胡曉楠 赫云燦 郭文麗

摘 要：玉米赤霉烯酮能夠對人、動物的身體健康造成嚴重影響，所以需要通過有效的檢測方式完成對當前市場中糧食制品質量的分析?；趯Ω咝б合嗌V-熒光法作用原理和相關設備的使用方法的了解，本文提出了這一檢測體系的具體使用方法，并在這一基礎上研究了這一方法的精確檢測形式，提高對玉米赤霉烯酮的檢測精度。

關鍵詞：高效液相色譜-熒光法;糧食檢測;玉米赤霉烯酮

1 引言

針對玉米赤霉烯酮的檢測已經(jīng)開發(fā)出了多種檢查方法，但是從作用效果來看，各類檢測方法都存在一定的檢測精度問題和檢測效率問題，基于此開發(fā)出了高效液相色譜-熒光法。在具體的檢測中需要通過對各類樣本的高質量處理，并且讓各類設備都處于高效運行狀態(tài)，確保最終結果的科學性與精確性。

2 高效液相色譜-熒光法在糧食中玉米赤霉烯酮檢測中的使用

2.1 使用原料與設備

本文選用的原料為當前市場中常見的玉米面，以探測其中是否存在被檢測的有毒物質。選用的設備包括玻璃纖維濾紙、石油醚、氯化鈉等各類藥品，使用的設備有高效液相色譜儀、熒光檢測儀以及色譜柱等，通過對這些儀器的應用可以完成玉米赤霉烯酮的檢測工作，并在此基礎上分析玉米面是否符合當前相關規(guī)定的要求，并在具體分析的情況下，提高對這一樣本的整體研究質量[1]。

2.2 原料的檢測過程

原料檢測工作的第一步為玉米赤霉烯酮儲備液的制備工作，要精確轉移一定量的標準液，并且將其與乙醇溶液融合，制作成毒素儲備液，并且將其儲備在-20 ℃的冰箱中。之后稱取足量的玉米，放置在250 mL的具塞錐形瓶中，最后加入0.2 g氯化鈉，并用乙腈水溶液浸泡，將混合物震蕩5 min，之后對其進行離心處理，并且需要對玉米溶液中的不溶性物質進行過濾，將獲取的溶液稀釋后，分析不同體積比對玉米赤霉烯酮的提取效率，最終通過檢測了解玉米面中的毒素含量。對于存放的干燥玉米來說，檢測中通常要對玉米進行研磨，之后通過處理工作濾除雜物，以提高對有毒物質的檢測精準度[2]。

2.3 檢測因素的確立

檢測因素的確立需要探索不同環(huán)境以及藥品對檢測精度的影響，其中需要落實的工作為檢測過程的條件優(yōu)化工作，分析的內容包括玉米溶解溶液的體積配比、過濾以及浸泡過程中的流速、熒光檢測過程中的條件等，通過對所有這些參數(shù)的控制和調整，以及與標準液的樣本對比，可以了解當前的玉米質量。

在完成具體的對比和顯色工作后，需要對相關的曲線進行繪制和描述，在此基礎上了解當前玉米是否符合相關標準的要求。就實際的作用效果來看，該項工作需要從中選擇最為高效科學的檢測方法，要求所有工作人員都能對當前的相關要求和理論體系有所了解，方能夠得到相關的實驗數(shù)據(jù)和結論。

3 糧食中的玉米赤霉烯酮檢測試驗

3.1 試驗設計

將玉米赤霉烯酮（F-2）標準品毒素、玻璃纖維濾紙、硅鎂吸附劑、石油醚與F-2免疫親和柱等作為試驗材料，采用高效液相色譜儀、熒光檢測器、氮氣吹干儀和有譜超純水機等開展試驗。其中，F(xiàn)-2標準品毒素的純度在98%以上，硅鎂吸附劑在120 ℃條件下活化2 h后使用。試驗中采用的甲醇和乙腈材料為色譜純，其余試劑為分析純。

