文貴輝，楊 海，劉增再

（1.湖南環(huán)境生物職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南衡陽 421005；2.衡陽師范學(xué)院，湖南衡陽 421000；3.長沙市動物疫病預(yù)防控制中心，湖南長沙 410000）

斷奶仔豬易發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)或受到病原菌感染，而這些通常會造成腸道功能障礙，營養(yǎng)物質(zhì)消化率和生長性能下降（陳凌鋒等，2017）。養(yǎng)殖中常用抗生素來抑制腸道致病菌繁殖，提高動物生長性能，但濫用抗生素可以導(dǎo)致微生物出現(xiàn)耐藥性，對人類健康構(gòu)成威脅，因此迫切需要尋求能替代抗生素的飼料添加劑來維持仔豬生長。植物性飼料添加劑（如多糖、精油、多酚）被認(rèn)為是具有潛力的抗生素替代物，可以抑制病原體、保持動物腸道健康。其中，多糖是一類廣泛存在于植物、動物和微生物中具有生物活性的大分子物質(zhì)，近年來研究表明，植物源多糖對正常細(xì)胞的細(xì)胞毒性低，對動物免疫調(diào)節(jié)無明顯副作用，受到廣泛關(guān)注（Zhang等，2019；趙文文等，2018）。研究表明，某些多糖能改善仔豬、肉雞等家畜的生長性能（Flint等，2008）。紫花苜蓿多糖是紫花苜蓿提取物中主要的活性成分，有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎等功能（Zhang等，2019）。目前紫花苜蓿多糖對仔豬生長性能的影響及其在飼料中的最佳添加水平尚不明確，因此，本試驗(yàn)將研究紫花苜蓿多糖對仔豬生長及腸道發(fā)育的影響，同時研究其最佳添加量。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 紫花苜蓿多糖：從內(nèi)蒙古市購買處于頭茬現(xiàn)蕾期的紫花苜蓿，用超聲波輔助提取法提取莖葉中的多糖，最后多糖得率為17.1%，純度大于95%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計 試驗(yàn)在四川省某規(guī)模化養(yǎng)豬場進(jìn)行，選擇100頭體重接近的28日齡三元雜交仔豬，稱重后隨機(jī)分為對照組和試驗(yàn)1、2、3組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)5頭仔豬。適應(yīng)期7 d，期間飼喂基礎(chǔ)飼糧，正式試驗(yàn)時，試驗(yàn)組分別在對照組基礎(chǔ)飼糧中添加0.025%、0.05%、0.075%的紫花苜蓿多糖，共計處理42 d，期間仔豬自由采食和飲水。試驗(yàn)所用基礎(chǔ)飼糧配方見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧配方和營養(yǎng)水平

1.3 樣品采集及指標(biāo)測定

1.3.1 生長性能 分別在正式試驗(yàn)開始和結(jié)束時稱量仔豬空腹體重，每天清晨記錄剩余料量和給料量。計算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及料肉比（FCR）。

1.3.2 小腸形態(tài) 試驗(yàn)結(jié)束時稱量仔豬空腹體重后，每組分別隨機(jī)選取5頭仔豬用戊巴比妥鈉處死。剖開腹腔分離小腸，分別取下十二指腸、空腸、回腸中段用緩沖液沖洗，之后剪下一段（2～3 cm）用組織固定液（10%甲醛-磷酸鹽緩沖液）固定。

將固定的小腸樣本進(jìn)行石蠟組織切片，染色后在顯微鏡下測量絨毛高度（VH）以及隱窩深度（CD），并計算絨毛高度和隱窩深度比（V/C）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 采用SAS 9.2中的一般線性模型對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 紫花苜蓿多糖對仔豬生長性能及小腸形態(tài)的影響 由表2可知，紫花苜蓿多糖處理組仔豬平均末重、ADG顯著提高，F(xiàn)CR降低（P＜ 0.05），而 ADFI無顯著變化（P ＞ 0.05）。相比對照組，試驗(yàn)1、2、3組仔豬平均末重分別增加7.8%、11.6%、10.2%（P＜0.05），ADG分別增加12.4%、18.2%、15.9%（P＜ 0.05），F(xiàn)CR顯著降低 10.1%、12.5%、10.2%（P＜ 0.05）。

2.2 紫花苜蓿多糖對仔豬小腸形態(tài)的影響 由表3可知，飼糧中添加紫花苜蓿多糖顯著改變小腸腸道形態(tài)，但添加量為250 mg/kg時對仔豬小腸VH、CD無顯著影響（P＞0.05）。相比對照組，試驗(yàn)2、3組仔豬十二指腸V/C分別降低8.9%、7.7%（P＜ 0.05），VH分別增加 7.1%、6.0%，但差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)2、3組仔豬空腸VH較對照組分別增加8.3%、7.0%（P＜0.05），CD分別降低 8.8%、7.7%（P＜ 0.05），試驗(yàn) 1、2、3組V/C較對照組分別增加7.6%、18.8%、15.9%（P＜0.05）。除此之外，相比于對照組，試驗(yàn)2、3組仔豬回腸VH分別增加9.4%、6.2%（P＜0.05），CD分別降低 10.0%、9.6%（P＜ 0.05），試驗(yàn) 1、2、3組 V/C分 別 增 加 10.4%、21.5%、17.5%（P＜ 0.05）。

