陶 冶， 吳甘霖， 邱 東

(安慶師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 皖西南生物多樣性研究與生態(tài)保護(hù)安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 安慶 246133)

有機(jī)體氮(N)、磷(P)等最本質(zhì)的組成元素組成及其平衡關(guān)系是生態(tài)化學(xué)計(jì)量學(xué)的核心研究?jī)?nèi)容[1-3]，相關(guān)研究涵蓋微觀至宏觀多個(gè)層次，研究對(duì)象豐富[3-4]。近十幾年來(lái)，我國(guó)學(xué)者對(duì)化學(xué)計(jì)量學(xué)開(kāi)展了大量研究工作[4-7]。就植物化學(xué)計(jì)量學(xué)而言，多以不同生活型(如草本、木本；常綠、落葉)、功能群(如C3、C4)、地理區(qū)域的跨物種間研究為主[7-9]，而對(duì)同一物種內(nèi)葉片化學(xué)計(jì)量特征時(shí)空格局的研究較少[10-12]，對(duì)其影響因素的解析也較為欠缺。研究同一植物葉片化學(xué)計(jì)量特征及其影響因素，對(duì)揭示物種的生態(tài)策略和環(huán)境適應(yīng)性具有重要意義。

不同環(huán)境下同一物種葉片元素含量及其比例會(huì)有較大差異[3,7,12-13]，且會(huì)因生長(zhǎng)期不同而發(fā)生變化[10-11]，因而可反映植物對(duì)養(yǎng)分的吸收和利用狀況[12-13]。葉片N∶P經(jīng)常被用來(lái)表明植物生長(zhǎng)的受限元素，但是這種限制關(guān)系會(huì)隨外界環(huán)境(如降水、溫度、地形、土壤狀況等)變化而改變[3,12-15]。除此之外，從植物自身角度而言，葉片(lamina)是植物的主要光合作用部位，而葉柄(petiole)是葉系統(tǒng)的支撐構(gòu)件和水分、養(yǎng)分運(yùn)輸傳遞通道[16]。那么，在葉片尺度上葉片化學(xué)計(jì)量特征與自身功能屬性具有何種關(guān)系？

城市綠化植被是構(gòu)成城市生態(tài)系統(tǒng)的關(guān)鍵組分，對(duì)其開(kāi)展的相關(guān)研究集中在服務(wù)功能及價(jià)值評(píng)估、景觀格局動(dòng)態(tài)及生理生態(tài)等方面[17-18]，有關(guān)園林植物葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征及其影響因素的研究較少[19]，對(duì)常綠園林植物葉片化學(xué)計(jì)量特征在季節(jié)和生境上的變化格局還缺乏了解。為此，本研究以典型亞熱帶城市安慶市常綠綠化樹(shù)種香樟為研究對(duì)象，在市區(qū)內(nèi)選擇不同生境，通過(guò)夏季和冬季2次調(diào)查取樣，系統(tǒng)研究香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征、元素相互關(guān)系、養(yǎng)分限制類型及其與土壤和葉片性狀的關(guān)系，以期揭示常綠園林植物對(duì)城市環(huán)境的響應(yīng)及適應(yīng)策略，為指導(dǎo)城市綠化樹(shù)種的科學(xué)管理、保障城市生態(tài)系統(tǒng)的可持續(xù)發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 研究地區(qū)與研究方法

1.1 研究區(qū)概況

安慶市地處長(zhǎng)江中下游、皖鄂贛三省交界處，是安徽省西南部中心城市。安慶市北依大別山，南臨長(zhǎng)江，屬北亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候，具有季風(fēng)明顯、雨量充沛的特點(diǎn)；年平均氣溫14.5 ℃～16.6 ℃，年平均降水量1253～1535 mm，年平均相對(duì)濕度77%。常年主導(dǎo)風(fēng)向?yàn)闁|北風(fēng)，其次為西南風(fēng)[20]。安慶市區(qū)、郊區(qū)及周邊道路網(wǎng)綠化樹(shù)種多以香樟為主。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 樣品采集與處理

依據(jù)安慶市城市功能區(qū)規(guī)劃，結(jié)合人類活動(dòng)、人文經(jīng)濟(jì)等因素，于2016年7月選擇7個(gè)典型生境，每個(gè)生境3個(gè)取樣點(diǎn)，每個(gè)樣點(diǎn)4棵樹(shù)，每個(gè)生境共12棵。為減小和避免誤差，所有已選樹(shù)木大小及栽植年限均一致。分別于2016年7月和12月分兩次調(diào)查采樣，調(diào)查對(duì)象為每個(gè)生境6棵固定編號(hào)的香樟樹(shù)。用高枝剪在樹(shù)冠中部南北兩側(cè)分別剪取3～5個(gè)小枝，摘取當(dāng)年生小枝第3～5葉序的葉片，每個(gè)方位共20枚，裝入信封后放入裝有冰袋的泡沫保溫箱內(nèi)。

