侯川川，馬蓮香，邱家凌，魯鑫濤，祝家明，周 琴，劉 兵，吳阿團(tuán)，余東游*

（1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310058；2.湖州市畜牧獸醫(yī)局，浙江湖州 330500）

隨著社會(huì)進(jìn)步和消費(fèi)意識(shí)轉(zhuǎn)變，人們對(duì)膳食結(jié)構(gòu)的要求越來(lái)越高。羊肉具有高蛋白、低脂肪、低膽固醇等特性，營(yíng)養(yǎng)豐富，而且具有良好的口感和風(fēng)味，其需求量逐年增加[1]。但與養(yǎng)羊業(yè)發(fā)達(dá)的國(guó)家相比，我國(guó)在羊肉品質(zhì)方面還存在很大的提升空間。羊肉中脂肪酸組成是肉品質(zhì)的主要影響因素，因此研究羔羊脂肪酸的沉積對(duì)提高肉品質(zhì)具有重要意義[2]。湖羊肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美、膻味少，具有理想的產(chǎn)肉性能，已逐步成為我國(guó)南方發(fā)展肉羊產(chǎn)業(yè)的首選綿羊品種[3]。但目前為止，有關(guān)不同飼糧類型對(duì)湖羊肌肉中脂肪酸和氨基酸組成影響的研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)通過(guò)比較不同飼糧類型對(duì)湖羊肌肉脂肪酸和氨基酸組成的影響，探討實(shí)際生產(chǎn)中更適宜湖羊的飼糧類型，為湖羊肉品質(zhì)的提高提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 本試驗(yàn)于2016 年7—11 月在浙江省湖州怡輝生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司的湖羊養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。采用單因子隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，選取采食正常、體重（24.65±2.80）kg的健康90 日齡公湖羊90 只，隨機(jī)分成3 組，分別飼喂傳統(tǒng)精粗飼糧+舔磚（CK 組）、全混合日糧（TMR 組）、粗料+精料顆粒料（CP 組），每組3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只羊。預(yù)試期10 d，正試期120 d，預(yù)試期開(kāi)始時(shí)飼喂湖羊保育料，在10 d 內(nèi)逐漸換為參試飼糧。

1.2 試驗(yàn)飼糧 試驗(yàn)飼糧以玉米-豆腐渣為基礎(chǔ)精料，花生秸稈和黃豆秸稈為粗料，參照《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 816-2004）和中國(guó)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值表（2015 年第26 版）配制。受試湖羊預(yù)混料產(chǎn)品由湖州市農(nóng)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)與浙江威盟飼料科技有限公司聯(lián)合研制。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)湖羊采用網(wǎng)上分欄飼養(yǎng)，自然光照，30℃以下自然通風(fēng)，高于30℃自然通風(fēng)加縱向負(fù)壓通風(fēng)；每天06:30 和16:30 各喂料1 次，第1 次喂料量占40%、第2 次占60%；CK 和CP 組先飼喂粗料，再飼喂精料，飼養(yǎng)期間自由采食和飲水（鴨嘴式飲水器）；根據(jù)湖州地區(qū)商品代湖羊常規(guī)防疫制度進(jìn)行免疫，定期驅(qū)蟲(chóng)。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 血清和肝臟抗氧化指標(biāo) 于試驗(yàn)第120 天，從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取體重相近的健康公湖羊2 只，共18 只進(jìn)行空腹12 h 處理，采用頸靜脈采血，每只羊采血10 mL，置于10 mL 離心管中，3 000 r/min 離心15 min，取上清液分裝到1.5 mL 離心管中，-20℃冰箱保存用于測(cè)定血清抗氧化指標(biāo)。

從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取體重相近的健康公湖羊2 只，共18 只，禁食24 h 后屠宰，迅速摘取部分肝臟和背最長(zhǎng)肌樣品置于液氮中冷凍保存，用于測(cè)定肝臟抗氧化指標(biāo)和肌肉脂肪酸與氨基酸組成。

血清和肝臟中的總抗氧化能力（T-AOC）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）的活性和丙二醛（MDA）的含量均采用南京建成生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定，具體方法與操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4.2 肌肉脂肪酸組成 肌肉脂肪酸組成參照柏美娟等[4]的方法測(cè)定，準(zhǔn)確稱取肌肉樣品1.000 0 g 左右放入于10 mL 離心管中，加入苯與石油醚各1 mL，進(jìn)行避光處理，靜置浸提24 h；再加入2 mL 0.4 mol/L 的KOH－甲醇溶液進(jìn)行甲酯化，搖勻后靜置15 min；最后用雙蒸水定容至10 mL，10 000 r/min 離心10 min，取上清液100 μL 用Agilent 7890A 氣相色譜儀檢測(cè)脂肪酸含量。各脂肪酸含量以單個(gè)脂肪酸在總甲基化脂肪酸中所占的百分比表示。