3 討論

3.1 紫花苜蓿多糖對仔豬生長性能的影響 仔豬斷奶初期腸道及免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善，容易出現(xiàn)腸道功能障礙、腹瀉等問題，降低仔豬生長性能。多糖是紫花苜蓿中主要的生物活性物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)，紫花苜蓿多糖能顯著提高動物免疫器官指數(shù)，增強(qiáng)免疫器官和淋巴細(xì)胞功能，在提高動物免疫功能和生長性能方面具有較好效果（李潤林等，2018；李林祥等，2016）。一般來說，植物多糖中包含β-1，3-D聚糖，這些多糖在小腸內(nèi)不能被消化酶消化，但可以通過胞飲的方式被部分吸收。被吸收的多糖能促進(jìn)小腸上皮細(xì)胞發(fā)育和絨毛生長，但剩余的多糖進(jìn)入后腸成為微生物的代謝底物，發(fā)酵成揮發(fā)性脂肪酸，調(diào)節(jié)腸道菌群組成，這些發(fā)酵產(chǎn)物也可以被仔豬用于提供能量，提高生產(chǎn)性能（侯玉潔等，2016；Flint等，2008）。本研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加紫花苜蓿多糖能顯著增加仔豬平均末重及ADG，顯著改善FCR。張慧輝（2007）報道，在蛋雞1、14日齡時肌肉注射不同劑量的紫花苜蓿多糖，蛋雞28、45日齡體重顯著高于對照組，料肉比顯著降低。飼糧中添加0.05%苜蓿多糖飼喂肉雞，當(dāng)肉雞3周齡及6周齡的平均體重及ADG較對照組顯著提高，F(xiàn)CR較對照組顯著降低，而免疫器官指數(shù)、淋巴細(xì)胞增殖顯著提高（劉晴雪，2010）。王進(jìn)宇等（2017）以30周齡的蛋雞為研究對象，在飼糧中添加紫花苜蓿多糖，結(jié)果顯示，試驗(yàn)1～8周蛋雞的產(chǎn)蛋率顯著高于對照組，顯著提高試驗(yàn)17～20周蛋雞ADFI，但料蛋比下降。試驗(yàn)期間蛋品質(zhì)顯著提高，同時腸道內(nèi)容物pH以及大腸桿菌數(shù)量顯著降低。以上研究與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致，表明飼糧中添加紫花苜蓿多糖能促進(jìn)仔豬生長，而處理劑量及具體效果與動物種類和處理時間有關(guān)。

表2 紫花苜蓿多糖對仔豬生長性能及小腸形態(tài)的影響

表3 紫花苜蓿多糖對仔豬小腸形態(tài)的影響

3.2 飼糧中添加紫花苜蓿多糖對仔豬小腸形態(tài)的影響 腸道健康是反映動物健康狀態(tài)至關(guān)重要的指標(biāo)之一，而動物生產(chǎn)性能提高通常被認(rèn)為與腸道健康的改善相關(guān)。腸道形態(tài)在一定程度上可以反映腸道結(jié)構(gòu)和功能的狀態(tài)，絨毛高度及V/C值越高，表明腸道為營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收提供了更大的表面積（陳凌鋒等，2017）。仔豬斷奶后腸道VH下降，CD增加，可能是斷奶后腹瀉率增加、生長性能降低的主要原因之一。研究報道，黃芪、太子參等植物多糖添加到飼糧中能顯著增加雛鴨、仔豬等小腸VH、V/C，降低CD，促進(jìn)腸道發(fā)育（趙文文等，2018；陳凌鋒等，2017）。目前關(guān)于紫花苜蓿多糖對畜禽腸道形態(tài)影響的研究極少，本研究發(fā)現(xiàn)，紫花苜蓿多糖顯著提高仔豬小腸發(fā)育水平，小腸VH、V/C較對照組顯著提高，CD降低。王進(jìn)宇等（2017）的研究表明，蛋雞飼糧中添加紫花苜蓿多糖后腸道中乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量顯著增加，而沙門氏菌等有害菌數(shù)量顯著減少，表明紫花苜蓿多糖能促進(jìn)腸道有益微生物的增殖和發(fā)育，改善腸道微生物環(huán)境。此外，紫花苜蓿多糖的某些成分被微生物發(fā)酵后產(chǎn)生丁酸（Flint等，2008），在調(diào)節(jié)腸道菌群的同時對小腸上皮細(xì)胞的發(fā)育起到促進(jìn)作用（趙文文等，2018）。因此，紫花苜蓿多糖可能通過以上兩條途徑促進(jìn)小腸發(fā)育。

總的來說，添加量為500mg/kg飼喂效果優(yōu)于添加量為750 mg/kg，可能是由于添加量大時紫花苜蓿多糖分子間相互作用，吸水后形成凝膠增加了粘度（張慧輝，2007），從而影響其效果。綜上所述，飼糧中添加紫花苜蓿多糖改善仔豬小腸形態(tài)，促進(jìn)其生長，添加量為0.05%時效果最佳。