黃河倩 徐俊 陳歡 曹丹婧 肖李錢(qián)

[摘要] 目的 建立瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒溶出度的測(cè)定方法。 方法 運(yùn)用固體分散體技術(shù)制備瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，采用紫外分光光度法測(cè)定其溶出度，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為241 nm，并進(jìn)行方法學(xué)考察，主要包括考察精密度、穩(wěn)定性以及重現(xiàn)性、回收率。 結(jié)果 在6.0～22.0 mg/L，瑞舒伐他汀鈣濃度與吸光度的線性關(guān)系良好，線性回歸方程為Y=0.032X+0.0292（r = 0.999 95），平均回收率為99.77%，RSD為0.94%，重現(xiàn)性的RSD為0.33%，溶出度達(dá)到90%以上。 結(jié)論 本方法可用于瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒溶出度的測(cè)定。

[關(guān)鍵詞] 瑞托伐他汀鈣;溶出度;固體分散體;顆粒;紫外分光光度法

[中圖分類(lèi)號(hào)] R927.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2019）08（a）-0038-04

[Abstract] Objective To establish a method for the determination of dissolution rate of Rosuvastatin Calcium Solid Dispersion Granules. Methods Rosuvastatin Calcium Solid Dispersion Granules were prepared by solid dispersion technology. The dissolution rate was determined by ultraviolet spectrophotometry. The ultraviolet detection wavelength was 241 nm. Methodological investigation was carried out， including precision， stability， reproducibility and recovery. Results At 6.0-22.0 mg/L， the linear relationship between the concentration of Rosuvastatin Calcium and absorbance was good. The linear regression equation was Y=0.032X+0.0292 （r = 0.999 95）. The average recovery rate was 99.77%， RSD was 0.94%， RSD was 0.33% and the dissolution rate was over 90%. Conclusion This method can be used to determine the dissolution of Rosuvastatin Calcium Solid Dispersion Granules.

[Key words] Rosuvastatin calcium; Dissolution; Solid dispersion; Granule; Ultraviolet spectrophotometry

高脂血癥又稱為高脂蛋白血癥，作為目前常患的全身性疾病，其是由于脂肪代謝異常造成脂質(zhì)高于正常水平而導(dǎo)致的，長(zhǎng)期發(fā)展可加速患者的全身動(dòng)脈粥樣硬化病變[1]，他汀類(lèi)藥物是高脂血癥調(diào)節(jié)的首選藥物。而瑞舒伐他汀作為第三代他汀類(lèi)代表藥物，由英國(guó)阿斯利康A(chǔ)stra Zeneca公司原研，2003年在加拿大批準(zhǔn)上市，商品名定為可定;該年8月經(jīng)美國(guó)食品和藥物管理局（AFDA）審核批準(zhǔn)上市[2]。瑞舒伐他汀作為還原酶抑制劑，被稱為3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA），和其他他汀類(lèi)藥物相比，其調(diào)節(jié)血脂能力更佳，逆轉(zhuǎn)動(dòng)脈粥樣硬化能力更好，還可消減或減退斑塊，降低心血管病發(fā)率等[3-5]。瑞舒伐他汀鈣作為目前較新的他汀類(lèi)藥物，其國(guó)內(nèi)制劑產(chǎn)品的市場(chǎng)規(guī)模突破60億元。而藥物制劑的種類(lèi)除了常用的片劑、膠囊劑以及液體制劑外，各種新劑型層出不窮，如微囊劑[6-7]、透皮給藥控釋劑[8-9]、脂質(zhì)體[10-11]以及磁性給藥劑[12-13]等，固體分散體作為藥物制劑技術(shù)中的新劑型之一，這類(lèi)速效制劑可以使藥物高度分散在載體中，增加難溶藥物的溶解度和溶出速率，提高生物利用度[14-21]。因此，瑞舒伐他汀鈣固體分散體溶出度的質(zhì)量控制尤為重要，在既往研究[22-25]的基礎(chǔ)上，本研究建立了紫外分光光度法測(cè)定瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒的溶出度，為質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV-1800PC-DS2型紫外分光光度計(jì)（上海美譜達(dá)儀器有限公司）;RC-8DS型溶出度測(cè)試儀（天津市拓普儀器有限公司）;BSA224S型電子天平[規(guī)格210 g×0.1 mg，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司];BSA124S-CW型電子天平（規(guī)格120 g×0.01 mg，德國(guó)賽多利斯公司）;RE5299型水浴型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）;GHG9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（太倉(cāng)精密儀器設(shè)備有限公司）;KQ-50E型超聲波儀（昆山市儀器有限公司）;13 mm×0.45 μm型水系針式樣品過(guò)濾器（上海楚定分析儀器有限公司）;BKH-C型玻璃儀器快速烘干器（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）。

