陳賢翔

漳州正興醫(yī)院,福建省漳州市 363000

神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(NENs)起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞和肽能神經(jīng)元,具有一定的分泌特征,可產(chǎn)生一系列多肽激素,能從惰性、生長(zhǎng)緩慢進(jìn)展至高轉(zhuǎn)移性、明顯惡性特征的一種高度異質(zhì)性腫瘤[1]。NENs以消化系的腫瘤類(lèi)型最為常見(jiàn),胃腸及胰腺發(fā)病者占65%～75%[2]。過(guò)去因技術(shù)限制認(rèn)為NENs罕見(jiàn),并以“類(lèi)癌”稱(chēng)呼,但隨著醫(yī)療水平不斷發(fā)展,病理學(xué)診斷技術(shù)提升及對(duì)該疾病的認(rèn)識(shí)加深,近幾年NENs的檢出率逐年升高,有研究報(bào)道過(guò)去30年其發(fā)病率增加了5倍[3]。探尋影響其不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素,制定科學(xué)的治療方案,對(duì)提高腫瘤患者的生存率至關(guān)重要。生長(zhǎng)抑素受體(SSTR)是生長(zhǎng)抑素和細(xì)胞膜上的G蛋白偶聯(lián)而成,具有抑制激素分泌和抑制細(xì)胞增殖的特性[4]。SSTR共5種亞型,其中SSTR2和SSTR5多在胃腸及胰腺中表達(dá)[5]。近年有關(guān)胃腸胰神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(GEP-NENs)的研究日益增加,但多集中于病理特征與預(yù)后的相關(guān)性,針對(duì)SSTR亞型與胃腸胰NENs病理特征及對(duì)患者預(yù)后影響的關(guān)系研究相對(duì)較少。本研究旨在分析SSTR2和SSTR5與GEP-NENs病理特征及預(yù)后關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月—2021年1月期間我院收治的胃腸胰神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤62例。納入標(biāo)準(zhǔn):患者均經(jīng)病理或活檢確診[6];研究開(kāi)始前未進(jìn)行任何形式的治療措施;臨床資料及隨訪資料詳細(xì)記錄且完整。排除標(biāo)準(zhǔn):伴有其他器官惡性腫瘤者;有嚴(yán)重心肺疾病或胃腸功能障礙者;確診時(shí)存在嚴(yán)重感染者;存在血液系統(tǒng)疾病或免疫缺陷史。患者中男46例、女16例,年齡24～75歲,平均年齡(51.29±11.86)歲;腫瘤直徑0.3～9.5cm,平均直徑(1.45±0.47)cm,腫瘤發(fā)于胃部患者18例,胰腺22例,直腸13例,十二指腸9例。

1.2 方法

1.2.1 SSTR2、SSTR5陽(yáng)性檢測(cè)。采集患者新鮮病理組織,采用石蠟切片、5%雙氧水—甲醇水溶液室溫孵育20min,采用山羊血清封閉10min,于濕盒中加入SSTR2、SSTR5的抗體,室溫孵育1.5h,滴入生物素標(biāo)記的辣根酶二抗孵育0.5h,DAB顯色,蘇木素對(duì)比染色細(xì)胞核,按照75%、95%、100%梯度進(jìn)行乙醇脫水,每個(gè)梯度2min,再以二甲苯透明,中性樹(shù)脂封片后即可鏡檢;陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)[7]:低倍鏡觀察大體著色情況,再高倍鏡下隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)視野(×200),每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)腫瘤細(xì)胞,根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及著色強(qiáng)度計(jì)算陽(yáng)性表達(dá)率,(1)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5%為0分,5%～25%為1分,26%～50%為2分,51%～75%為3分,76%～100%為4分;(2)無(wú)色0分,淡黃色1分,棕黃色2分,棕褐色3分;由2位病理醫(yī)師在未知腫瘤級(jí)別情況下閱片;兩者計(jì)分相乘為陽(yáng)性等級(jí),≤4分為陰性,5～12分為陽(yáng)性,陽(yáng)性表達(dá)率=陽(yáng)性表達(dá)患者例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.2.2 臨床病理特征收集。收集患者病理特征資料,包括性別、年齡、腫瘤直徑、腫瘤部位、分化程度、脈管神經(jīng)侵犯情況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期。

1.2.3 治療方案。62例GEP-NENs患者中,23例行外科手術(shù)加術(shù)后化療,30例行內(nèi)鏡下微創(chuàng)手術(shù),8例行化療,1例因經(jīng)濟(jì)原因選擇姑息保守支持治療,因手術(shù)方式及化療方案的差異未進(jìn)行預(yù)后生存分析。

1.2.4 預(yù)后隨訪。自納入研究日起以電話方式進(jìn)行隨訪,月度為單位,2個(gè)月隨訪1次,隨訪終止日期至2022年12月,隨訪時(shí)間24～60個(gè)月,以隨訪截止日及全因死亡或失訪為隨訪終點(diǎn),隨訪患者中腫瘤死亡15例。

