢測(cè)速度快的一種藥品檢測(cè)、分析方法[3]。其除了可以分離分析藥物成分，與此同時(shí)，可定性定量分析藥物，所以，相比于單一的分析方法，其優(yōu)點(diǎn)顯著，在我國藥品檢測(cè)中具有顯著作用。但是現(xiàn)階段，由于中藥成分等因素的作用，致使重要有效成分的研究已經(jīng)成為重點(diǎn)。而高效液相色譜法能夠?yàn)橹兴幱行С煞謫栴}解決提供新的方法與思路，從而推動(dòng)我國醫(yī)療視野進(jìn)一步發(fā)展?；诖?，本文針對(duì)高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用、原理與特點(diǎn)等進(jìn)行了簡單分析。

2 分析高效液相色譜法原理、特點(diǎn)

高效液相色譜法的流動(dòng)相為液體，而高壓輸液系統(tǒng)是色譜中相對(duì)重要的一個(gè)分支。該方法利用高壓輸液泵，混合不同比例或不同集性的溶劑，將所制流動(dòng)相泵入到存在固定項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)色譜柱中，利用樣閥注將檢測(cè)樣品注入其中，通過流動(dòng)相向柱內(nèi)流通，柱內(nèi)液體分離充分后，逐步向檢測(cè)器內(nèi)滲入并進(jìn)行有效監(jiān)測(cè)，以此達(dá)到試樣化學(xué)分析[4]。從原理角度分析，從本質(zhì)上來講，兩種檢測(cè)方法并未見顯著差異，其通過高效微粒固定相、高靈敏度檢測(cè)器和新型高壓輸液泵進(jìn)行，充分發(fā)揮經(jīng)典液相色譜法優(yōu)勢(shì)?，F(xiàn)階段，高效液相色譜法應(yīng)用過程中使用了高效色譜填料及小口徑柱，通過高壓輸液泵加快溶劑流通速度，在短時(shí)間內(nèi)通過色譜柱[5]。因?yàn)楦咝б合嗌V法利用具有較高工作效率的高壓輸液泵，所以其可以快速檢測(cè)藥物成分，并利用色譜柱實(shí)施分離，從一定程度上，使分離效果及檢測(cè)速度提高。相比于經(jīng)典柱色譜法，其分離速度更快，有些甚至高達(dá)1000倍，所以，高效液相色譜法特點(diǎn)主要包括四點(diǎn)，即高靈敏、高壓、高效及高速，所以，臨床應(yīng)用過程中，高效液相色譜法使用范圍越來越廣[6]。

3 分析藥品含量檢測(cè)中高效液相色譜法的應(yīng)用

3.1 藥品含量檢測(cè)中高效液相色譜法的應(yīng)用：實(shí)驗(yàn)原料中每種雜質(zhì)及每種成分含量檢測(cè)過程中，均可以通過高效液相色譜法進(jìn)行，其能夠在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，而且具有較高的準(zhǔn)確性和可靠性[7]。如檢測(cè)吡羅昔康含量期間，因?yàn)樵撍幬锸浅Ｒ婖０奉惢衔镏唬瑯O易被水解、氧化，致使水溶液化學(xué)穩(wěn)定性較差，因此，可通過高效液相色譜法實(shí)施檢測(cè)。實(shí)際操作期間，將0.01 mol/L的鹽酸甲醇溶液視為容積，不僅有助于容積溶解性提高，同時(shí)也可促進(jìn)吡羅昔康溶液穩(wěn)定性提高，確保良好的檢測(cè)結(jié)果。檢測(cè)四環(huán)素類藥物過程中，利用高效液相色譜法可分離檢測(cè)四環(huán)素類康立體異構(gòu)體和自身；檢測(cè)螺旋霉素發(fā)酵溶液中機(jī)酸含量過程中，可通過高效液相色譜法對(duì)機(jī)酸類型進(jìn)行檢測(cè)，以便對(duì)螺旋霉素代謝機(jī)制進(jìn)行分析；鹽酸萘甲唑啉是鹽酸萘甲唑啉鼻用劑型凝膠主要成分，通過高效液相色譜法檢測(cè)，通過乙腈有效析出凝膠基質(zhì)中的高分子物質(zhì)，以便將高分子物質(zhì)堵塞液相柱問題解決，避免對(duì)檢測(cè)進(jìn)行干擾。由上述內(nèi)容分析，通過高效液相色譜法抽樣檢查藥品，能夠?qū)υ幤分械碾s質(zhì)、成分、中間體含量準(zhǔn)確檢查，避免流通假冒偽劣產(chǎn)品，進(jìn)而達(dá)到用藥品安全性及質(zhì)量的提高的目的[8]。

