胡輝 羅世民 蘇五珍 張光友 郭青春
摘要:對(duì)某竹鼠養(yǎng)殖場(chǎng)的死亡竹鼠進(jìn)行了臨床檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查,通過病理剖檢、細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定、生化試驗(yàn)等,診斷竹鼠的死亡是由沙門氏菌和葡萄球菌混合感染引起的。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,菌株對(duì)頭孢他啶、環(huán)丙沙星、慶大霉素極度敏感;對(duì)氨芐青霉素、恩諾沙星等中度敏感;對(duì)諾氟沙星、新霉素等低敏敏感;對(duì)強(qiáng)力霉素、氨芐西林等耐藥。
關(guān)鍵詞:竹鼠;沙門氏菌;葡萄球菌;藥敏試驗(yàn)
中圖分類號(hào):S858.92? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A? ? ? ? 文章編號(hào):1007-273X(2019)09-0021-02
竹鼠又名竹貍、冬毛老鼠、竹根豬等,因主要取食竹子而得名。在生物分類學(xué)中屬于脊椎動(dòng)物亞門、哺乳綱、嚙齒目、竹鼠科、竹鼠屬,是一種較大的嚙齒類動(dòng)物。竹鼠以竹子、植物的根莖和農(nóng)作物秸稈為主食,馴化后能以各種植物秸稈為食,至今已經(jīng)成為經(jīng)濟(jì)效益和開發(fā)價(jià)值高、市場(chǎng)需求量大、風(fēng)險(xiǎn)低的新型特種養(yǎng)殖業(yè)[1]。
由于缺乏竹鼠營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)、環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)和品種標(biāo)準(zhǔn)等,在飼養(yǎng)竹鼠時(shí)飼喂?fàn)I養(yǎng)比例不當(dāng)、籠舍設(shè)計(jì)不合理等問題,導(dǎo)致竹鼠發(fā)育不良,抵抗力下降,各類疾病隨之增多,嚴(yán)重影響了竹鼠養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展[2]。沙門氏菌、葡萄球菌廣泛分布于自然界中,如飲水、地面、空氣、飼料及物體表面,常常引起各種腸炎、化膿性疾病、敗血癥等。某養(yǎng)鼠場(chǎng)發(fā)生了以痢疾和皮膚紫紺為主要特征且傳播迅速的一種疾病,使用慶大霉素、卡那霉素治療后,短期內(nèi)得到有效控制,但隨后又迅速復(fù)發(fā),再次使用慶大霉素、卡那霉素后不能有效控制。從病鼠臟器內(nèi)分離出葡萄球菌后,改用青霉素、鏈霉素治療,取得良好效果[3]。本試驗(yàn)通過臨床檢查、病理剖檢、細(xì)菌分離鑒定、生化試驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)等為竹鼠沙門氏菌和葡萄球菌混合感染診斷提供參考。
1? 發(fā)病情況
3只病竹鼠來自湖南省懷化市某竹鼠養(yǎng)殖場(chǎng),該竹鼠養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)模約有800只。送檢時(shí)已有2只死亡。據(jù)主訴近日養(yǎng)殖場(chǎng)竹鼠開始出現(xiàn)少食,部分食欲廢絕、精神萎靡、毛發(fā)粗亂,隨后腹瀉、漸漸消瘦、脫水,甚至死亡。死前沒有進(jìn)行任何藥物治療。不食、少動(dòng)、腹部皮膚紫紺,拉腥臭痢疾后迅速死亡,6月呈流行性發(fā)生,感染113只,死亡30多只,使用青霉素、鏈霉素后,病情有所控制,但效果不佳。
2? 臨床癥狀
