馬禮萍,張 雪,何 靜

(成都市雙流區(qū)第一人民醫(yī)院眼科，四川成都 610200)

單純皰疹病毒性角膜炎是由Ⅰ型單純皰疹病毒感染引起的角膜炎癥，也是臨床常見的致盲性眼病之一，原發(fā)性感染常發(fā)生于嬰幼兒時期，但嬰幼兒時期極少發(fā)病，形成潛伏感染，在日照、外傷、發(fā)熱、月經(jīng)期或情緒緊張等誘因刺激下發(fā)作[1]。有研究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激損傷、免疫異常在單純皰疹病毒性角膜炎的發(fā)生和進展中發(fā)揮重要的作用。患者血清、淚液等組織液中某些炎性細(xì)胞因子水平異常，通過實驗室檢測相關(guān)指標(biāo)水平有助于單純皰疹病毒性角膜炎的診斷和病情評估[2]。

單純皰疹病毒性角膜炎機體處于免疫功能紊亂狀態(tài)，T細(xì)胞可啟動局部免疫反應(yīng)，引起組織損傷。干擾素-γ(IFN-γ)是由Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，主要介導(dǎo)機體細(xì)胞免疫反應(yīng)和炎性反應(yīng)，其水平下降反映機體細(xì)胞免疫功能處于低下狀態(tài)[3]。丙二醛(MDA)是生物膜脂質(zhì)過氧化損傷的副產(chǎn)物，是臨床常用的氧化應(yīng)激指標(biāo)[4]。本研究探討了單純皰疹病毒性角膜炎患者血清IFN-γ、MDA水平及意義，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年2月至2018年12月在本院治療的單純皰疹病毒性角膜炎患者120例(觀察組)，其中角膜上皮炎82例，角膜基質(zhì)炎38例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)診斷符合裂隙燈顯微鏡等檢查確診；(2)年齡大于18歲；(3)患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有眼部手術(shù)史；(2)合并有惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病、肝腎功能障礙等疾?。?3)合并有青光眼、虹膜炎、白內(nèi)障等其他眼部疾病。另選取同期體檢健康者100例作為對照組，觀察組和對照組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2檢測方法 所有研究對象均于清晨抽取空腹肘靜脈血2 mL，以轉(zhuǎn)速3 000 r/min、離心半徑10 cm離心10 min，取血清凍存于-80 ℃冰箱，統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清IFN-γ和MDA水平。試劑盒生產(chǎn)廠家：南京建成生物工程研究所，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。檢測儀器：美國伯騰公司ELX800多功能酶標(biāo)儀，于540 nm讀取吸光度(A)值，采用標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算樣本IFN-γ和MDA水平。

2 結(jié) 果

2.1觀察組和對照組血清IFN-γ和MDA水平比較 觀察組血清IFN-γ明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);觀察組血清MDA明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 觀察組和對照組血清IFN-γ和MDA水平比較

2.2觀察組不同類型患者血清IFN-γ和MDA水平比較 觀察組角膜基質(zhì)炎患者血清IFN-γ明顯低于角膜上皮炎患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而觀察組角膜基質(zhì)炎患者血清MDA明顯高于角膜上皮炎患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 觀察組不同類型患者血清IFN-γ和MDA水平比較

2.3相關(guān)性分析 將觀察組血清IFN-γ和MDA進行相關(guān)分析，結(jié)果顯示，血清IFN-γ和MDA呈負(fù)相關(guān)(r=-0.239，P<0.05)，見圖1。

圖1 血清IFN-γ和MDA相關(guān)分析

3 討 論

單純皰疹病毒性角膜炎是眼科臨床常見的嚴(yán)重角膜病變，近年來其發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢，由于角膜淺層有豐富的三叉神經(jīng)末梢分布，一旦發(fā)生感染后可引起皰疹性水皰、眼痛、流淚，如形成瘢痕可嚴(yán)重影響患者的視功能。根據(jù)病變侵犯范圍可將其分為角膜上皮炎和角膜基質(zhì)炎[5]。如不及時給予有效治療，可能引起角膜穿孔甚至失明[6]。單純皰疹病毒對人體的傳染性強，原發(fā)感染僅見于對單純皰疹病毒無免疫力的兒童，以6個月至5歲兒童最常見。繼發(fā)感染多見于大齡兒童和成人。原發(fā)感染后病毒終生潛伏，在日照、感冒、發(fā)熱、瘧疾、情緒波動、月經(jīng)、應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、退翳及創(chuàng)傷等非特異性刺激下發(fā)作。成年人血清抗體陽性率較高，但僅有部分出現(xiàn)臨床癥狀，因此血清抗體對單純皰疹病毒性角膜炎的診斷和病情評估意義不大[7]。