樣品帶回實(shí)驗(yàn)室后置于4 ℃保存，并在24 h之內(nèi)處理完畢。在每個(gè)樹(shù)冠方位的20枚葉中隨機(jī)選擇5枚，將葉片和葉柄剪開(kāi)，先測(cè)定形態(tài)性狀(見(jiàn)1.2.3)，然后測(cè)量葉片及葉柄鮮重和干重。夏季和冬季葉片樣品各420枚，合計(jì)840枚葉片。

1.2.2 葉片N、P含量測(cè)定

烘干后的葉片和葉柄分別稱重。將每個(gè)樹(shù)冠方位的5枚葉片樣品混合，用盤(pán)式震蕩研磨儀(RS200, 德國(guó)萊馳)研磨成粉末，裝入封口袋中置于干燥暗處保存。利用凱氏定氮法測(cè)定全N含量(mg/g)，鉬銻抗比色法測(cè)定全P含量(mg/g)[10-12]。

1.2.3 葉片主要功能性狀的測(cè)定

葉片主要功能性狀包括：葉長(zhǎng)(cm)、葉寬(cm)、葉長(zhǎng)寬比、葉厚(mm)、葉柄直徑(mm)、葉柄長(zhǎng)(cm)、葉面積(cm2)、比葉面積、葉體積(cm3)、葉片鮮重(mg)、葉柄鮮重(mg)、葉片干重(mg)、葉柄干重(mg)、全葉干重(mg)、葉柄含水量(%)、葉片含水量(%)、葉綠素a (mg/g)、葉綠素b (mg/g)及葉綠素a/b。其中葉片形態(tài)參數(shù)采用直尺和數(shù)顯游標(biāo)卡尺測(cè)量，葉面積采用掃描儀測(cè)定，葉片鮮重、干重及含水量采用烘干稱重法測(cè)定(75 ℃的烘箱內(nèi)烘24 h)。光合色素含量用95%乙醇法提取[23]，所需樣品為每個(gè)樹(shù)冠方位剩余15枚葉片中隨機(jī)選取的5枚。

1.2.4 土壤樣品采集與處理

以土壤理化特征反映不同生境間的環(huán)境差異。在每棵樹(shù)的東南西北4個(gè)方位距樹(shù)0.5 m處各采集1份0～10 cm深土樣，混合為1份。土樣自然風(fēng)干、過(guò)篩，采用鮑士旦的方法測(cè)定土壤有機(jī)碳(SOC, mg/g)、全氮(TN, mg/g)、全磷(TP, mg/g)、速效氮(AN, mg/kg)、速效磷(AP, mg/kg)、pH及電導(dǎo)率(EC, μS/cm)[22]，并計(jì)算土壤化學(xué)計(jì)量比。

1.3 數(shù)據(jù)分析與處理

對(duì)不同季節(jié)香樟葉片化學(xué)計(jì)量特征進(jìn)行描述統(tǒng)計(jì)分析，隨后進(jìn)行單因素方差分析，對(duì)比生境間及季節(jié)間的差異。葉片N、P之間的關(guān)系分別采用線性方程和異速生長(zhǎng)方程進(jìn)行擬合。對(duì)不同季節(jié)香樟葉片化學(xué)計(jì)量特征與土壤因子(n= 42)、葉片功能性狀(n= 84)進(jìn)行相關(guān)性分析，判別主要影響因素。數(shù)據(jù)分析和作圖采用Excel 2013和SPSS 19.0軟件實(shí)現(xiàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同季節(jié)和生境香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征

夏季和冬季香樟葉片N含量分別為10.910和11.104 mg/g，葉片P含量分別為1.044和1.071 mg/g，葉片N∶P為10.624和10.471，屬于典型的N缺乏或N限制。3個(gè)葉片化學(xué)計(jì)量參數(shù)在季節(jié)間均無(wú)顯著差異(表1)。不同季節(jié)3個(gè)化學(xué)計(jì)量參數(shù)的變異系數(shù)均在0.158和0.275之間，屬于中等偏弱變異，其中葉片P含量的變異系數(shù)最小。