2 結(jié)果

2.1 SSTR2、SSTR5與GEP-NENs病理特征的關(guān)系 SSTR2、SSTR5表達(dá)率在不同性別、年齡、腫瘤部位、是否脈管神經(jīng)侵犯、是否遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者中比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),SSTR2陽(yáng)性率在腫瘤直徑>2cm、低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期中Ⅲ+Ⅳ期患者中的占比低于腫瘤直徑≤2cm、高及中分化、淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移、TNM分期中Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05),SSTR5陽(yáng)性率在腫瘤直徑>2cm、低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期中Ⅲ+Ⅳ期患者中的占比低于腫瘤直徑≤2cm、高及中分化、淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移、TNM分期中Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 SSTR2、SSTR5與GEP-NENs病理特征關(guān)系[n(%)]

2.2 影響GEP-NENs預(yù)后的Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析 將患者腫瘤死亡設(shè)置為因變量,患者一般資料作為分類(lèi)變量,數(shù)據(jù)錄入SPSS26.0軟件進(jìn)行多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析,結(jié)果顯示,腫瘤直徑>2cm、低分化程度及SSTR2、SSTR5的陽(yáng)性低表達(dá)是影響患者腫瘤死亡的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 影響GEP-NENs預(yù)后的Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析

3 討論

NENs是異質(zhì)性腫瘤,可由任何器官的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞引起,全身均有生長(zhǎng)的可能性,最常見(jiàn)于胃、腸及胰腺[8]。GEP-NENs臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣,可有消化道梗阻癥狀,或表現(xiàn)為腹痛、惡心和貧血等非特異性癥狀,或可無(wú)癥狀帶瘤多年,多數(shù)患者因其無(wú)特異性癥狀而延誤最佳就診時(shí)機(jī),增加了腫瘤轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),導(dǎo)致預(yù)后極差[9-10]。SSTR可介導(dǎo)生長(zhǎng)抑素和癌細(xì)胞受體,激活細(xì)胞毒效應(yīng),殺死腫瘤細(xì)胞[11]。探究SSTR與GEP-NENs病理特征及預(yù)后的關(guān)系對(duì)提高患者生存周期、改善預(yù)后具有重要意義。

本研究發(fā)現(xiàn)SSTR2、SSTR5陽(yáng)性率與患者腫瘤直徑、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期等病理特征關(guān)系緊密,提示SSTR2、SSTR5低表達(dá)可能會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移。分析其原因,SSTR激活后可直接或間接抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)其凋亡,還可激活蛋白酪氨酸磷酸酶,使酪氨酸磷酸酶去磷酸化失活,抑制MAPK信號(hào)通路進(jìn)而抑制細(xì)胞增殖。此外SSTR能抑制激素分泌,下調(diào)血管生成因子,促進(jìn)腫瘤旁血管收縮從而達(dá)到抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的目的,而且腫瘤直徑越大、分化程度越低、惡性程度越嚴(yán)重,則SSTR陽(yáng)性率越低[12]。有研究[13]顯示,生長(zhǎng)抑素與SSTR亞型的親和力不同,其中SSTR2的親和力最強(qiáng),除了在正常組織中分布較為廣泛外,在多種類(lèi)型的實(shí)體瘤中亦可過(guò)度表達(dá),80%～90%的肺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤都表達(dá)SSTR,且主要是SSTR2,分化好的肺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤相比于未分化的SSTR2表達(dá)密度高。易維等[14]通過(guò)對(duì)顱咽管瘤患者的研究發(fā)現(xiàn),SSTR2的表達(dá)與腫瘤的惡性程度與復(fù)發(fā)率緊密相關(guān)。本研究中SSTR2和SSTR5在中高分化程度、Ⅰ+Ⅱ期的陽(yáng)性率明顯高于低分化程度及Ⅲ+Ⅳ期,預(yù)示著SSTR2和SSTR5的表達(dá)可能作為GEP-NENs的潛在預(yù)后指標(biāo)。因此,本研究將患者不良預(yù)后設(shè)置為因變量,患者一般資料作為分類(lèi)變量,通過(guò)Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析探究影響GEP-NENs預(yù)后的因素,結(jié)果顯示,腫瘤直徑>2cm、低分化程度及SSTR2、SSTR5的陽(yáng)性低表達(dá)是影響患者腫瘤死亡的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。有研究[15]顯示,所有GEP-NENs患者中,SSTR2、SSTR5是其獨(dú)立預(yù)后的影響因素,且SSTR的陽(yáng)性表達(dá)與EP-NENs的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。

綜上所述,SSTR2和SSTR5在GEP-NENs中表達(dá)與患者腫瘤直徑、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有一定關(guān)系,且SSTR2和SSTR5陽(yáng)性率低是影響患者不良預(yù)后的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素,可作為判斷GEP-NENs患者預(yù)后的重要臨床指標(biāo),SSTR2和SSTR5在GEP-NENs的表達(dá)與預(yù)后的作用為生長(zhǎng)抑素及類(lèi)似物對(duì)腫瘤的治療提供可靠的證據(jù)。