孫廣 李小多 王萍

【摘 要】 目的 分析慢性乙型肝炎患者乙肝兩對(duì)半（HBV-M）與PreS1-Ag、HBV-DNA的相關(guān)性。方法 免疫學(xué)技術(shù)（ELISA）檢測(cè)乙肝兩對(duì)半和PreS1-Ag，分子生物學(xué)技術(shù)（實(shí)時(shí)熒光定量PCR）檢測(cè)HBV-DNA。結(jié)果 共收集101例慢性乙型肝炎患者的檢測(cè)數(shù)據(jù)并對(duì)其進(jìn)行分析，大三陽(yáng)患者（HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+）25例，占24.8%，其HBV-DNA、Pre-S1Ag的陽(yáng)性率分別為96%、100%;小三陽(yáng)患者（HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+）63例，占62.4%，其HBV-DNA、PreS1-Ag的陽(yáng)性率分別為69.8%、98.4%;HBsAg+、HBcAb+患者13例，占12.8%，其HBV-DNA、PreS1-Ag的陽(yáng)性率分別為53.8%、92.3%。其中，大三陽(yáng)歸類(lèi)于HBeAg陽(yáng)性組，小三陽(yáng)和HBsAg+、HBcAb+歸類(lèi)于HBeAg陰性組。結(jié)論 ?在HBeAg陽(yáng)性組中PreS1-Ag、HBV-DNA均表現(xiàn)為高陽(yáng)性率（P>0.05），而在HBeAg陰性組中PreS1-Ag的陽(yáng)性率高于HBV-DNA的陽(yáng)性率，表明在HBeAg陰性組中PreS1-Ag陽(yáng)性檢出率高于HBV-DNA（P<0.05）。

【關(guān)鍵詞】慢性乙型肝炎患者;乙肝兩對(duì)半;PreS1-Ag;HBV-DNA

Abstract Objective This study was analyzed the correlation within two pairs of hepatitis B （HBV-M）and PreS1-Ag and HBV-DNA in patients with chronic hepatitis B. Using Immunological techniques （ELISA） to detect the two pairs of hepatitis B and PreS1-Ag and Molecular biology techniques （real-time fluorescence quantitative PCR） to detect HBV-DNA. 101 cases of chronic hepatitis B were collected and analyzed： The proportion of HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+ was 25 cases（24.8%）， in which the positive ratio of HBV-DNA was 96 % and PreS1-Ag was 100% respectively. The proportion of HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+ was 63 cases（62.4%）， in which the positive ratio of HBV-DNA was 69.8 % and PreS1-Ag was 98.4 % respectively. The proportion of 13 HBcAb+ and HBsAg+ was 13 cases（12.8%）， in which the positive ratio of HBV-DNA was 53.8% and PreS1-Ag was 92.3 % respectively. Cases were classified in two group ： the HBeAg-positive group （HBsAg+， HBeAg+， and HBcAb+ ） and the HBeAg-negative group （HBsAg+、HBeAb+、 HBcAb+ and HBsAg+、HBcAb+ ）. In conclusion， PreS1-Ag and HBV-DNA showed high positive rate in HBeAg-positive group （P>0.05）， while PreS1-Ag positive rate in HBeAg-negative group was higher than HBV-DNA positive rate， which indicated that the positive rate of PreS1-Ag detection in HBeAg negative group was higher than that of HBV-DNA（P<0.05）.

Key words Chronic hepatitis B patients; Hepatitis B two and a half; PreS1-Ag; HBV-DNA.

【中圖分類(lèi)號(hào)】R512.6【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1672-3783（2019）11-03--01

乙型肝炎病毒（HBV）是乙型病毒性肝炎的病原體。乙型病毒性肝炎已成為嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的世界性疾病，也是我國(guó)當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴(yán)重的一種疾病。我國(guó)是乙肝疾病負(fù)擔(dān)嚴(yán)重的國(guó)家，HBV慢性感染者基數(shù)龐大[1]，相關(guān)數(shù)據(jù)表明我國(guó)慢性乙肝患者約有2000萬(wàn)[2]。慢性乙型肝炎是一種乙型肝炎病毒（HBV）引起的、病程超過(guò)半年或者無(wú)法明確發(fā)病日期的慢性肝炎[3]，患者在經(jīng)由一定病程后會(huì)演變?yōu)楦斡不踔涟l(fā)展為肝癌，使患者生命受到威脅，因此要早診斷、早治療[4]。乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)目前仍作為我國(guó)診斷、治療、分析和判斷HBV感染者病程及傳染性的重要指標(biāo)之一，但由于病毒的開(kāi)放閱讀框前C區(qū)基因易變異常會(huì)導(dǎo)致漏診等情況，從而影響慢性乙肝的診斷及治療[5]。