單純皰疹病毒性角膜炎的發(fā)病機制比較復(fù)雜，已有的研究認(rèn)為與單純皰疹病毒感染、局部免疫異常狀態(tài)、氧化應(yīng)激反應(yīng)等有關(guān)[8]。有研究表明，單純皰疹病毒性角膜炎患者的淚液、血液中氧化應(yīng)激因子、免疫因子水平處于異常狀態(tài)[9]。由于單純皰疹病毒性角膜炎主要以局部免疫反應(yīng)為主，淚液中各指標(biāo)水平變化比血液中明顯[10]。但由于淚液標(biāo)本獲取量較少，易受到污染，臨床獲取不易，臨床上一直致力于研究血清指標(biāo)的變化在單純皰疹病毒性角膜炎診斷和病情評估中的作用[11]。

病毒感染后機體出現(xiàn)明顯的免疫異常狀態(tài)，T細(xì)胞參與單純皰疹病毒性角膜炎發(fā)病和進展。T細(xì)胞可啟動局部免疫反應(yīng)，引起組織免疫炎性損害[12]。CD4+T淋巴細(xì)胞是調(diào)節(jié)機體炎性反應(yīng)的主要細(xì)胞亞群，其分泌的細(xì)胞因子參與免疫反應(yīng)過程。CD4+T淋巴細(xì)胞亞群分為Th1和Th2兩大類，其中Th1細(xì)胞主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫反應(yīng)和炎性反應(yīng)，對細(xì)菌、病毒等致病微生物產(chǎn)生殺滅作用，發(fā)揮機體自身抗感染作用；Th2細(xì)胞主要介導(dǎo)體液免疫反應(yīng)、下調(diào)異常升高的免疫反應(yīng)，并可促進炎癥修復(fù)。Th1/Th2的平衡狀態(tài)參與維持機體免疫穩(wěn)態(tài)[13]。

IFN-γ是由Th1細(xì)胞功能分泌的細(xì)胞因子，可調(diào)控30個基因的表達水平，產(chǎn)生多種細(xì)胞反應(yīng)。有研究發(fā)現(xiàn)，IFN-γ可促進NK細(xì)胞活性，促進抗原呈遞和提高巨噬細(xì)胞溶酶體活性介導(dǎo)與細(xì)胞毒相關(guān)的免疫應(yīng)答，具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)控等生理作用，參與機體抗感染過程[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，單純皰疹病毒性角膜炎血清IFN-γ水平明顯低于健康人群。這一結(jié)果提示，機體細(xì)胞免疫功能低下是引起單純皰疹病毒性角膜炎主要原因之一。單純皰疹病毒性角膜炎中角膜基質(zhì)炎患者血清IFN-γ水平明顯低于角膜上皮炎患者。這一結(jié)果提示，機體細(xì)胞免疫功能低下更易引起角膜深層的病毒感染，病情更加嚴(yán)重。

氧化應(yīng)激失衡與單純皰疹病毒性角膜炎的發(fā)生和進展密切相關(guān)，可能與單純皰疹病毒感染后導(dǎo)致的抗氧化能力受損有關(guān)。在氧化應(yīng)激狀態(tài)下，氧自由基大量生成，攻擊生物膜的不飽和脂肪酸而引起脂質(zhì)過氧化損傷[15]。MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的副產(chǎn)物，可影響細(xì)胞DNA合成，影響蛋白質(zhì)活性。自由基反應(yīng)活躍進一步加重角膜組織損傷，使病情惡化[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，單純皰疹病毒性角膜炎血清MDA水平明顯高于健康人群。這一結(jié)果提示，氧化應(yīng)激損傷是引起單純皰疹病毒性角膜炎主要原因之一。單純皰疹病毒性角膜炎中角膜基質(zhì)炎患者血清MDA水平明顯高于角膜上皮炎患者。這一結(jié)果提示，機體氧化應(yīng)激損傷程度嚴(yán)重更易引起角膜深層的病毒感染，病情更加嚴(yán)重。

本研究還對單純皰疹病毒性角膜炎患者血清IFN-和MDA水平進行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)血清IFN-γ和MDA呈負(fù)相關(guān)。這一結(jié)果提示，單純皰疹病毒性角膜炎患者細(xì)胞免疫功能越差，機體氧化應(yīng)激損傷越嚴(yán)重。

4 結(jié) 論

本研究創(chuàng)新點在于通過分析單純皰疹病毒性角膜炎患者血清IFN-γ水平降低，而MDA水平升高，得出患者血清IFN-和MDA水平與角膜炎類型有一定關(guān)系，同時兩者間呈負(fù)相關(guān)。本研究也存在一定的不足之處，本研究樣本量較小，并且沒有進行長期隨訪，可能影響實驗結(jié)果，對更加長期應(yīng)用治療方案有待進一步觀察。