1.2 試藥

瑞舒伐他汀鈣對(duì)照品（批號(hào)：101028-201202，含量>97%，中國(guó)食品藥品檢定研究院）;羥丙甲纖維素（批號(hào)：170212，I型，粘度30 mPa·s，安徽山河藥用輔料有限公司）;共聚維酮（批號(hào)：20150901，S630，上海昌為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司）;乳糖（批號(hào)：20170101，BR，含量≥99%，上海晶納試劑有限公司）;麥芽糖醇（批號(hào)：20160513，含量為95%;上海沃凱化學(xué)試劑有限公司）;淀粉（批號(hào)：161209，含量≥99%，上海滬試試劑有限公司）;聚乙烯吡咯烷酮（批號(hào)：20160101，含量≥99%，上海潤(rùn)捷化學(xué)試劑有限公司）;十八酸鎂（批號(hào)：20170301，含量≥95%，上海滬試試劑有限公司）;滑石粉（批號(hào)：170916，含量≥99%，商丘市亮峰衛(wèi)生用品有限公司）;純化水：自制。

瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒：自制。制備方法：稱取1.0 g瑞舒伐他汀鈣，溶解于二氯甲烷液，另稱取共聚維酮2.0 g、羥丙甲纖維素4.0 g，邊攪拌邊加入含有瑞舒伐他汀鈣的二氯甲烷溶液中;轉(zhuǎn)入水浴型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，設(shè)置30℃溫度進(jìn)行旋蒸，去除溶劑二氯甲烷，取出瑞舒伐他汀鈣固體分散體。稱取輔料乳糖0.5 g、麥芽糖醇1.0 g、淀粉12 g，于研缽中分別研細(xì)，稱取瑞舒伐他汀鈣固體分散體1.0 g，用等量遞增法進(jìn)行混合。另取聚乙烯吡咯烷酮0.3 g、十八酸鎂0.02 g、滑石粉0.02 g，加入混合好的原輔料，邊混合邊加入少量純化水，制成軟材后以40目篩篩過(guò)，所得濕顆粒產(chǎn)物均勻平鋪在不銹鋼盤(pán)中，50℃溫度下于恒溫干燥箱中保溫干燥20 min，過(guò)篩整粒，得到瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

2.1.1 對(duì)照品溶液配制? 取瑞舒伐他汀鈣對(duì)照品1.0 mg，置于100 mL量瓶，加入80 mL純化水，超聲波儀超聲15 min溶解，定容，搖勻，備用。

2.1.2 供試品溶液配制? 稱取一定量自制的瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，按對(duì)照品溶液配制方法配制供試品溶液。

2.1.3 空白輔料溶液配制? 另取按處方比例配制的不含瑞舒伐他汀鈣的瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒的空白輔料0.5 mg，置于50 mL量瓶，加純化水適量，超聲15 min溶解，0.45 μm水相濾膜過(guò)濾，取少量濾液，加純化水稀釋定容于10 mL容量瓶中，搖勻，即得空白輔料溶液。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)

在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)，依據(jù)紫外分光光度計(jì)操作流程對(duì)對(duì)照品溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，發(fā)現(xiàn)最大吸收波長(zhǎng)在241 nm處;輔料在241 nm波長(zhǎng)處測(cè)定無(wú)影響。故確定瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒的檢測(cè)波長(zhǎng)為241 nm。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取瑞舒伐他汀鈣對(duì)照品10.0 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶，其余按“2.1.2”項(xiàng)下制備方法制備對(duì)照品儲(chǔ)備液。依次精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0、2.2 mL，分別置于10 mL容量瓶，以純化水定容，搖勻，于241 nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度，以瑞舒伐他汀鈣濃度為橫坐標(biāo)（X），以其對(duì)應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)（Y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程Y=0.032X+0.0292（r = 0.99 995）。瑞舒伐他汀鈣濃度在6.0～22.0 mg/L與吸光度線性關(guān)系良好。見(jiàn)圖1。

2.4 精密度和穩(wěn)定性試驗(yàn)

2.4.1 精密度試驗(yàn)? 根據(jù)2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》（三部）（以下簡(jiǎn)稱“《中國(guó)藥典》”）中的技術(shù)指南（9101藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則）可以得知，精密度和穩(wěn)定性試驗(yàn)的RSD可接受范圍為≤6.0%。

分別取低、中、高3種不同濃度的對(duì)照品溶液，測(cè)定溶液日內(nèi)和日間的吸光度，重復(fù)測(cè)定每個(gè)溶液3次，計(jì)算日內(nèi)精密度和日間精密度。低、中、高3種不同濃度的日內(nèi)和日間精密度RSD均<1.0%，均符合相關(guān)要求。見(jiàn)表1。

2.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)? 取瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒適量，按“2.1.2”供試品溶液的制備項(xiàng)下方法處理，分別制成濃度為12 mg/L的供試品溶液A和濃度為18 mg/L的供試品溶液B，分別在0、1、2、4、6 h于241 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度。其中A供試品溶液的RSD為0.36%，B供試品溶液的RSD為0.31%，兩種不同濃度瑞舒伐他汀鈣溶液測(cè)得吸光度數(shù)值的RSD均<1%，。表明瑞舒伐他汀鈣溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取一定量瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，共6份，分別按“2.1.2”供試品溶液的制備項(xiàng)下方法處理，制成10.0 mg/L濃度的供試品溶液，于241 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，其RSD為0.33%。表明該方法的重現(xiàn)性良好。見(jiàn)表2。

