王國強，劉耀東，段勝和

（1.南陽農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南 南陽 473000；2.江西邁吉生化營養(yǎng)有限公司，江西 南昌 330029）

霉菌是真菌的一種，霉菌毒素是霉菌產(chǎn)生的具有毒性的次級代謝產(chǎn)物。當(dāng)作物在田間收獲時遇到陰雨連綿天氣或者作物在儲存條件不當(dāng)時可產(chǎn)生大量的霉菌毒素[1]。動物采食了被霉菌毒素污染的飼料，會導(dǎo)致畜禽生長、繁殖、免疫力下降，甚至引發(fā)疾病和死亡。目前已發(fā)現(xiàn)有300 多種霉菌代謝產(chǎn)物會對動物和人類健康造成不同程度的影響，其中對動物和人類影響較大的霉菌毒素有黃曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、嘔吐毒素（DON）、伏馬毒素B1（FB1）、T-2 毒素等。霉菌毒素對飼料及飼料原料的污染程度會因谷物種類、天氣、地區(qū)而有所不同。為了解霉菌毒素的污染狀況，筆者聯(lián)合江西邁吉生化營養(yǎng)有限公司于2019 年1—6 月，共收集來自河南、河北、江西、浙江、廣東、廣西、福建、湖北、山東、上海10 個省市的樣本321 份，其中玉米樣本207 份、豆粕樣本3 份、麩皮樣本54 份、飼料樣本57份。檢測了其中對畜禽生產(chǎn)影響較大的黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、伏馬毒素B1和T-2 毒素5 種霉菌毒素含量，以供業(yè)內(nèi)參考。

1 材料與方法

1.1 樣品

2019 年1—6 月，江西邁吉生化營養(yǎng)有限公司共收集來自河南、河北、江西、浙江、廣東、廣西、福建、湖北、山東、上海10 個省市的樣本321 份，其中玉米樣本207 份、豆粕樣本3 份、麩皮樣本54 份、飼料樣本57 份。

1.2 采樣

霉菌毒素廣義上的檢測，應(yīng)該包括取樣、制樣和分析3 步。由于霉菌毒素的污染具有極不均勻性分布而且在農(nóng)產(chǎn)品中的存在是基于“μg/kg”水平，若操作不當(dāng)最終樣品的檢測值是不能完全代表最初樣品的真正含量。在檢測的取樣、制樣和分析3 個步驟中都不可避免地存在著誤差。其中，取樣環(huán)節(jié)產(chǎn)生的誤差最大，占總誤差的85%以上，而制樣與分析兩個環(huán)節(jié)共占總誤差的15%以下。因此為了減少誤差，采用四分法取樣，將樣品磨粉，過篩網(wǎng)，然后混合，平鋪成圓形，分成4 等分，取相對的2 份混合，然后再平分，直到達到次分樣的重量要求。

1.3 儀器與試劑

粉碎機、水浴恒溫振蕩器、電熱恒溫培養(yǎng)箱、電子天平、加樣槍、電腦、甲醇、試劑盒（一種霉菌毒素一個試劑盒）。

1.4 檢測方法

次分樣用相應(yīng)的提取液提取毒素，并采用酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)（ELISA）進行霉菌毒素檢測分析。具體操作步驟參見霉菌毒素檢測試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。各霉菌毒素的檢測限為：黃曲霉毒素B1（AFB1）：1 μg/kg；玉米赤霉烯酮（ZEN）：0.2 μg/kg；嘔吐毒素（DON）：40 μg/kg；伏馬毒素B1（FB1）：750 μg/kg；T-2 毒素：25 μg/kg。

飼料衛(wèi)生國標(biāo)黃曲霉毒素B1允許量：≤20 μg/kg（引自GB 13078—2001）。

國標(biāo)玉米赤霉烯酮允許量：≤500 μg/kg（引自GB 13078.2—2006）。

國標(biāo)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（嘔吐毒素）允許量：≤1 000 μg/kg（引自GB 20833—2007）。

