鄭鳳麗,黎素清,譚志軍,覃 聰,陳毅克,梁尚芝,韓 杰

(貴港市人民醫(yī)院兒內科，廣西貴港 537100)

小兒癲癇俗稱“羊癲瘋”，是由陣發(fā)性、暫時性腦功能紊亂所引發(fā)的驚厥發(fā)作[1]。研究表明，癲癇頻繁而持續(xù)發(fā)作時，伴隨腦內各種酶、神經遞質、氨基酸及化學物質迅速變化，可導致腦細胞損傷[2-3]。近年來，通過聯合癲癇病患者血清標志物與患者腦損傷嚴重程度的研究發(fā)現，在早期癲癇病發(fā)作時該類生化標記物檢測優(yōu)于計算機斷層掃描(CT)及核磁共振成像(MRI)等影像學檢查。這些生化標記物包括一些蛋白質、酶、神經遞質、神經肽等，其中C反應蛋白(CRP)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、S100B蛋白在癲癇引發(fā)的腦損傷中的作用，已經受到人們的重視，成為監(jiān)測癲癇病發(fā)作的生化標記物[4-6]。本研究旨在通過觀察癲癇患兒臨床發(fā)作后血清及腦脊液中CRP、NSE、S100B蛋白的變化并進一步分析二者之間的相關性,主要是依據患兒癲癇發(fā)作類型、持續(xù)時間及是否出現意識障礙、感知、情感的異常或錯覺、幻覺等精神癥狀來明確是否發(fā)生腦損傷及腦損傷發(fā)生的程度與上述生化指標之間的相關性，為臨床尋找一個客觀、準確的癲癇患兒腦損傷的生化監(jiān)測指標，并嘗試探討其在癲癇腦損傷的作用及意義，為癲癇發(fā)作后腦損傷的早期臨床干預提供理論依據，減少患兒的后遺癥。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年6月至2017年8月在本院住院治療的癲癇患兒35例作為癲癇組，所有患兒均有典型癲癇發(fā)作現象，并經腦電圖、頭顱CT或MRI檢查、腦脊液檢查確診為原發(fā)性癲癇，其中男14例，女21例；年齡1～12歲，平均(5.38±2.94)歲；病程6～38個月，平均(18.14±9.45)個月。另選取同期體檢健康兒童50例作為對照組，其中男23例，女27例；年齡1～12歲，平均(5.50±2.78)歲。兩組兒童性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，胸部X線片、血尿便常規(guī)、肝腎功能等生化檢驗結果無異常，無合并感染及免疫器官功能性障礙等。納入標準：結合患兒臨床表現和體征，診斷為原發(fā)性癲癇；患兒家屬了解研究內容和風險，愿意參與調查研究。排除標準：癲癇患者首次采血標本后15 d內再出現臨床發(fā)作者則排除本研究。本研究經醫(yī)院倫理委員會批準，研究對象均自愿參與并簽署知情同意書。

1.2方法 癲癇組于發(fā)病后第 1、 3、 7天及對照組在體檢當天早晨8:00～9:00空腹抽取靜脈血6 mL，并于 30 min 內離心取上清液，置-20 ℃冰箱內保存待測。癲癇組患兒在發(fā)病后第1、3、7天行腰穿并留取腦脊液，對照組患兒術前麻醉時留取腦脊液，放置在1.5 mL的PE管中并放置在-80 ℃冰箱保存。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清及腦脊液中S100B蛋白水平，試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供，檢測儀器為美國產ELX808酶標儀；采用化學發(fā)光法檢測NSE，試劑盒由深圳新產業(yè)生物醫(yī)學工程有限公司提供，檢測儀器為國產 MAGLUMI2000puls 型全自動化學發(fā)光免疫分析儀；采用免疫比濁法檢測血清及腦脊液中CRP，試劑盒由上海執(zhí)誠生物科技有限公司提供，檢驗儀器為日立7600-110，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，所有標本均同一批次完成檢測。

2 結 果

2.1血清S100B蛋白、NSE及CRP水平比較 癲癇組與對照組在發(fā)作后第1、3及7天血清標志物S100B蛋白、NSE及CRP水平比較見表1～3。癲癇組患兒發(fā)病后血清S100B蛋白、NSE及CRP水平均迅速升高，在發(fā)病后的第1、第3天均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；在發(fā)病后第7天時癲癇組患兒血清S100B蛋白、NSE及CRP水平均下降至正常水平，與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