2.6 回收率試驗(yàn)

取已知含量的瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒約1 g共9份，分別精密稱定，再分別加入高、中、低濃度的瑞舒伐他汀鈣對(duì)照品，按“2.1.2”供試品溶液的制備項(xiàng)下方法處理，于241 nm波長(zhǎng)處測(cè)定，平均加樣回收率為99.77%，RSD為0.94%。表明該方法測(cè)定瑞舒伐他汀鈣的含量回收率高，準(zhǔn)確性好。見(jiàn)表3。

2.7 溶出度的測(cè)定

精密稱取瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒適量（相當(dāng)于瑞舒伐他汀鈣20 mg），參照2015年版《中國(guó)藥典》（四部）中的方法（通則0931第二法），溶出測(cè)試儀參數(shù)設(shè)定：溶出液溫度為（37.0±0.5）℃，槳法轉(zhuǎn)動(dòng)速度為50 r/min，依法操作。于3、5、10、15、20、30、45、60 min分別抽取溶出液5 mL（同時(shí)在溶出杯中補(bǔ)充5 mL同溫空白介質(zhì)保持體積不變），用水系針式樣品過(guò)濾器（0.45 μm）過(guò)濾，其續(xù)濾液，于241 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算并繪制溶出曲線。

選擇以純化水為溶出介質(zhì)，瑞舒伐他汀鈣的溶出度效果良好，其溶出度隨時(shí)間的變化曲線見(jiàn)圖2。取6袋瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，依據(jù)上述溶出度測(cè)定方法重復(fù)測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果顯示，各平行點(diǎn)測(cè)試的RSD均<2.0%。采用紫外分光光度法測(cè)定瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒溶出度時(shí)，溶出10 min后的溶出量均>90%，即較短的時(shí)間內(nèi)即可達(dá)到較高溶出量，提示瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒溶出效果好。

3 討論

溶出度作為制劑藥物最重要的檢測(cè)項(xiàng)目之一，根據(jù)溶出度試驗(yàn)判斷、篩選處方、驗(yàn)證結(jié)果是藥物制劑工藝設(shè)計(jì)、改進(jìn)常用的方法。本研究制備了瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒，考察了采用紫外分光光度法進(jìn)行瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒溶出度的檢測(cè)方法，并對(duì)檢測(cè)波長(zhǎng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線、回收率、精密度和穩(wěn)定性以及重現(xiàn)性進(jìn)行了考察。此外，本研究還考察了以0.1 mol/L鹽酸溶液和一定pH值的醋酸緩沖溶液為溶出介質(zhì)，瑞舒伐他汀鈣溶出情況均不太理想，最終優(yōu)化確定以純化水作為溶出介質(zhì)。選擇純化水作為溶出介質(zhì)，成本低廉，溶出效果佳，重現(xiàn)性好，體外溶出的試驗(yàn)顯示瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒溶出效果好，固體分散體技術(shù)能夠改進(jìn)藥物的溶解性，提高藥物的治療效果。

作為先進(jìn)的制劑技術(shù)之一，固體分散技術(shù)從1961年由日本科學(xué)家Sekiguchi和Obi提出用尿素為載體運(yùn)用熱熔法制備固體分散體以來(lái)，至今已經(jīng)發(fā)展到以表面活性劑為載體材料的第三代新技術(shù)。傳統(tǒng)的溶劑法、熔融法等在速釋、緩（控）釋以及腸溶等固體分散體制備上已經(jīng)成熟，藥物溶出性大大提高。而各種新技術(shù)技術(shù)如超臨界流體技術(shù)、噴霧冷凍干燥技術(shù)以及高速靜電紡絲技術(shù)也越來(lái)越多應(yīng)用于固體分散體的制備中。運(yùn)用靜電紡絲技術(shù)制備固體分散體，固體分散體的粒徑可以達(dá)到納米級(jí)，比表面積增大，増溶效果佳。將超臨界流體技術(shù)和噴霧冷凍干燥技術(shù)等用于制備固體分散體，如聯(lián)苯雙酯、非諾貝特和丹參酮等目標(biāo)藥物，都呈現(xiàn)出不同的特點(diǎn)。應(yīng)用固體分散體技術(shù)制備固體分散體，除了關(guān)注提高藥物的溶出度外，應(yīng)從源頭上關(guān)注瑞舒伐他汀鈣固體分散體的體內(nèi)動(dòng)力學(xué)及生物利用度，關(guān)注保持固體分散體長(zhǎng)期穩(wěn)定性、在胃腸道的溶解度、對(duì)胃腸道的刺激性等不良反應(yīng)以及固體分散體老化問(wèn)題等，為固體分散體技術(shù)制備提供更好的參考。

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（收稿日期：2019-01-18? 本文編輯：王? ?蕾）