表1 不同季節(jié)香樟葉片N∶P化學(xué)計(jì)量描述統(tǒng)計(jì)特征

注：季節(jié)間化學(xué)計(jì)量特征相同字母表示差異不顯著

不同小寫(xiě)字母表示夏季葉片化學(xué)計(jì)量特征在7個(gè)生境間差異顯著(P< 0.05)；不同大寫(xiě)字母表示冬季葉片化學(xué)計(jì)量特征在7個(gè)生境間差異顯著(P< 0.05)；*表示季節(jié)間差異顯著(P< 0.05)。A：商業(yè)區(qū)；B：居民區(qū)；C：文教區(qū)；D：休閑區(qū)；E：工業(yè)區(qū)；F：餐飲區(qū)；G：郊區(qū)；下同

圖1香樟葉片NP化學(xué)計(jì)量特征在不同生境及季節(jié)間的差異

Figure 1 Variations of leaf N-P stochiometry ofC.camphorain different habitats and seasons

不同生境間的單因素方差分析顯示(圖1)，夏季香樟葉片N含量以居民區(qū)最高(B)，冬季以工業(yè)區(qū)(E)、餐飲區(qū)(F)和郊區(qū)(G)最高。葉片P含量在生境間的變異較小，夏季時(shí)以餐飲區(qū)(F)最高、文教區(qū)(C)最低，而冬季各生境間無(wú)顯著差異。不同生境間香樟葉片N∶P的變化與葉片N含量總趨勢(shì)相似。香樟葉片化學(xué)計(jì)量特征在季節(jié)之間也表現(xiàn)出一定的差異性(圖1)。A至D 4個(gè)生境葉片N含量和N∶P均表現(xiàn)為夏季高于冬季，而E至G 3個(gè)生境則相反。葉片P含量在季節(jié)間差異不明顯?？梢?jiàn)，安慶市區(qū)香樟葉片N含量及N∶P對(duì)季節(jié)和生境響應(yīng)較為敏感，而葉片P含量則相對(duì)穩(wěn)定。

2.2 香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征間的關(guān)系

香樟葉片N、P之間以及他們與N∶P之間(冬季P-N∶P除外)均具有顯著的正相關(guān)關(guān)系。異速生長(zhǎng)分析表明(表2)，夏季葉片N-P之間為等速生長(zhǎng)關(guān)系(異速生長(zhǎng)指數(shù)=1.188，與1.0差異不顯著)，而冬季則表現(xiàn)為N分配速率快于P的異速生長(zhǎng)關(guān)系(異速生長(zhǎng)指數(shù)=1.773)，體現(xiàn)了N、P元素含量在季節(jié)間分配的不均勻性。夏季和冬季香樟葉片N-N∶P之間擬合斜率差異不顯著，且斜率與1.0差異不顯著，呈正的等比例變化關(guān)系。夏季葉片P含量與N∶P之間為負(fù)相關(guān)，而冬季二者沒(méi)有顯著相關(guān)性。

表2 不同季節(jié)香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征間的異速生長(zhǎng)關(guān)系

2.3 香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征與土壤因子的關(guān)系

夏季土壤理化因子對(duì)香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征影響微弱，僅土壤TN∶TP與葉片P含量呈顯著負(fù)相關(guān)(表3)。土壤有機(jī)碳含量及其化學(xué)計(jì)量比對(duì)冬季香樟葉片化學(xué)計(jì)量特征有一定影響，多呈顯著正相關(guān)。冬季土壤TN∶TP同樣與葉片P含量呈顯著負(fù)相關(guān)。除此之外，土壤TN、TP及AP與個(gè)別葉片化學(xué)計(jì)量特征也有一定的正相關(guān)關(guān)系。

2.4 香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征與葉片功能性狀的關(guān)系

夏季葉片色素含量與化學(xué)計(jì)量特征沒(méi)有顯著相關(guān)性，但冬季其與葉片N∶P呈顯著負(fù)相關(guān)(表4)。葉含水量與冬季葉片N含量及N∶P呈顯著正相關(guān)。夏季葉片越大(包括形態(tài)大小和生物量)葉片N含量及N∶P越高，而葉片P含量與葉片性狀間均無(wú)顯著關(guān)聯(lián)。冬季部分葉片形態(tài)與生物量指標(biāo)與葉片N含量及N∶P呈正相關(guān)關(guān)系。與夏季不同的是，冬季葉片P含量與多數(shù)形態(tài)和生物量性狀呈顯著負(fù)相關(guān)，表明葉片越大P含量越低?？傮w而言，香樟葉片大小與冬夏兩季葉片N含量和N∶P具有較強(qiáng)正相關(guān)關(guān)系，與夏季葉片P含量沒(méi)有顯著相關(guān)性，但與冬季葉片P含量有顯著負(fù)相關(guān)。

表3 不同季節(jié)香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征與土壤因子的關(guān)系

注：*:P< 0.05; **:P< 0.01； 下同

表4 不同季節(jié)香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征與葉片屬性的關(guān)系