本研究收集了2017年6月至2017年12月安順市人民醫(yī)院慢性乙型肝炎患者的乙肝兩對(duì)半、HBV-DNA、PreS1-Ag的檢測(cè)結(jié)果，并分析各檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性，為臨床診斷和治療慢性乙型肝炎提供數(shù)據(jù)支撐和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性收集貴州省安順市人民醫(yī)院2017年6月至2017年12月共101例慢性乙型肝炎患者的相關(guān)數(shù)據(jù)資料，患者平均年齡為39.2歲。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 試劑

乙肝兩對(duì)半和PreS1-Ag試劑盒：廣東省珠海麗珠試劑股份有限公司;HBV-DNA試劑盒：湖南省圣湘生物科技有限公司;

1.2.2 儀器

全自動(dòng)酶免分析儀Addcare ELISA 1100：煙臺(tái)艾德康生物科技有限公司;熒光PCR分析儀cobas z 480：德國(guó)羅氏診斷產(chǎn)品有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 18.0軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)慢性乙型肝炎患者的乙肝兩對(duì)半與PreS1Ag、HBV-DNA的相關(guān)性。P<0.05表示具有顯著差異。

2 結(jié)果

2.1 乙肝兩對(duì)半與HBV-DNA的檢測(cè)結(jié)果：

三組不同HBV-M模式的HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果中，大三陽(yáng)中HBV-DNA陽(yáng)性率最高，為96%;小三陽(yáng)中HBV-DNA陽(yáng)性率次之，為69.8%;HBsAg+、HBcAb+中HBV-DNA陽(yáng)性率最低，僅為 53.8%。結(jié)果見(jiàn)表1：

2.2 乙肝兩對(duì)半與PreS1-Ag的檢測(cè)結(jié)果：

三組不同HBV-M模式的PreS1-Ag陽(yáng)性率均較高，其中大三陽(yáng)中PreS1-Ag陽(yáng)性率為100%，陽(yáng)性率最高;小三陽(yáng)中PreS1-Ag陽(yáng)性率為 98.4%，HBsAg+、HBcAb+中PreS1-Ag陽(yáng)性率為92.3%。結(jié)果見(jiàn)表2：

2.3 HBeAg與HBV-DNA、PreS1-Ag的檢測(cè)結(jié)果：

在101例患者中，HBeAg陽(yáng)性共25例，其 HBV-DNA、PreS1-Ag的陽(yáng)性率分別為 96%、100%，HBeAg陰性共76例，其 HBV-DNA、PreS1-Ag的陽(yáng)性率分別為67.1%、97.3%。結(jié)果見(jiàn)表3：

3 討論

乙肝兩對(duì)半可初步診斷乙肝，反應(yīng)出患者的免疫狀況，但易受病毒變異等因素的影響;HBV基因組有開(kāi)放閱讀框（ORF）C區(qū)編碼PreS1-Ag是在人體感染HBV后最先引起免疫反應(yīng)的，因而作為HBV復(fù)制的指標(biāo)可以起到早期診斷的作用，且其針對(duì)C區(qū)基因變異的乙肝兩對(duì)半的檢測(cè)具有補(bǔ)充意義;HBV-DNA的檢測(cè)可直接反應(yīng)HBV的存在、復(fù)制水平及傳染性的大小[6]，為乙型肝炎的早期診斷、病情判斷、基因分型、耐藥性基因分析、療效監(jiān)測(cè)等提供更為有效的依據(jù)，但不能反映機(jī)體的免疫狀況[7-8] 。

