陳列　章小國　陳麗萍

【摘 要】目的：探討吸煙對支氣管哮喘血清Toll樣受體9（TLR9）表達的影響。方法：收集于2017年我科吸煙哮喘患者30例、非吸煙患哮喘患者30例，作為實驗組;選取同期于我院體檢的健康非吸煙者30例作為對照組。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）法測定吸煙哮喘患者、非吸煙哮喘患者、健康非吸煙者血清中TLR9表達，從免疫水平分析吸煙對哮喘患者的影響。 結(jié)果：吸煙哮喘組血清TLR9表達較非吸煙哮喘組升高（P<0.05），吸煙哮喘組血清TLR9表達較健康非吸煙組升高（P<0.05），非吸煙哮喘組血清TLR9表達較健康非吸煙者升高（P<0.05）。結(jié)論：吸煙可通過調(diào)節(jié)TLR9表達增加而增加免疫應(yīng)答，進而促進氣道炎癥發(fā)生，這可能在哮喘的發(fā)生、發(fā)展中起到一定作用。

【關(guān)鍵詞】? 支氣管哮喘;Toll樣受體9;免疫調(diào)節(jié)

【中圖分類號】R562.25 【文獻標識碼】B【文章編號】1002-8714（2019）11-0109-02

哮喘是以Th2細胞損傷為主的慢性炎癥性疾病.吸煙能夠促進許多慢性病的發(fā)生。吸煙可以分為主動吸煙和被動吸煙。煙草煙霧中含有許多有害物質(zhì)，吸煙可以引起以Thl/Th2功能失衡介導(dǎo)的IgE依賴型速發(fā)變態(tài)反應(yīng)以及嗜酸性粒細胞浸潤為主的慢性氣道炎癥發(fā)生，造成哮喘急性發(fā)作;吸煙還可以促進白三烯分泌增多，引起平滑肌收縮，黏液分泌增多，促進氣道結(jié)構(gòu)細胞增殖，參與氣道重構(gòu)[1]。TLR9是Toll樣受體家族一員，是Ⅰ型跨膜蛋白，由胞外區(qū)，跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)組成，也是識別細菌非甲基化的 CpG DNA 并介導(dǎo)其免疫刺激活性的受體。TLR9目前已在許多疾病中被研究，人類線粒體 DNA（ mtDNA） 與TLR9在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、高血壓、心肌炎和心肌損傷、急性肺挫傷、腎小球足細胞損傷的發(fā)生、發(fā)展中均起到一定作用[2-4]。本文以吸煙支氣管患者作為研究對象，通過測定血清TLR9表達，明確吸煙對支氣管哮喘的影響，明確TLR9在哮喘發(fā)生的過程中，對慢性氣道炎癥的作用。

1 研究對象及方法

1.1研究對象 2016年1月至2017年12月期間于沈陽醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院呼吸科住院患者中被診斷為支氣管哮喘患者60例，吸煙者30例，非吸煙者30例。同期于我院體檢的健康非吸煙者30例。哮喘患者均符合中國支氣管哮喘防治指南[3]，要求滿足條件：（1）年齡18～70歲，性別不限，且無吸煙史。（2）有較好的依從性，能配合肺功能檢查。（3）近半年未使用全身糖皮質(zhì)激素。（4）行肺功能檢查前4h內(nèi)未飲酒者。（5）行肺功能檢查前6h內(nèi)未吸入短效β2受體激動劑及12h內(nèi)未吸入長效β2受體激動劑。（6）自愿簽署知情同意書。并排除其他疾病引起的喘息、胸悶及咳嗽。

1.2方法

1.2.1 標本采集 所有研究對象采血前空腹8-12小時，晨起取肘靜脈血5ml，靜置 1 h 后，3000 r /min離心10 min，分離血清，-80 ℃ 冰箱保存待使用。

1.2.2 試驗方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測血清中ELISA 法測定血清中TLR9表達。過程嚴格按照說明書進行操作。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析，進行兩獨立樣本t檢驗，結(jié)果以-x±s表示，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

試驗結(jié)果（表1）提示 吸煙哮喘組TLR9表達水平低于非吸煙哮喘組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;吸煙哮喘組TLR9表達水平低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;非吸煙哮喘組TLR9表達水平低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

TLRs是固有免疫家庭中的模式識別受體， 參與人體抵御病原入侵的第一道屏障。人體內(nèi)共有 10個TLRs成員（TLR1 ～TLR10） ， 可以識別不同的病原體。TLR9 的配體主要來源于細菌/病毒 DNA和 mtDNA。細菌/病毒 DNA 誘導(dǎo)的 TLR9 信號是機體的固有免疫機制之一，能幫助機體抵御感染等致病因素; 而 mtDNA 配體誘導(dǎo)的 TLR9 信號似乎總是對機體有害，可導(dǎo)致組織炎癥，或者直接促進細胞損傷[5-8]。

本文通過測定健康人群血清TLR9表達，比較哮喘患者TLR9表達變化，結(jié)果提示哮喘患者血清TLR9表達較健康對照組增加，同時以吸煙哮喘、非吸煙哮喘患者作為研究對象，通過檢測血清TLR9表達，得出結(jié)論吸煙可使哮喘患者血清TLR9表達增加，這可能是吸煙誘導(dǎo)哮喘發(fā)生、發(fā)展的原因之一。此項結(jié)果可能成為臨床治療的理論依據(jù)。

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