3 討論

本研究表明，安慶市區(qū)香樟葉片N、P含量及N∶P平均值分別為11.0、1.05 mg/g及10.5。相比之下，香樟葉片N、P及N∶P均低于世界均值(N為20.62或20.09 mg/g，P為1.99或1.77 mg/g，N∶P為13.8或12.7)[1]，也低于亞熱帶常綠闊葉林植物葉片N∶P(18.0)[23]。福州市區(qū)綠化喬木(含香樟)葉片P含量(0.95 mg/g)與本研究接近，但其N(17.3 mg/g)和N∶P(18.2)較高[24]。長(zhǎng)沙市區(qū)香樟葉片N(16.4 mg/g)和N∶P(34.94)均遠(yuǎn)高于本研究，但其葉片P含量(0.47 mg/g)不到本研究的1/2[25]。南昌市常綠園林植物除葉片P含量(1.43 mg/g)高于本研究外，其葉片N(11.39 mg/g)和N∶P(9.48)均與本研究較為接近[19]。可見(jiàn)，在不同研究區(qū)域或不同城市，常綠園林植物葉片養(yǎng)分特征差異較大。

植物養(yǎng)分限制常依據(jù)N∶P確定，即N∶P<14表示N限制，N∶P>16指示P限制，而14

土壤因子對(duì)植物葉片化學(xué)計(jì)量特征的影響會(huì)隨研究區(qū)域或生態(tài)系統(tǒng)類型變化而變化[27]。本研究表明，夏季香樟葉片N、P化學(xué)計(jì)量特征基本不受土壤因子影響，而冬季土壤SOC及其化學(xué)計(jì)量比、TN及TP對(duì)香樟葉片N、P有一定影響。P多為南方地區(qū)的限制性元素，安慶市香樟生境土壤TP含量為1.17 g/kg，雖低于地殼平均含量(2.8 g/kg)[8]，但高于我國(guó)土壤P含量(0.56 g/kg)[26]，表明本研究區(qū)土壤并不缺P(pán)。本研究土壤N∶P(1.74)遠(yuǎn)低于全球平均水平(5.9)和我國(guó)平均水平(3.9)[28]，表明安慶市區(qū)土壤缺N。類似地，長(zhǎng)沙市區(qū)香樟土壤TP含量?jī)H為0.11 g/kg[25]，這也解釋了為何長(zhǎng)沙市區(qū)香樟葉片P含量遠(yuǎn)低于安慶。因此，由土壤養(yǎng)分狀況可證實(shí)安慶香樟葉片缺N。

植物自身屬性特征會(huì)顯著影響葉片養(yǎng)分狀況。香樟葉片大小性狀與冬夏兩季葉片N和N∶P具有較強(qiáng)的正相關(guān)關(guān)系，與夏季葉片P含量沒(méi)有顯著相關(guān)性，但與冬季葉片P含量有顯著負(fù)相關(guān)。相關(guān)研究表明，隨植物葉片大小增大，其凈光合速率升高[29]。因此，香樟葉片越大其凈光合速率和光合產(chǎn)物也應(yīng)越高，進(jìn)而需要更多的N素，二者表現(xiàn)為正相關(guān)性。水分是植物生理代謝的基礎(chǔ)，因此香樟葉片和葉柄含水量與冬季葉片N和N∶P呈顯著正相關(guān)。

研究發(fā)現(xiàn)，全球植物葉片N-P之間為2/3斜率的異速生長(zhǎng)關(guān)系，即N分配速率是P的2/3[30]。而本研究發(fā)現(xiàn)，夏季(1.188)和冬季(1.773)香樟葉片N-P異速生長(zhǎng)指數(shù)均高于2/3，這可能因?yàn)槌鞘协h(huán)境相對(duì)嚴(yán)酷(如高溫、高污染)，迫使植物必須提高體內(nèi)N分配速率以提升代謝速率應(yīng)對(duì)環(huán)境脅迫。冬夏兩季香樟葉片N、P分配速率的差異符合生長(zhǎng)速率理論。夏季香樟生長(zhǎng)較冬季旺盛，此時(shí)植物體必須提升葉片P的含量和分配速率，因?yàn)橹参镄枰嗟母籔-RNA以提供足夠的合成大分子物質(zhì)所需的能量[30]。由于本研究已表明冬夏兩季香樟葉片P含量沒(méi)有顯著差異，那么這種生長(zhǎng)季上的差異就體現(xiàn)在P分配速率上，即夏季葉片P分配速率顯著高于冬季。這是否為城市環(huán)境下常綠園林植物特有的養(yǎng)分元素內(nèi)在權(quán)衡策略，仍需深入研究。