薛凌展　吳素瓊　張坤　樊海平　陳斌　田田　林旋

摘要：旨在研究氨氮對異育銀鯽‘中科3號’的毒理作用，為生產(chǎn)提供可參考的理論依據(jù)。采用水生生物毒性方法，在室內(nèi)靜水條件下，開展氨氮對異育銀鯽‘中科3號’幼魚的急性毒性試驗(yàn)，并檢測各組幼魚肝臟組織中過氧化氫酶（CAT）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）和丙二醛（MDA）的變化情況。結(jié)果顯示：異育銀鯽‘中科3號’幼魚經(jīng)氨氮脅迫后，其24、48、96h的總氨氮半致死濃度分別為276.51mg/L、190.62mg/L和148.62mg/L，非離子氨半致死濃度分別為2.52mg/L、1.74mg/L、和1.36mg/L;總氨氮安全濃度為14.87mg/L，非離子氨安全濃度為0.14mg/L。在氨氮脅迫下肝臟組織中MDA含量上升，比對照組提高了26.20%、18.68%和17.08%;而CAT和T-SOD活性則均顯現(xiàn)先激活后抑制的趨勢，高濃度、長時間氨氮脅迫對幼魚肝臟抗氧化酶活性影響較大，導(dǎo)致機(jī)體抗氧化能力的減弱。研究結(jié)果表明，異育銀鯽‘中科3號’對氨氮的耐受性高于青魚、草魚、鰱魚和鯉魚等其他常見大宗魚類，但是氨氮急性脅迫破壞了幼魚肝臟抗氧化系統(tǒng)，長期處于氨氮脅迫下將不利于幼魚健康生長。

關(guān)鍵詞：異育銀鯽魚‘中科3號’;氨氮;急性毒性;肝臟;抗氧化酶

中圖分類號：S917.4 ???文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ???論文編號：cjasl8070019

Ammonia Nitrogen： Effects on Acute Toxicity and Antioxidant Enzymes System in

Liver of Juvenile of Allogynogenetic gibel carp ‘CAS Ⅲ’

Xue Lingzhan1， Wu Suqiong2， Zhang Kun3， Fan Haiping1， Chen Bin1， Tian Tian1， Lin Xuan2

（1Freshwater Fisheries Research Institute of Fujian Province， Fuzhou 350002， Fujian， China; 2College of Animal Science， Fujian Agriculture and Forestry University， Fuzhou 350002， Fujian， China; 3Fujian Tianma Science and Technology Group Co.， Ltd， Fuzhou 350308， Fujian， China）

Abstract： The study aims at the toxicological effect of ammonia nitrogen on Allogeneic crucian carp ‘CAS Ⅲ’. The aquatic organism toxicity method was used under hydrostatic condition indoor. The acute toxicity test of ammonia nitrogen on juvenile of Allogynogenetic gibel carp ‘CAS Ⅲ’ was conducted， and the changes of?catalase （CAT）， total superoxide dismutase （T-SOD） and malondialdehyde （MDA） in liver tissues were tested. The results showed that after ammonia nitrogen stress， the median lethal concentration （LC50） of total ammonia?nitrogen was 276.51mg/L at 24h， 190.62mg/L at 48h and 148.62mg/L at 96h， and the LC50 of un-ionized ammonia was 2.52mg/L at 24h， 1.74 mg/L at 48 h， and 1.36 mg/L at 96 h. The safe concentration of total ammonia nitrogen and un-ionized ammonia was 14.87 mg/L and 0.14 mg/L， respectively， for juvenile. Under ammonia nitrogen stress， the content of MDA in the liver increased by 26.20%， 18.68% and 17.08% compare?with the control （P<0.05）， but CAT and T- SOD appeared to be activated at first and then inhibited， and antioxidase was induced more significantly at relatively higher concentration of ammonia nitrogen and long time?exposure， and it weakened the antioxidant capacity of the body. The results reveal that ammonia tolerance of Allogynogenetic gibel carp?‘CAS Ⅲ’ is higher than that of Mylopharyngodon piceus， Ctenopharyngodon idellus，?Hypophthalmichthys molitrix （Valenciennes， 1844）， Cyprinus carpio Linnaeus， and other conventional?freshwater fish. However， acute ammonia nitrogen stress damaged the liver antioxidant system and it is harmful?to the health and growth of juvenile fish.