國標(biāo)T-2 毒素的允許量：≤1 000 μg/kg（引自GB 21693—2008）。

伏馬毒素B1：到目前為止，各國對伏馬毒素還沒有一個規(guī)范的限量標(biāo)準(zhǔn)。

2 檢測結(jié)果

所有207 份玉米樣本、3 份豆粕樣本、54 份麩皮樣本和57 份配合飼料樣本都進行AFB1、ZEN、DON、FB1和T-2 毒素檢測。

2.1 所有樣品檢測結(jié)果

從送檢樣品的檢測結(jié)果來看，在全部樣品中AFB1、ZEN、DON、FB1和T-2 毒素都呈現(xiàn)高陽性率，表明這5 種霉菌毒素在當(dāng)前飼料及原料中的污染很普遍。在321 份樣品中，沒有絕對安全的樣品（所有樣品均檢測出霉菌毒素）；檢測到1 種霉菌毒素的樣品占8.64%，檢測到2 種霉菌毒素的樣品占14.81%，檢測出3 種及以上霉菌毒素的樣品占76.55%（圖1）。

圖1 所有樣品霉菌毒素分布類型

相對而言，飼料及原料中的AFB1、ZEN、DON、FB1和T-2 毒素這5 種毒素除豆粕污染較輕其它污染均較嚴(yán)重。所有樣品霉菌毒素污染情況見表1 和圖2。樣品AFB1的陽性檢出率為67.29%，AFB1陽性樣品中值為0.9 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；ZEN 的陽性檢出率達55.14%，ZEN 陽性樣品中值為45.5 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；DON 陽性檢出率達97.2%，DON 陽性樣品中值為716.9 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；FB1陽性檢出率為55.14%，F(xiàn)B1陽性樣品中值為1 414.8 μg/kg；T-2 毒素陽性檢出率達56.07%，T-2 毒素陽性樣品中值為44.6 μg/kg，低于國家規(guī)定的飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

表1 2019 年上半年所有樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

圖2 2019 年上半年全國飼料及原料中霉菌毒素污染陽性率

由圖3 可知，對比2018 年、2017 年霉菌毒素檢測結(jié)果[2-3]，2019 年上半年5 種霉菌毒素污染率中AFB1和DON 兩種毒素有所上升，ZEN、FB1和T-2 毒素呈下降趨勢，證明飼料原料霉菌毒素污染仍然普遍。

圖3 2019 年上半年所有樣品霉菌毒素污染陽性率與2017 年、2018 年上半年同比

2.2 玉米樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

全國玉米樣品霉菌毒素檢測結(jié)果見表2。由表2和圖4 可見，玉米樣品AFB1的陽性檢出率為56.52%，高于2018 年上半年玉米平均檢出率（37.79%），陽性樣品中值（0.8 μg/kg）高于2018 年上半年（0.7 μg/kg）。玉米中ZEN 的陽性檢出率為36.23%，低于2018 年上半年玉米平均檢出率（53.05%），陽性樣品中值（42.5 μg/kg）高于2018 年上半年（24.7 μg/kg）。玉米中DON 的陽性檢出率為98.55%，高于2018 年上半年玉米平均檢出率（98.47%），陽性樣品中值（633.5 μg/kg）高于2018 年上半年（405.5 μg/kg）。玉米中FB1的陽性檢出率為60.87%，低于2018 年上半年玉米平均檢出率（79.39%），陽性樣品中值（1 429.1 μg/kg）高于2018年上半年（1 193.9 μg/kg）。玉米中T-2 毒素的陽性檢出率為57.97%，低于2018 年上半年玉米平均檢出率（94.66%），陽性樣品中值（40.4 μg/kg）高于2018 年上半年（36.3 μg/kg）。說明2019 年上半年玉米污染狀況（除AFB1和DON 外）較去年同期（2018年上半年）有所下降。