對(duì)送檢的3只發(fā)病竹鼠(其中2只已死亡)進(jìn)行臨床觀察,病鼠外觀表現(xiàn)精神沉郁,嗜睡、消瘦、食欲減少或廢絕;體溫40~41 ℃,呼吸急迫,噴嚏,部分發(fā)出怪叫聲;皮毛粗亂、腹部、全身皮膚沒有出血點(diǎn),腹瀉和下痢,糞便腥臭,肛門周圍有糞便,繼而出現(xiàn)尿失禁;腹部皮膚有大小不等的紫紺斑塊,少部潰爛結(jié)痂,腹圍增大,觸之痛感明顯。視診病鼠體表并未發(fā)現(xiàn)寄生蟲及寄生蟲卵等。
3? 病理剖檢
解剖1只病鼠和2只死鼠,尸僵完全,腹水增多,呈黃色膠凍樣;心外膜有白色囊狀物;肝臟腫大且有針尖大黃白色壞死灶,黃褐色;脾有出血性壞死灶;腎臟腫大;肺腫大出血;腸鼓氣、腸黏膜出血,腸系膜淋巴腫大出血,大小腸水腫呈紫色等病變。
4? 實(shí)驗(yàn)室檢查
4.1? 病料
來自懷化市某竹鼠養(yǎng)殖場(chǎng)的3只病鼠,對(duì)竹鼠分別編號(hào)1,2,3。
4.2? 主要藥品、工具和儀器設(shè)備
普通肉湯、麥康凱培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基、細(xì)菌微量生化管、藥敏紙片、工業(yè)用鹽、新潔爾滅、手術(shù)剪、手術(shù)刀、鑷子、無菌口罩、記號(hào)筆、橡膠手套、手術(shù)器械托盤、自封袋、解剖托盤、載玻片、玻璃棒、小瓶(青霉素瓶)、瓷盆、小燒杯、過濾網(wǎng)、超凈工作臺(tái)、恒溫培養(yǎng)箱、恒溫?fù)u床、顯微鏡等。
4.3? 實(shí)驗(yàn)室檢查
用病死鼠的肝臟涂片,革蘭氏染色,鏡檢可見革蘭氏陰性,兩端稍鈍圓的細(xì)長桿菌。取死亡竹鼠肝、脾、腸同時(shí)涂片,革蘭氏染色后鏡檢,有大量呈葡萄狀的藍(lán)紫色圓形葡萄球菌。
細(xì)菌培養(yǎng):取病死鼠的肝、脾等組織分別接種于普通肉湯、SS瓊脂、亞硒酸鈉瓊脂和普通營養(yǎng)瓊脂。置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h后觀察,可見肉湯渾濁均勻一致,在SS瓊脂上長有直徑1.0~1.5 mm透明或半透明、中心黑色菌落;在亞硒酸鈉瓊脂上的菌落為黑色有金屬光澤,菌落周圍培養(yǎng)基為黑色或棕色;在普通營養(yǎng)瓊脂上生成圓形或近圓形、光滑、半透明、邊緣整齊的菌落。有的菌落2~3 mm,隆起的圓形菌落表面濕潤[4]。
取病料接種于普通瓊脂平板37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h后,形成不透明濕潤、光滑、隆起的圓形菌落,菌落顏色初呈灰白色,繼而為淡黃色或金黃色,且放置時(shí)間越長,菌落黃色越深,為典型金色葡萄球菌菌落,直接進(jìn)行涂片,革蘭氏染色后,鏡檢可見大量呈葡萄串狀排列、藍(lán)紫色的葡萄球菌。
細(xì)菌生化試驗(yàn):挑取可疑單菌分別接種于葡萄糖、乳糖、甘露醇、麥芽糖、硫化氫、VP、吲哚等微量生化反應(yīng)管中,37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18~24 h[5],觀察結(jié)果。
藥敏試驗(yàn):將增菌培養(yǎng)的菌種混合后用涂布法接種于LB培養(yǎng)基,取10種藥敏紙片做藥敏試驗(yàn),37 ℃恒溫培養(yǎng)18~24 h,觀察結(jié)果。
4.4? 結(jié)果
4.4.1? 生化試驗(yàn)結(jié)果? 根據(jù)生化特性鑒定(表1),可以確定為沙門氏菌(A)、葡萄球菌(B)。
4.4.2? 藥敏試驗(yàn)結(jié)果? 由表2可知,分離得到的菌株對(duì)頭孢他啶、環(huán)丙沙星、慶大霉素高度敏感;對(duì)氨芐青霉素、恩諾沙星等中度敏感;對(duì)諾氟沙星、新霉素等低敏敏感;對(duì)強(qiáng)力霉素、氨芐西林等耐藥。
5? 討論
隨著竹鼠養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,養(yǎng)殖竹鼠所需要面對(duì)的疾病挑戰(zhàn)也越來越多,特別是長時(shí)間飼養(yǎng)后不再是單一感染,而是呈混合式以及繼發(fā)式感染,防治難度也越來越大。通過臨床觀察、病理解剖、細(xì)菌鏡檢、生化試驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)、體內(nèi)外寄生蟲檢查等確認(rèn)該竹鼠是沙門氏菌和葡萄球菌混合感染。