3.2 試驗過程

在檢測過程中，首先制備F-2儲備液，將100 μL的F-2標準品毒素溶于1 mL的甲醇中，然后將儲備液在冰箱-20 ℃條件下儲存。在樣品處理過程中，首先從空白樣品提取2.0 g試樣，加入0.2 g氧化鈉、30 mL乙腈-水溶液，經(jīng)過振蕩和超聲提取后，過3次折疊定性濾紙和2次玻璃纖維濾紙，然后加入60 mL石油醚脫脂，在層析柱上除雜，經(jīng)過10 min離心處理后提取3 mL上層清液。將清液加入到超純水中稀釋，然后取6 mL稀釋液通過免疫親和柱，經(jīng)過5 min后收集洗脫液。脫洗液在50 ℃水浴條件下用氮氣吹干，定容到1 mL，經(jīng)過注射器濾膜后上樣檢測。此外，還要比較不同提取溶液對F-2毒素的提取效果。在高效液相色譜法檢測過程中，要對檢測條件進行優(yōu)化。其中，流動相為乙腈-水-甲醇溶液（體積比為46∶46∶8，流速為0.6 mL/s）、乙腈-水-甲醇溶液（體積比為44∶46∶10，流速為0.8 mL/s）和水-甲醇溶液（體積比為8∶2，流速為1.0 mL/s）。熒光檢測條件分別為激發(fā)波長280 nm、發(fā)射波長為460 nm，激發(fā)波長274 nm、發(fā)射波長440 nm，激發(fā)波長23 6nm、發(fā)生波長418 nm。經(jīng)過抽濾和超聲波處理后確定的檢測條件為：流動相乙腈-水-甲醇溶液（體積比為44∶46∶10），流速為0.6 mL/s，熒光檢測條件的激發(fā)波長為274 nm、發(fā)射波長為440 nm。

3.3 試驗結果

從試驗檢測結果來看，得到的線性方程為y=1 416 362.246x+2 771.577（R2=1.000）。該檢測方法的檢測限為5.7 μg/L，定量限為19 μg/kg。從樣品回收率檢測結果來看，回收率分別為83.91%、85.21%、88.74%，相對標準偏差分別為2.33%、4.01%、1.4%。通過對46份樣品開展檢測，得出呈陽性的樣品為44分，檢出率為95.65%，且F-2毒素含量最大值和最小值分別為1 478 μg/kg、122 μg/kg，含量平均值為348.38 μg/kg。

4 高效液相色譜-熒光法在糧食中玉米赤霉烯酮的應用結果

4.1 標準方程和檢測曲線

在標準方程和檢測曲線的確立與分析工作過程中，需要完成對相關標準曲線的繪制，而該標準曲線的繪制需要使用到已經(jīng)配制完成的標準毒素樣本，通過對其的使用可以最大限度的排除由檢測環(huán)境等因素造成的干擾，并且通過對相關玉米分析結果的獲取，可以更好的了解當前這類玉米樣本的整體質量。

從最終的作用效果上來看，加入溶劑的體積比會對最終的結果造成一定影響，但是對于這一影響過程中的不同體積比來說，也可以從中找到與標準樣本檢測成果最為相似的內容，本文從中選擇到的最佳檢測方案為，乙腈-水-甲醇的體積比為44∶46∶10，對樣本的檢測波長為274 nm，440 nm，檢測流動相的流速為0.6 mL/min。

4.2 回收率與精密度分析

在這一研究中需要完成對回收率的分析工作，從中選擇出最為高效優(yōu)質的方案。在具體的研究中可以發(fā)現(xiàn)，分別向檢測的樣本玉米面中添加不同質量的玉米赤霉烯酮毒素時，其最終的結果和檢測標準液的回收率結果有所差異，但是回收率整體較為接近，但相應的差異值有很大區(qū)別，檢測過程中可發(fā)現(xiàn)某樣本回收率與回收理論值之間差異越小，則代表著最終檢測結果和實際的毒素含量越接近。

4.3 實驗成果分析

通過對具體檢測結果的分析可以發(fā)現(xiàn)，在當前市場中的各類糧食制品中，存在一定數(shù)量的玉米赤霉烯酮含量過高的現(xiàn)象，當前和今后糧食生產(chǎn)廠家以及相應的檢測檢疫部門要提高對這類玉米面的檢測水平和檢測深度，從而讓相應的糧食制品可以更好的確保安全性與健康性。

5 結論

綜上所述，玉米赤霉烯酮的檢測過程中，需要采用的設備包括高效液相色譜、熒光檢測儀以及相應的實驗材料等，材料的檢測方法為在制備好標準液的情況下，通過向被檢測玉米面中滴加不同濃度的標準液，并對比滴加標準液后的玉米回收率和原本的玉米毒素回收率，從中選擇最為精確的結果。

參考文獻

[1]吳限鑫，林秋君，郭春景，等.國內外主要糧油產(chǎn)品中真菌毒素限量、檢測標準及風險評估現(xiàn)狀分析[J/OL].中國糧油學報：1-9[2019-09-25].http：//kns.cnki.net/kcms/detail/11.2864.ts.20190819.1523.032.html.

[2]劉勝利，何成華，施志玉，等.玉米赤霉烯酮的高效液相色譜-熒光法檢測技術研究[J].南京農(nóng)業(yè)大學學報，2011，34（6）：100-104.

作者簡介：胡曉楠（1984—），女，天津人，漢族，碩士，工程師。研究方向：食品安全。

赫云燦（1988—），女，天津人，碩士，工程師。研究方向：食品安全。

郭文麗（1982—），女，天津人，碩士，工程師。研究方向：食品非法添加及農(nóng)藥殘留。