譚 丹，劉增再，薛 爽，陳 智，唐愛明，寧華杰

（長沙市動物疫病預防控制中心，湖南長沙 410013）

狂犬?。╮abies）又稱恐水癥，是由狂犬病病毒（rabies virus）引起的一種人獸共患急性傳染病，一旦發(fā)病，病死率幾乎達100%，目前尚無有效的治療手段，有效的疫苗免疫是預防和控制狂犬病最有效的手段，而免疫后抗體水平的高低是評價疫苗免疫效果的重要指標。

湖南省長沙市城區(qū)自實施國產(chǎn)狂犬疫病疫苗免費免疫6 年以來[1]，尤其是犬類狂犬病免疫職能下放至各城區(qū)管理后，犬類免疫數(shù)量逐年上升。為確保免疫效果，長沙市每年有計劃地開展狂犬病免疫血清中和抗體檢測。本研究連續(xù)4 年（2015—2018）對長沙市城區(qū)寵物犬進行狂犬病免疫抗體檢測，并對免疫抗體合格率影響因素進行分析，旨在為長沙市犬狂犬病預防和疫苗效果評價等提供參考。

1 材料與方法

1.1 對象與抽樣

根據(jù)各城區(qū)寵物醫(yī)院實際情況，設寵物醫(yī)院為定點監(jiān)測點，每年定期抽取犬血清，同時記錄血清的背景信息和免疫情況。2015 年定點監(jiān)測點數(shù)量為17 個，2018 年增加到41 個，4 年間共在長沙市6 個區(qū)的41 個監(jiān)測點抽檢樣品2 137 份（表1）。

表1 2015—2018 年長沙市各區(qū)縣監(jiān)測點數(shù)量及送檢血清數(shù)量 單位：個/份

1.2 檢測方法

采用法國 SYBIOTICS 犬貓狂犬病抗體檢測試劑盒進行血清抗體定量檢測，具體操作參照試劑盒說明書進行。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦標準[2]，保護狂犬病病毒感染所需的最低抗體滴度為0.5 IU/mL，如果低于0.5 IU/mL，則沒有保護。

1.3 結果判定

當陽性質控OD ≥0.300，并且陰性質控OD ＜陽性質控OD×0.5 時，試驗成立。樣品OD ≥陽性OD 時，判定為陽性，可認為該血清合格，抗體具體有保護力，反之為陰性。

1.4 統(tǒng)計學分析

檢測數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 及Excel 2007 進行分析處理。

2 結果與分析

2.1 抗體合格情況

長沙市城區(qū)整體免疫抗體合格率總體呈上升趨勢，由2015 年的50%以下，上升至2017 年、2018 年的70%以上，達到了國際標準[3]。各區(qū)定點監(jiān)測點的狂犬病抗體檢測結果（表2）顯示：開福區(qū)、芙蓉區(qū)抗體合格率呈現(xiàn)直線上升趨勢，由2015 年的40%以下，上升至2018 年的80%以上；天心區(qū)、岳麓區(qū)抗體合格率變化不明顯，穩(wěn)定在60%上下，普遍不高；雨花區(qū)每年的抗體合格率一直處于全市城區(qū)的最高水平，2018 年達到了84.38%。高新區(qū)從2017 年開始檢測，但因當年的采樣量極小，無法反映真實情況；2018 年的合格率為50%，較為偏低。整體來看，開福區(qū)、芙蓉區(qū)、雨花區(qū)免疫合格率較高，天心區(qū)、岳麓區(qū)、高新區(qū)免疫合格率偏低。

表2 2015—2018 年長沙市各城區(qū)犬狂犬病抗體合格率統(tǒng)計 單位：%（份）

2.2 抗體合格率影響因素

2.2.1 不同年齡段 對2017 年背景信息詳細的669 份血清的檢測結果進行比較分析，結果發(fā)現(xiàn)，狂犬病抗體合格率為72.39%，基本達到了免疫保護標準，其中6 月齡以下犬的抗體合格率為66.67%，6～12 月齡的抗體合格率為69.23%，1～2歲的為68.61%，2～5 歲的達到83.59%，5 歲以上的降為72.37%?？傮w來說，5 歲以前，犬抗體合格率隨年齡增長同比上升，5 歲以后開始下降。

2.2.2 不同性別 對669 份血清樣品的抗體檢測結果，按照不同性別分類，發(fā)現(xiàn)公犬的抗體合格率為74.67%，母犬合格率為71.43%，將兩者進行卡方檢驗，發(fā)現(xiàn)不同性別犬的狂犬病合格率差異不顯著（P=0.350，＞0.05），無統(tǒng)計學意義（表3）。

2.2.3 免疫后時間 考慮到狂犬病疫苗免疫后抗體產(chǎn)生增減規(guī)律，對669 份血清抗體檢測結果，按免疫后采樣時間進行分類，結果發(fā)現(xiàn)，1 個月內(nèi)的抗體合格率為69.43%，2～6 個月的為77.59%，半年以上的降為65.44%?？ǚ綑z驗發(fā)現(xiàn)，不同免疫后時間的犬狂犬病抗體合格率差異顯著（P=0.022，＜0.05），具有統(tǒng)計學意義（表3）。

2.2.4 免疫次數(shù) 對669 份血清抗體檢測結果，按照不同免疫次數(shù)進行分類整理，發(fā)現(xiàn)免疫1 次的抗體合格率最低，為67.06%，免疫2～3 次的為75.19%，免疫4～6 次的最高，為81.54%，7 次以上的下降為72.00%?？ǚ綑z驗發(fā)現(xiàn)，不同免疫次數(shù)的犬狂犬病抗體合格率差異顯著（P=0.019，＜0.05），具有統(tǒng)計學意義（表3）。