3.2 相關(guān)物質(zhì)檢測(cè)中高效液相色譜法的應(yīng)用：藥品運(yùn)輸、制備、儲(chǔ)藏、使用期間均可能形成相物質(zhì)，從一定程度上影響了藥品安全及質(zhì)量，如制備藥品過程中，可能有中間體、副產(chǎn)物及異構(gòu)體帶入；運(yùn)輸藥瓶過程中，極易形成降解物、聚合物等。基于此，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)藥品影響穩(wěn)定性因素進(jìn)行分析，并控制具有較大毒性物質(zhì)。因?yàn)榫哂休^小的有關(guān)物質(zhì)含量，因此，常規(guī)檢查的檢查結(jié)果準(zhǔn)確性將會(huì)受到影響。如監(jiān)測(cè)鹽酸特拉唑嗪片中相關(guān)物質(zhì)期間，通過常規(guī)檢測(cè)法薄層色譜法對(duì)鹽酸特拉唑嗪進(jìn)行檢測(cè)，其檢出限是0.025 mg/mL，具有較低的檢測(cè)靈敏度。但是，通過高效液相色譜法檢測(cè)，最小檢出限準(zhǔn)確度可達(dá)到0.05 μg/mL?？梢姡咝б合嗌V法有助于相關(guān)物質(zhì)監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確性及靈敏度提高。

3.3 藥物鑒別中高效液相色譜法的應(yīng)用：每種藥物的藥用價(jià)值存在差異，因此需要將藥物鑒別工作做好，以便每種藥物充分發(fā)揮自身作用。通過高效液相色譜法對(duì)藥物鑒別診斷，將藥物性質(zhì)、保留時(shí)間及組分結(jié)構(gòu)保留下來，并將其視為藥物定性參數(shù)[9]。如鑒別南北五味子過程中，利用該方法可有效監(jiān)測(cè)五味子中組分含量，通過C18柱，合理配置流動(dòng)相比例，即65∶35，合理控制流速，以1.0 mL/min速度進(jìn)行，設(shè)置波長為250 nm，可將南北五味子組分含量準(zhǔn)確、快速鑒別。由上述分析，藥物鑒別中，高效液相色譜法可為藥物鑒別提供新的方法及思路。

3.4 抗生素藥品檢驗(yàn)中高效液相色譜法的應(yīng)用：抗生素類藥品臨床使用過程中，患者極易產(chǎn)生不良反應(yīng)，而這一想象誘發(fā)因素有有很多，包括聚合物、中間體及降解產(chǎn)物等雜志，因此，必須合理控制抗生素類藥物中的每種雜志量。如定量分析氨芐西林丙磺舒分散片中雜質(zhì)過程中，通過高效液相色譜法檢測(cè)，可于短期內(nèi)分離降解產(chǎn)物、藥品主要成分及相關(guān)物質(zhì)，從而更好的控制制劑限度。通過上述內(nèi)容分析，檢驗(yàn)抗生素藥品過程中，通過高效液相色譜法可對(duì)藥品中雜質(zhì)含量有效控制，以此促進(jìn)抗生素藥物作用效果。

3.5 中藥質(zhì)量檢測(cè)過程中高效液相色譜法的應(yīng)用：中藥組成相對(duì)復(fù)雜，而且具有較大的質(zhì)量檢測(cè)難度，常規(guī)監(jiān)測(cè)方法準(zhǔn)確檢測(cè)率偏低，通過高效液相色譜法可能將中藥分離難度大、中藥成分問題解決，其被視為中藥有效成分含量檢測(cè)的主要方法。高效液相色譜法可于短期內(nèi)對(duì)待檢測(cè)中藥實(shí)施分離，將藥物及其雜質(zhì)分離出，以便更好的檢測(cè)、鑒別中藥成分、含量，檢查中藥質(zhì)量。如檢測(cè)丹岑滴丸中黃芩苷及隱丹參酮過程中，通過高效液相色譜法，可獲取準(zhǔn)確定量結(jié)果及分離度，彌補(bǔ)不足。所以，檢測(cè)中藥質(zhì)量過程中，高效液相色譜法的應(yīng)用，其可以有效改變常規(guī)檢驗(yàn)方法，改變常規(guī)摸、看、嘗、聞等鑒別中藥方法，定量控制中藥有效成分，使中藥質(zhì)量檢測(cè)發(fā)展至規(guī)范化、現(xiàn)代化和標(biāo)準(zhǔn)化方向。