在臨床上抗沙門氏菌的首選藥物是頭孢類藥物,藥敏試驗(yàn)結(jié)果中氨芐西林、強(qiáng)力霉素等有耐藥性,和以前報(bào)道不一致,可能與養(yǎng)殖過程中用藥有關(guān)系,讓菌株產(chǎn)生了耐藥性,也可能是菌株發(fā)生了變異,使其有了耐藥性[6]。
根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果,建議該養(yǎng)殖場(chǎng)選用頭孢類藥物進(jìn)行沙門氏菌感染的治療。養(yǎng)殖戶亦應(yīng)做好對(duì)竹鼠非傳染型和傳染型疾病的預(yù)防,減少發(fā)病及死亡[7]。
葡萄球菌病的發(fā)生和流行與各種誘發(fā)因素有密切關(guān)系,如環(huán)境惡劣、飼養(yǎng)管理?xiàng)l件差、污染嚴(yán)重、有并發(fā)病存在使機(jī)體抵抗力減弱等。從送檢養(yǎng)鼠場(chǎng)衛(wèi)生狀況看,場(chǎng)內(nèi)經(jīng)常不消毒或消毒不徹底(導(dǎo)致細(xì)菌濃度過高)、打掃不及時(shí)導(dǎo)致氨氣濃度過高(刺激尿道口皮膚黏膜)可能是誘發(fā)感染的病因[8]。
6? 防治
6.1? 預(yù)防
廄舍保持通風(fēng)、干燥、清潔,使空氣清新,全場(chǎng)用高濃度石灰水和病毒殺交替噴施消毒,全群添加環(huán)丙沙星混飼預(yù)防。
6.2? 治療
采取抗菌消炎為主的治療原則,輔以維生素制劑,具體方法:隔離病鼠并且肌肉注射頭孢吡肟;在鼠群全天飲水中加入慶大霉素2萬U/只,每天更換,讓其自由飲用,同時(shí)輔以VC 2 mL/只肌注,2次/d。清理病鼠腹部皮膚上的痂塊,涂擦醫(yī)用龍膽紫藥水。通過3 d一個(gè)療程的治療后病鼠好轉(zhuǎn),全場(chǎng)未再出現(xiàn)新病例[9]。
7? 小結(jié)
通過臨床觀察、病理剖檢、細(xì)菌培養(yǎng)、染色鏡檢、生化試驗(yàn)、體內(nèi)外寄生蟲檢查及藥敏試驗(yàn)等確定發(fā)病竹鼠為沙門氏菌和葡萄球菌混合感染。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,分離的菌種對(duì)頭孢他啶、環(huán)丙沙星、慶大霉素高度敏感,對(duì)氨芐西林、強(qiáng)力霉素等耐藥。隨著竹鼠養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,造成竹鼠疾病的因素也越來越多,除了病原性因素,還有養(yǎng)殖環(huán)境和飼養(yǎng)條件等。保持環(huán)境的清潔和飼養(yǎng)管理的合理性是必要的,做好疾病早發(fā)現(xiàn)早治療,采取綜合措施防治疾病,最大程度的降低養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)及減少損失[10]。
加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,消除發(fā)病誘因,保持飼料和飲水的清潔、衛(wèi)生。添加含抗生素的飼料添加劑,但應(yīng)注意地區(qū)抗藥菌株的出現(xiàn),如發(fā)現(xiàn)對(duì)某種藥物產(chǎn)生抗藥性,應(yīng)換藥,或先做藥敏試驗(yàn),采用敏感藥物。
葡萄球菌對(duì)外界的抵抗力較強(qiáng),是不產(chǎn)生芽孢的細(xì)菌中抵抗力最強(qiáng)的一種,對(duì)部分抗生素類藥物能產(chǎn)生抗藥性、感染痊愈后,不產(chǎn)生明顯的免疫力,可再次感染,故在疫情撲滅后仍不能放松[11]。
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