表2 2019 年上半年玉米樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

圖4 2019 年上半年玉米樣品霉菌毒素污染陽性率與2017 年、2018 年上半年同比

2.3 麩皮樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

2019 年上半年全國麩皮樣品霉菌毒素檢測結(jié)果見表3。由表3、圖5 可見，2019 年上半年麩皮樣品AFB1的陽性檢出率為94.44%，高于2018 年上半年平均檢出率（92.5%），陽性樣品中值（0.8 μg/kg）低于2018 年上半年（1.1 μg/kg）。麩皮中ZEN 的陽性檢出率為88.89%，低于2018 年上半年平均檢出率（90%），陽性樣品中值（40.7 μg/kg）高于2018 年上半年（23.0 μg/kg）。麩皮中DON 的陽性檢出率為100%，高于2018 年上半年平均檢出率（90%），陽性樣品中值（4 373.4 μg/kg）高于2018 年上半年（3 166.7 μg/kg）。麩皮中FB1的陽性檢出率為16.67%，低于2018 年上半年平均檢出率（50%），陽性樣品中值（475.9 μg/kg）低于2018 年上半年（620.5 μg/kg）。麩皮中T-2 毒素的陽性檢出率為50%，低于2018年上半年平均檢出率（100%），陽性樣品中值（61.3 μg/kg）高于2018 年上半年（52.7 μg/kg）。說明2019年上半年麩皮樣品霉菌毒素污染狀況（除AFB1和DON 外）較去年同期（2018 年上半年）有所下降，DON 污染率高達100%，污染程度最高（半數(shù)以上超出國標(biāo)限量）。

表3 2019 年上半年麩皮樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

圖5 2019 年上半年麩皮樣品霉菌毒素污染陽性率與2017 年、2018 年上半年同比

2.4 飼料樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

2019 年上半年全國飼料樣品霉菌毒素檢測結(jié)果見表4。由表4 和圖6 可見，2019 年上半年飼料樣品AFB1的陽性檢出率為84.21%，低于2018 年上半年平均檢出率（89.09%），陽性樣品中值（7.4 μg/kg）高于2018 年上半年（1.5 μg/kg）；飼料樣品中ZEN的陽性檢出率為94.74%，低于2018 年上半年平均檢出率（100%），陽性樣品中值（104.9 μg/kg）低于2018 年上半年（170.4 μg/kg）；飼料樣品中DON的陽性檢出率為94.74%，高于2018 年上半年平均檢出率（80%），陽性樣品中值（483.3 μg/kg）低于2018 年上半年（1 740.5 μg/kg）；飼料樣品中FB1的陽性檢出率為84.21%，高于2018 年上半年平均檢出率（72.73%），陽性樣品中值（2 950.4 μg/kg）高于2018 年上半年（825.5 μg/kg）；飼料樣品中T-2 毒素的陽性檢出率為57.89%，低于2018 年上半年平均檢出率（100%），陽性樣品中值（65.3 μg/kg）低于2018 年上半年（74.2 μg/kg）。說明2019 年上半年飼料樣品霉菌毒素污染狀況（除DON 和FB1外）較去年同期（2018 年上半年）有所下降。

表4 2019 年上半年飼料樣品霉菌毒素檢測結(jié)果

圖6 2019 年上半年飼料樣品霉菌毒素污染陽性率與2017 年、2018 年上半年同比

3 討論與結(jié)論

從檢測結(jié)果可以看出，玉米、豆粕、麩皮以及飼料樣品霉菌毒素污染狀況仍然嚴(yán)重，沒有絕對安全的樣品（所有受檢樣品均檢測出霉菌毒素），且多種霉菌毒素共存現(xiàn)象很普遍，高達91.36%的飼料及原料受到2 種及以上霉菌毒素污染。麩皮、飼料樣品霉菌毒素污染仍然嚴(yán)重，玉米樣品霉菌毒素污染狀況均較去年同期有所下降，尤以DON 污染仍最嚴(yán)重。建議加強對玉米、麩皮、飼料的霉菌毒素檢測監(jiān)控以及原料采購時的品質(zhì)把控。

綜上，2019 年上半年飼料及原料霉菌毒素污染范圍仍然嚴(yán)重，污染程度高，且多種霉菌毒素共存現(xiàn)象普遍。綜合近幾年霉菌毒素污染調(diào)查報告[4-5]，應(yīng)針對當(dāng)前飼料及其原料霉菌毒素污染狀況采取相應(yīng)預(yù)防措施，酌情添加霉菌毒素處理劑以降低其對動物的危害，提高養(yǎng)殖效果。