1.4.3 肌肉氨基酸組成 肌肉氨基酸組成分析參照王玉琴等[5]的方法應(yīng)用L-8900 全自動(dòng)氨基酸分析儀進(jìn)行測(cè)定，具體方法：先將肉樣烘干至恒重，然后取5 mg 放入6 mol/L 的HCl 中110℃水解24 h，脫酸后用水定容至5 mL，最后用L-8900 全自動(dòng)氨基酸分析儀進(jìn)行檢測(cè)分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2003 整理后，用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA），Duncan′s 法進(jìn)行多重比較，以P＜0.05 為差異顯著。試驗(yàn)結(jié)果用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤（SEM）表示。

2 結(jié)果

2.1 飼糧類型對(duì)育肥湖羊血清和肝臟抗氧化指標(biāo)的影響由表2 可知，飼糧類型對(duì)育肥湖羊血清和肝臟的T-SOD、GSH-Px、CAT 活性和MDA 含量以及T-AOC 均無(wú)顯著影響。

2.2 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌飽和脂肪酸組成的影響 由表3 可見(jiàn)，育肥湖羊背最長(zhǎng)肌中檢測(cè)出9 種飽和脂肪酸（SFA），其中棕櫚酸和硬脂酸含量較高，其余種類含量較少。與CK 組相比，TMR 組湖羊背最長(zhǎng)肌中棕櫚酸的比例降低了10.77%（P＜0.05），CP 組棕櫚酸的比例無(wú)顯著顯著；飼糧類型對(duì)其余8 種SFA 的比例沒(méi)有顯著影響。TMR 組總SFA 比例較CK 組降低了9.18%（P＜0.05），但CP 與CK 組無(wú)顯著差異?？偟膩?lái)說(shuō)，TMR 可以降低育肥湖羊背最長(zhǎng)肌中SFA 比例。

表2 飼糧類型對(duì)育肥湖羊血清和肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

表3 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌SFA 組成的影響 %

2.3 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌不飽和脂肪酸組成的影響 如表4 所示，育肥湖羊背最長(zhǎng)肌中檢測(cè)出13 種不飽和脂肪酸（UFA），主要由單不飽和脂肪酸（MUFA）中的油酸和多不飽和脂肪酸（PUFA）中的亞油酸組成，其余UFA 所占比例較低。與CK 組相比，TMR 組湖羊背最長(zhǎng)肌中油酸所占比例升高了4.78%（P＜0.05），但CK 組與CP 組差異不顯著；就總MUFA 比例而言，TMR 組較CK、CP 組分別升高了4.71% 和4.16%（P＜0.05），但CK 與CP 組差異不顯著。飼糧類型對(duì)各PUFA 含量沒(méi)有顯著影響?？偟膩?lái)說(shuō)，TMR 可以提高育肥湖羊背最長(zhǎng)肌中UFA 比例。

2.4 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌氨基酸組成的影響由表5 可見(jiàn)，育肥湖羊背最長(zhǎng)肌中檢測(cè)出18 種氨基酸，其中人體必需氨基酸（EAA）10 種，非必需氨基酸（NEAA）8 種。在EAA 中，賴氨酸含量最高，其在CK 組、TMR 組和CP 組湖羊中的含量分別為1.81%、1.90%和1.82%；其次是亮氨酸，在3 組湖羊中的含量分別為1.55%、1.63%和1.58%。在NEAA 中，含量最高的是谷氨酸，其在CK 組、TMR 組和CP 組湖羊中的含量分別為3.24%、3.29%和3.26%。

表4 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌UFA 組成的影響 %

與CK 組相比，TMR 組湖羊肌肉中異亮氨酸的含量上升了10.34%（P＜0.05），但CP 與CK 組差異不顯著；TMR 組EAA 總含量顯著高于CK 組，升高了4.45%（P＜0.05）；TMR 組NEAA 總含量較CK 和CP 組分別升高了2.33% 和1.99%（P＜0.05）；與CK 和CP 組相比，TMR 組總氨基酸含量分別增加3.42% 和2.75%（P＜0.05）。上述結(jié)果提示，飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌氨基酸組成有影響，且TMR 的效果較顯著。

