摘要：建立了土壤中稠環(huán)芳烴的高效液相色譜（HPLC）測(cè)定方法。樣品經(jīng)二氯甲烷∶丙酮（1∶1）微波提取，提取液經(jīng)過(guò)膜，氮吹干濃縮處理后用乙腈/水（1∶1）定容，用高效液相色譜儀測(cè)定其含量，外標(biāo)法定量。優(yōu)化了16種多環(huán)芳烴（PAHs）化合物的分離測(cè)定條件，其回收率為50.3%～100%。該方法具有靈敏度高、準(zhǔn)確度好、能同時(shí)分離16種PAHs的優(yōu)點(diǎn)，適合于土壤中稠環(huán)芳烴的分析測(cè)定。

關(guān)鍵詞：稠環(huán)芳烴;高效液相色譜;外標(biāo)法

一、 前言

多環(huán)芳烴（PAHs）是指分子由2個(gè)或2個(gè)以上苯環(huán)連接在一起的一類化合物。目前所說(shuō)的PAHs多指稠環(huán)芳烴，即苯環(huán)和苯環(huán)之間共用兩個(gè)碳原子相連的稠環(huán)芳香烴化合物。PAHs在空氣、水、土壤等環(huán)境中廣泛分布，是重要的環(huán)境和食品污染物。其中16種組分已被美國(guó)環(huán)保局列入優(yōu)先控制污染物名單。本實(shí)驗(yàn)采用外標(biāo)法測(cè)定土壤中稠環(huán)芳烴的含量。

二、 實(shí)驗(yàn)

系土壤中稠環(huán)芳烴含量的測(cè)定。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法，有關(guān)內(nèi)容分述如下：

（一） 儀器與藥品

Aglient1200高效液相色譜儀，十萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)賽特落斯），MTN-2800D氮吹濃縮裝置（天津特賽恩斯儀器有限公司），Biotage微波;

二甲酮、二氯甲烷、乙腈，均為分析純，稠環(huán)芳烴混標(biāo)溶液1mL，16種稠環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)樣品為PAHs單體化合物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心）。

（二） 色譜條件

采用SB-C18柱（4.6×150mm，5μm），流動(dòng)相梯度：時(shí)間分別為0，5，15，30;水對(duì)應(yīng)為63，63，49，0;乙腈對(duì)應(yīng)為37，37，51，100。流速0.8mL/min，柱溫：40℃，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)215nm，進(jìn)樣體積20μL。

（三） 樣品檢測(cè)

1. 樣品處理

將濕土取出放入固定托盤中均勻攤開(kāi)，放入冷凍干燥機(jī)中冷凍約4個(gè)小時(shí)，取出放入瓷盤中，在室溫下晾干，待粉碎。

微波提?。喝?g土壤，加5mL二氯甲烷/丙酮（1∶1）提取劑，微波30分鐘，將溶液轉(zhuǎn)移至具塞試管，過(guò)膜，氮吹干，用乙腈/水（1∶1）定容1.0mL。

2. 樣品測(cè)定

（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

稠環(huán)芳烴混標(biāo)溶液200ppm為母液，用分析純的二氯甲烷/甲醇（1∶1）稀釋并定容成各個(gè)濃度的混標(biāo)溶液后備用。

取定量母液分別稀釋成0.1ppm、0.5ppm、1ppm、2ppm、3ppm、4ppm、5ppm的混標(biāo)，進(jìn)樣上機(jī)。根據(jù)峰面積與混標(biāo)濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性關(guān)系良好，大致可達(dá)到0.99。

（2）多環(huán)芳烴樣品提取物溶液于高效液相色譜儀中，按2.2色譜條件進(jìn)行分析，記錄峰面積，外標(biāo)法定量。

三、 結(jié)果與討論

（一） 色譜條件的建立

參考國(guó)標(biāo)法，并優(yōu)化色譜條件（調(diào)整紫外波長(zhǎng)、溫度和流速）得符合分離條件的色譜條件：采用SB-C18柱（4.6×150mm，5μm），流動(dòng)相梯度：時(shí)間分別為0，5，15，30;水對(duì)應(yīng)為63，63，49，0;乙腈對(duì)應(yīng)為37，37，51，100。流速0.8mL/min，柱溫：40℃，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)215nm，進(jìn)樣體積20μL。

（二） 提取條件的確定

微波提?。喝?g土壤，加5mL二氯甲烷/丙酮（1∶1）提取劑，微波30分鐘，將溶液轉(zhuǎn)移至具塞試管，過(guò)膜，氮吹干，用乙腈/水（1∶1）定容1.0mL。

微波條件優(yōu)化：

采用正交法確定微波條件，最后確定微波時(shí)間30分鐘，溫度為60度。

提取溶劑選擇：

分別采用二氯甲烷∶丙酮，正己烷∶丙酮，正己烷∶丙酮∶二氯甲烷等溶劑作提取劑，改變混合提取劑的比例，根據(jù)提取效果，最后選二氯甲烷∶丙酮（1∶1）做提取劑。

定容溶劑選擇：

考慮到流動(dòng)相的比例，采用乙腈/水（1∶1）定容至 1mL。

（三） 結(jié)果比較

將土樣用震蕩提取、微波提取兩種方法用二氯甲烷∶丙酮=1∶1的混合提取劑提取，濃縮后進(jìn)樣上機(jī)（注：摸索方法均用配制的混標(biāo)0.2ppm）

（四） 線性及檢出限

線性關(guān)系及檢測(cè)限測(cè)定用外標(biāo)峰面積法測(cè)定。峰面積對(duì)質(zhì)量濃度作線性回歸方程，計(jì)算相關(guān)系數(shù)，以3倍信噪比計(jì)算方法的檢測(cè)限。

（五） 重復(fù)性精密度

在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，由同一操作者使用相同的設(shè)備，按照相同的測(cè)試方法，在不同時(shí)間（一個(gè)月內(nèi)）分5次對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定，本實(shí)驗(yàn)中每十個(gè)樣品中取一個(gè)進(jìn)行平行樣測(cè)定，現(xiàn)選取樣品hs269進(jìn)行分析。

實(shí)驗(yàn)次數(shù)1，2，3，4，5;保留時(shí)間（min）對(duì)應(yīng)為30.333，30.293，29.572，30.282，29.476;峰面積對(duì)應(yīng)為13.7，13.4，13.2，13.6，13.8。

標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.24，說(shuō)明該方法的重復(fù)性精密度是可接受的。

（六） 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

每一批樣品中取一個(gè)試樣，加入0.5ppm的混標(biāo)溶液 1mL，放置4小時(shí)后微波，然后進(jìn)樣。

（七） 實(shí)際土樣的測(cè)定結(jié)果

四、 結(jié)論

本研究建立的方法靈敏、準(zhǔn)確，能同時(shí)測(cè)定土壤中的16種多環(huán)芳烴。由于PAHs化合物易降解、揮發(fā)或升華，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意置室溫避光保存，否則化合物損失較大。

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作者簡(jiǎn)介：

簡(jiǎn)元芹，湖北省宜城市，湖北省宜城市第三高級(jí)中學(xué)。