3.6 手性藥物質(zhì)量檢測(cè)中高效液相色譜法的應(yīng)用：每種手性藥物于機(jī)體內(nèi)的作用存在差異，包括兩種，即高效低毒和可能伴有毒害作用。手性制藥原理以化合物原理為主，以此制定作用效果明顯、藥物專一性高、不良反應(yīng)小的藥物。通常情況下，手性化合物獲取方法包括不對(duì)稱合成、天然無的提取、外消旋體拆分和生物合成等[10]?，F(xiàn)階段，色譜分離方法是常見手性藥物分析之一，其包括超臨界流體色譜、高效液相色譜和高效毛細(xì)血管電泳色譜等，在手性藥物拆分中具有重要作用。目前，高效液相色譜法被視為手性物質(zhì)拆分的主要方法，針對(duì)醫(yī)務(wù)人員加強(qiáng)對(duì)了該部分內(nèi)容的研究，其能夠?qū)χT多手性藥物實(shí)施分離?？偠灾?，手性新藥研究、手性藥物代謝及質(zhì)量控制過程中，高效液相色譜法應(yīng)用價(jià)值較高，應(yīng)用及發(fā)展前景廣泛。

3.7 藥物有效成分檢出中高效液相色譜法的應(yīng)用：每一種新型藥品上市前，均需要進(jìn)行嚴(yán)格檢測(cè)，對(duì)其有效成分含量密切監(jiān)測(cè)，在有效成分符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)后，方可上市使用和銷售。高效液相色譜法能夠?qū)λ幤方M成成分有效準(zhǔn)確判別，該方法具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，避免藥物中附加劑干擾檢測(cè)結(jié)果。如檢測(cè)鳳尾茶中黃酮含量過程中，通過高效液相色譜技術(shù)，可有效檢測(cè)含量，檢測(cè)方法方便、簡單。測(cè)定結(jié)果相對(duì)平穩(wěn)，出口鳳尾茶期間，通過該技術(shù)檢測(cè)，有助于推動(dòng)我國藥物出口進(jìn)一步發(fā)展。據(jù)有關(guān)資料顯示，通過高效液相色譜法可以檢測(cè)不同地區(qū)、不同成熟度的黃芪藥材成分，從而比較不同時(shí)期黃芪藥物效果，與此同時(shí)，可以將質(zhì)量較好的黃芪反映出來。換言之，通過高效液相色譜法有助于更好的開展藥物檢測(cè)。

3.8 非添加化學(xué)成分檢驗(yàn)中高效液相色譜法的應(yīng)用：因?yàn)槲覈┠陙硎袌?chǎng)競爭日益強(qiáng)烈，保健品、中成藥中通過非法方式添加化學(xué)成分已經(jīng)成為制假的一種方法。所以，檢測(cè)藥品中非化學(xué)成分過程中，藥品檢驗(yàn)也是一種新的方法。高效液相色譜法在藥品非化學(xué)成分檢驗(yàn)過程中具有一定功效。檢測(cè)藥品成分過程中，薄層色譜法檢測(cè)相對(duì)復(fù)雜的重要期間，誤差率較高，而且專屬性有待進(jìn)一步提高。而且高效液相色譜法具有較高的分析能力與分離功能，其可于短時(shí)間定量檢查、分離定性藥物成分，從而確保藥物質(zhì)量，保證良好的用藥效果。

4 結(jié)束語

在我國社會(huì)經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展的背景下，國藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展速度越愛越快，藥物質(zhì)量深受社會(huì)人群及醫(yī)學(xué)人員的關(guān)注，藥物檢測(cè)被視為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)管理的重點(diǎn)，首選，需要將藥物質(zhì)量關(guān)卡工作做好，以此保證我國醫(yī)療行業(yè)平穩(wěn)、持續(xù)發(fā)展。高效液相色譜法不僅具有快捷、高效、方便等特點(diǎn)，在儀器自動(dòng)化水平方面，同樣具有顯著優(yōu)點(diǎn)。除此之外，高效液相色譜法可有效檢測(cè)藥品含量、成分、非法添加化學(xué)成分及有關(guān)物質(zhì)等。為了進(jìn)一步提升我國藥品工作質(zhì)量，因此需要加強(qiáng)對(duì)檢測(cè)技術(shù)使用、開發(fā)的關(guān)注，以便更好的發(fā)展健康事業(yè)，推動(dòng)我國進(jìn)一步發(fā)展。