3 討 論

3.1 飼糧類型對(duì)湖羊血清和肝臟抗氧化指標(biāo)的影響 在動(dòng)物生長(zhǎng)過(guò)程中，體內(nèi)都存在氧自由基，一般狀態(tài)下，氧自由基的產(chǎn)生、利用、清除處于一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，當(dāng)有本身或者外來(lái)因素影響時(shí)，這種動(dòng)態(tài)平衡會(huì)被破壞，從而使動(dòng)物體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)[6]。SOD 是保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)與功能完整性的酶，它在生物機(jī)體內(nèi)有清除氧自由基的能力，其活性升高可以幫助組織細(xì)胞抵御過(guò)氧化損傷[7]。GSH-Px 可以清除細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)氧化氫，還原脂質(zhì)過(guò)氧化物，降低活性氧水平，從而減少細(xì)胞損傷[8]。T-AOC含量可體現(xiàn)動(dòng)物機(jī)體對(duì)機(jī)體自由基的代謝狀態(tài)，是衡量動(dòng)物體總抗氧化能力的最佳指標(biāo)[9]。MDA 是脂質(zhì)過(guò)氧化物代謝的主要產(chǎn)物，可作為氧化應(yīng)激的一種生物標(biāo)志物，其含量增多會(huì)破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和完整性[10]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與CK 組相比，TMR 和CP 組湖羊機(jī)體抗氧化能力相關(guān)指標(biāo)在數(shù)值上有所上升，說(shuō)明飼糧類型對(duì)湖羊抗氧化能力的影響較小，且有關(guān)飼糧類型對(duì)反芻動(dòng)物血清和肝臟的抗氧化能力的研究鮮有報(bào)道。

表5 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌氨基酸組成的影響 %

3.2 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌脂肪酸組成的影響 肌肉中脂肪酸組成是影響肉品質(zhì)的重要因素，其不僅能夠影響肉的嫩度和多汁性，還與肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值息息相關(guān)[11]。脂肪酸由MUFA、PUFA 和SFA 組成，是組成肉類脂肪的主要物質(zhì)，同時(shí)也與肉類特有的風(fēng)味密切相關(guān)[12]。張寧等[13]研究發(fā)現(xiàn)，提高UFA 并降低SFA 在總脂肪酸中所占百分比可提高羊肉品質(zhì)。機(jī)體攝入SFA 過(guò)多會(huì)增加心血管相關(guān)疾病的患病率[14]，而PUFA 具有多種特殊的生物活性，在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)和預(yù)防心血管相關(guān)疾病等方面均具有重要的生理作用[15]。劉圈煒等[16]研究發(fā)現(xiàn)，羊肉的膻味與SFA 中的硬脂酸有關(guān)，在不影響肉品質(zhì)的前提下，可以通過(guò)調(diào)控膻味相關(guān)指標(biāo)來(lái)改善羊肉的風(fēng)味。也有研究表明，羊肉風(fēng)味與UFA 中的油酸和亞麻酸關(guān)系密切[17]。

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，湖羊飼喂TMR 可以顯著降低SFA、增加UFA 在總脂肪酸中所占比例，主要是SFA 中的棕櫚酸比例下降，UFA 中的油酸比例升高，可見(jiàn)TMR 可顯著改善羊肉的風(fēng)味，提高肉品質(zhì)。王德寶等[18]研究表明，與對(duì)照組相比，飼喂TMR 可以顯著提高杜蒙羊肌肉UFA 在總脂肪酸中所占的比例，有效改善肉品質(zhì)。原因可能是瘤胃微生物可以通過(guò)氫化作用合成部分脂肪酸，而全混合日糧能夠提高瘤胃微生物活性，促進(jìn)脂肪酸合成；脂肪酸的組成還有可能與很多因素（如品種、營(yíng)養(yǎng)水平、年齡和養(yǎng)殖模式等）相關(guān)[19]。

3.3 飼糧類型對(duì)育肥湖羊背最長(zhǎng)肌氨基酸組成的影響蛋白質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)的分解和吸收是通過(guò)氨基酸來(lái)實(shí)現(xiàn)的，蛋白質(zhì)中氨基酸的種類和含量又與肌肉的品質(zhì)和風(fēng)味密切相關(guān)[20]。王玉琴等[5]研究表明，氨基酸中的異亮氨酸、亮氨酸、甘氨酸、絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸和脯氨酸是構(gòu)成肉香味的必需前體氨基酸，其中谷氨酸是構(gòu)成肉鮮味的主要物質(zhì)。Lorenzo 等[21]研究發(fā)現(xiàn)，EAA 含量制約著肌肉蛋白質(zhì)的品質(zhì)。有關(guān)飼糧類型對(duì)湖羊肌肉氨基酸組成影響的研究鮮有報(bào)道。本研究結(jié)果表明，湖羊飼喂TMR 可以增加EAA 和NEAA 總含量，改善肌肉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，提高湖羊肉品質(zhì)，這可能與TMR組湖羊蛋白質(zhì)利用效率高有關(guān)，因而總氨基酸含量較高。

4 結(jié) 論

與傳統(tǒng)精粗飼糧相比，TMR 可顯著增加肌肉中UFA 和EAA 含量，降低SFA 比例，改善肉品質(zhì)，提升羊肉的營(yíng)養(yǎng)食用價(jià)值，而顆粒料組效果不顯著。