本研究分析的101例慢性乙型肝炎患者中，大三陽(yáng)患者25例、小三陽(yáng)患者63例，兩者共88例，占87.1%，表明在此地區(qū)患者的感染主要以這兩種模式為主。從表1和表2可以知道，大三陽(yáng)患者的HBV-DNA陽(yáng)性率為 96%、PreS1-Ag陽(yáng)性率為100%，這一結(jié)果與胥飚等報(bào)道基本一致[9]，小三陽(yáng)患者的HBV-DNA陽(yáng)性率為69.8%，而PreS1-Ag陽(yáng)性率為98.4%，在這種模式中PreS1-Ag比HBV-DNA更具有臨床意義，這一結(jié)果與張瑚敏等報(bào)道相悖[10]，出現(xiàn)這一結(jié)果有可能是因?yàn)镻reS1-Ag是乙肝病毒血清標(biāo)志物，其陰陽(yáng)轉(zhuǎn)化滯后于HBV-DNA的載量變化，從而出現(xiàn)HBV-DNA已轉(zhuǎn)陰而PreS1 -Ag暫時(shí)呈陽(yáng)性結(jié)果的現(xiàn)象。在HBeAg陽(yáng)性組中，HBV-DNA與PreS1-Ag之間無(wú)顯著差異（P>0.05）[11]，說(shuō)明在HBeAg陽(yáng)性組中，兩者的檢測(cè)均具有較好的一致性，即當(dāng)HBeAg陽(yáng)性與HBV-DNA或PreS1-Ag陽(yáng)性并存時(shí)，則提示乙肝病毒在患者體內(nèi)復(fù)制活躍，臨床醫(yī)生需根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)病人合理用藥。在HBeAg陰性組中，HBV-DNA與PreS1-Ag之間具有顯著差異（P<0.05），HBeAg的陰性并不一定說(shuō)明病毒復(fù)制的終止，PreS1-Ag的檢測(cè)針對(duì)于因C區(qū)基因變異而導(dǎo)致的HBeAg檢測(cè)為陰性更具有臨床意義，但是在監(jiān)測(cè)病毒載量方面并不能完全代替HBV- DNA [12];以往有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，前S1抗原只有在HBV-DNA陽(yáng)性的血清中檢出[13]，然而從數(shù)據(jù)分析可知，HBV-DNA的檢測(cè)僅在HBeAg陽(yáng)性中表現(xiàn)為高陽(yáng)性率，而PreS1-Ag的檢測(cè)在三種模式中均表現(xiàn)為高陽(yáng)性率。

綜上所述，乙肝兩對(duì)半、HBV-DNA、PreS1-Ag在臨床上的結(jié)合使用更具價(jià)值，三者聯(lián)合檢測(cè)能獲得較為全面的信息，有助于臨床醫(yī)生對(duì)疾病的診斷和及時(shí)有效地判斷病情與預(yù)后、衡量抗病毒療效。

參考文獻(xiàn)

衛(wèi)生部疾病預(yù)防控制局，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心，全國(guó)人群乙型病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告[M].北京： 人民衛(wèi)生出版社，2010：55.

周雪紅，辛承蔡.慢性乙肝患者“乙肝兩對(duì)半”檢驗(yàn)的分析[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2015，15（A4）： 158，132.

曾鋼，吳斌，李彩東，等.308例慢性乙肝患者血清HBV-DNA載量與肝功能及HBV-M檢測(cè)結(jié)果分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（14）： 1908-1910.

葉猛，徐貴，何月，等.淺論對(duì)慢性乙肝患者聯(lián)合進(jìn)行HBV-DNA、乙肝兩對(duì)半和肝功能檢測(cè)的臨床意義[J].當(dāng)代醫(yī)藥論叢，2015，9（17）： 58-59.

孫翠平. 乙肝兩對(duì)半與HBV-DNA復(fù)制的臨床對(duì)比以及聯(lián)系[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)（中旬刊），2013，16（3）： 590-591.

楊勇，王占科，陳鑫，等.乙型肝炎病毒DNA定量水平與乙型肝炎病毒標(biāo)志物定量檢測(cè)指標(biāo)相關(guān)性研究[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2014，26（10）： 78-80.

林裕龍，蘭萌，龍國(guó)進(jìn)，等.PCR-RFLP檢測(cè)HBeAg陰性PreS1抗原陽(yáng)性的HBV感染者前C區(qū)基因變異[J].臨床檢驗(yàn)雜志.2006，24（5）： 321-323.

Theilmann L，Klinkert MQ，Gmelin K，et al.Detection of preS1 pro-teins in serum and liver of HBsAg-positive patients：A news marker for hepatitis B virus infetion[J].Hepatology.1986.6（2）： 186-190.

胥飚，余文靜，張莉萍，等.乙型肝炎患者HBV DNA載量與HBV血清標(biāo)志物、前S1抗原的相關(guān)性[J].重慶醫(yī)學(xué)，2009，38（19）： 2430-2432.

張瑚敏，羊建，范岳幫，等.PreS1、乙肝兩對(duì)半與HBV-DNA檢測(cè)相關(guān)性分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2007，8（6）： 404-405.

李文波，雷毅，高武，等.HBV-DNA PreS1-Ag與乙型肝炎HBeAg聯(lián)合檢測(cè)的意義及相關(guān)性分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，36（22）： 3311-3313.

李彩東，吳斌，陳錫蓮，等.乙型肝炎病毒前S1抗原與HBVDNATGK HBV-M及肝功能的相關(guān)性探討[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，36（7）： 936-938.

黎軍，彭愛(ài)玉，吳國(guó)春.乙型肝炎血清前S1抗原檢測(cè)在慢性乙型肝炎診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)冶金醫(yī)學(xué)雜志，2007，17（1）： 46-47.