表1 兩組研究對象血清S100B蛋白水平比較

表2 兩組研究對象血清NSE水平比較

表3 兩組研究對象血清CRP水平比較

2.2腦脊液S100B蛋白、NSE及CRP水平比較 癲癇組與對照組在發(fā)作后第1、3及7天腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平見表4～6。癲癇組患兒發(fā)病后腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平均迅速升高，在發(fā)病后的第1、3天均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；在發(fā)病后第7天時癲癇組患兒腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平均下降至正常水平，與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

表4 兩組研究對象腦脊液S100B蛋白水平比較

表5 兩組研究對象腦脊液NSE水平比較

表6 兩組研究對象腦脊液CRP水平比較

3 討 論

癲癇發(fā)病率高，調查顯示我國癲癇患病率為5‰，兒童和青少年為高發(fā)人群，長期反復癲癇性發(fā)作會導致進一步的腦損傷甚至持久性精神行為障礙，給患者本人及家屬造成了巨大的心理和社會負擔[7-10]。癲癇的發(fā)病機制非常復雜，關于癲癇發(fā)生發(fā)展的確切機制尚未完全闡明。無論是非抽搐性或是強至抽搐性癲癇發(fā)作，均會導致腦神經功能障礙并影響代謝，因而有理由推測，檢測腦損傷的指標有望成為癲癇發(fā)作的鑒別指標[11]。

NSE、S100B蛋白、CRP已被證實是一種敏感、特異、可靠的腦損傷生化標記物。它們在健康人血清中水平極微，當中樞系統(tǒng)細胞受損時，由于血腦屏障的破壞，進入血液循環(huán)，使得顱腦損傷患者血清NSE、S100B蛋白水平明顯升高[12-16]。大量研究表明，在腦外傷、腦出血、腦梗死等疾病中，血清和腦脊液NSE、S100B蛋白、CRP顯著升高且與腦損害范圍或疾病嚴重程度密切相關[17-18]。近年來，國內外也有少量研究表明癲癇發(fā)作時引起血清S100B蛋白、NSE升高，而關于CRP與癲癇的關系的研究極少，有研究發(fā)現，在排除任何系統(tǒng)感染的情況下，癲癇發(fā)作后血CRP顯著升高，而關于癲癇患者腦脊液中CRP水平情況目前尚未見報道，同時，目前也未見將這3種生化指標同時研究并得出與癲癇患兒腦損傷嚴重程度的報道[19-20]。

本文通過比較癲癇組患兒與對照組在癲癇發(fā)病后第1、3和7天血清標志物S100B蛋白、NSE及CRP水平，發(fā)現癲癇患兒發(fā)病后第3 天血清S100B蛋白、NSE及CRP水平較對照組迅速上升，但從第3天之后開始下降，并在第7天與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。通過與對照組比較，癲癇組患兒腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平與血清中水平表現出相一致的規(guī)律，且腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平在不同時刻均高于血清中水平。S100B蛋白、NSE是神經元細胞漿內的特異性分子，其中S100B蛋白參與細胞內鈣離子依賴性生物學行為的調節(jié)；NSE是糖酵解過程的關鍵酶，為神經元供能發(fā)揮重要作用。CRP是肝細胞合成和分泌的炎性反應介質，參與炎性反應的活化。通過研究發(fā)現癲癇組患兒血清及腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP的水平明顯高于對照組，S100B蛋白、NSE及CRP水平的異常升高與癲癇的發(fā)生密切相關，S100B蛋白與NSE的升高表明癲癇患兒發(fā)生了神經元損傷，而CRP水平的升高則表明患兒體內通過免疫炎性反應來影響其神經元功能。

4 結 論

癲癇病患兒血清及腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平的異常升高與神經細胞凋亡有關，通過檢測血清及腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平來反應神經元凋亡成都具有可行性，因而將血清及腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平作為癲癇發(fā)病標志具有可行性。將癲癇病患兒發(fā)病后，血清及腦脊液中S100B蛋白、NSE及CRP的檢測方法逐步推廣到縣級乃至部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院，不僅可以提高癲癇病的鑒別度，而且可操作性好,具有臨床實用推廣的價值。