2.2.5 疫苗種類及廠家 為評價不同疫苗的免疫效果，剔除6份免疫國產(chǎn)疫苗的犬血清（基數(shù)太?。?，再根據(jù)疫苗的種類和廠家，整理了663 份血清抗體檢測結果，發(fā)現(xiàn)免疫國產(chǎn)疫苗的抗體合格率為74.47%，免疫進口疫苗的為73.05%，兩者相差不大，差異不明顯（P=0.700，＞0.05）；同時免疫進口法國B 疫苗的抗體合格率最高，為88.64%，免疫法國A 疫苗、美國A 疫苗及國產(chǎn)A 疫苗的抗體合格率均在70%以上，而免疫荷蘭A 疫苗的抗體合格率最低，為63.57%?？ǚ綑z驗發(fā)現(xiàn)，不同疫苗廠家的犬狂犬病抗體合格率差異顯著（P=0.018，＜0.05），具有統(tǒng)計學意義（表3）。

3 討論

據(jù)WHO 研究表明，實施對狂犬病易感動物的免疫接種是有效預防狂犬病的基本策略，當易感動物免疫覆蓋率達到70%以上時，即可有效抑制狂犬病的傳播[3]。而確保免疫覆蓋率的先決條件是免疫的有效性，即動物免疫狂犬病疫苗后，只有當狂犬病的抗體滴度≥0.5 IU/mL 時，才能保證動物有抵抗狂犬病病毒侵襲的能力。雖然依據(jù)抗體滴度的高低來評價一種疫苗免疫是否成功不是很全面，因為在抗狂犬病病毒感染方面，細胞免疫和體液免疫都起到非常重要的作用[4]，但抗體水平高低在一定程度上反映了免疫效果。

表3 不同因素對免疫抗體合格率的影響

為了解長沙市城區(qū)寵物犬狂犬病免疫效果，2015 年至2018 年4 年間，每年在城區(qū)設定監(jiān)測點進行狂犬病抗體水平監(jiān)測，共檢測動物血清樣品2 137 份。雖然2015 年和2016 年的免疫效果不是很好，抗體合格率沒有達到70%的標準，但2017年后抗體合格率維持在70%以上，并呈上升趨勢，說明長沙市城區(qū)寵物犬免疫管理措施逐漸完善，犬只的免疫覆蓋率和有效率大大提高，已基本形成了抵御狂犬病病毒侵襲的有效屏障。

從6 個區(qū)的監(jiān)測情況看，芙蓉區(qū)、雨花區(qū)和開福區(qū)免疫效果最好，而天心區(qū)、岳麓區(qū)和高新區(qū)免疫抗體合格率偏低，存在一定的感染風險，也說明這些地區(qū)在疫苗免疫過程中，可能存在疫苗質量較低、免疫程序不當、免疫操作及樣品采集不規(guī)范等問題。

本次監(jiān)測的范圍局限于長沙市城區(qū)，其結果只能反映城區(qū)內(nèi)寵物犬的狂犬病抗體水平，而對于長沙市周邊農(nóng)村城鎮(zhèn)犬只的免疫情況及免疫效果目前仍是空白，下一步需擴大監(jiān)測范圍，加大對農(nóng)村散養(yǎng)犬只的監(jiān)測力度。

從不同年齡和免疫次數(shù)的抗體檢測結果看，兩者是相吻合的，犬的狂犬病抗體合格率隨犬只年齡和免疫次數(shù)增長而提高。1 歲左右的犬只狂犬病抗體合格率低于70%，這可能是因為6 個月以內(nèi)的犬只有母源抗體保護，同時免疫1 次可能存在免疫失敗或者產(chǎn)生抗體滴度不高的現(xiàn)象；2～5 歲抗體合格率達到最高，同時免疫2 次以上的狂犬病抗體合格率明顯增高，免疫4～6 次后達到最高（81.54%），說明免疫次數(shù)越多，合格率越高。而免疫7 次以上免疫抗體合格率反而降低，這可能是因為犬只年齡偏大后免疫機能下降導致的。從免疫后不同采樣時間的檢測結果看，免疫后1個月內(nèi)，犬只抗體合格率最低。這是因為機體只有在21 d 后，才會漸產(chǎn)生較高的抗體[5]，或者部分犬可能存在免疫失敗[6]，而免疫2～6 個月后的抗體合格率最高，免疫7 個月之后逐漸降低，這符合免疫抗體的消減規(guī)律。因此，建議首免1 個月后，進行加強免疫，以后每年再次加強免疫。本研究發(fā)現(xiàn)，國產(chǎn)疫苗和進口疫苗的免疫效果相差不大。雖然本研究中的免疫國產(chǎn)疫苗的樣本量太少，會對結果造成一定的影響，但相關文獻[7-8]也報道，國產(chǎn)疫苗并不比進口疫苗的免疫效果差。不同廠家疫苗的免疫效果略有差異，大部分廠家的疫苗抗體合格率均能達到70%以上，也有部分國外廠家疫苗效果偏低，所以市民可以根據(jù)自身情況，選擇合適的疫苗。

4 結論

本研究發(fā)現(xiàn)：長沙市城區(qū)近幾年寵物犬只狂犬病免疫抗體合格率逐年上升，免疫效果較好；城區(qū)犬狂犬病免疫合格率與犬年齡、免疫次數(shù)、免疫后時間及疫苗廠家有一定關系，而性別、疫苗種類對抗體合格率影響不大。因此，在首次免疫后，需要進行抗體監(jiān)測，做好犬的加強免疫工作，以保證犬處于較高的免疫保護水平。