Keywords： Juvenile of Allogynogenetic gibel carp ‘CAS Ⅲ’; Ammonia Nitrogen; Acute Toxicity; Liver; Antioxidase

0 ?引言

中國的鯽魚分為普通鯽魚（Carassius auratus）和黒鯽（Carassius carassius）兩個種以及銀鯽（Carassius?gibelio）一個亞種[1-2]，屬雜食性底層魚類，全國各地水域常年均可養(yǎng)殖，2016年全國產(chǎn)量達(dá)到300萬t[3]，是中國養(yǎng)殖的重要淡水魚之一。20世紀(jì)80年代中國發(fā)現(xiàn)銀鯽異精雌核發(fā)育生殖方式，用興國紅鯉作為異源精子刺激銀鯽卵子雌核發(fā)育產(chǎn)生全雌性后代，誕生了第一代異育銀鯽，其突出的生長性能使得該品種被廣泛養(yǎng)殖。進(jìn)入90年代，科研人員采用血清蛋白的電泳表型在方正銀鯽群體中區(qū)分出4個不同雌核發(fā)育克隆系，經(jīng)多年生長對比養(yǎng)殖試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)克隆系間存在明顯的生長差異，進(jìn)而選育出高體型異育銀鯽，即為第二代異育銀鯽，進(jìn)一步奠定了鯽魚品種中的主導(dǎo)地位，養(yǎng)殖效益突出，市場接受度較高。進(jìn)入21世紀(jì)，新的核質(zhì)雜交克隆技術(shù)被用于異育銀鯽育種，科研人員利用A系銀鯽的精子在D系銀鯽的卵質(zhì)中雄核發(fā)育產(chǎn)生全新的異育銀鯽品種[4-5]，定名為異育銀鯽‘中科3號’（Allogynogenetic gibel carp ‘CAS Ⅲ’），并于2008年獲得全國水產(chǎn)原種和良種審定委員會頒發(fā)的水產(chǎn)新品種證書（品種登記號：GS01-002-2007）[6]。該品種是由中國科，學(xué)院水生生物研究所淡水生態(tài)與生物技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室桂建芳院士團(tuán)隊精心選育的異育銀鯽新品種，也是國家大宗淡水魚產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系近年重點(diǎn)推廣的品種之一。該品種具有生長速度快、出肉率高、不易脫鱗、遺傳性狀穩(wěn)定、肝臟碘泡蟲發(fā)病率低和養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益高等特點(diǎn)深受漁民的喜愛。2011年福建省淡水水產(chǎn)研究所將異育銀鯽‘中科3號’引入福建省進(jìn)行養(yǎng)殖示范，經(jīng)過6年的養(yǎng)殖推廣，因其生長速度、抗病力及體型等生物性狀優(yōu)勢明顯，與同類品種相比養(yǎng)殖效益有了明顯的提高，獲得養(yǎng)殖戶的一致認(rèn)可，在福建地區(qū)的養(yǎng)殖規(guī)模逐年擴(kuò)大。

養(yǎng)殖水體中氮化合物分為有機(jī)氮和無機(jī)氮兩類，其中有機(jī)氮主要由氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸和腐殖酸等有機(jī)物中的氮組成，而無機(jī)氮主要包括銨態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和硝態(tài)氮等。氨氮作為水體中無機(jī)氮的主要存在形式也是水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中重點(diǎn)控制的水質(zhì)指標(biāo)，在水體中主要以非離子氨和離子氨的形式存在?！?014年中國環(huán)境狀況公報》顯示，中國廢水中氨氮排放量達(dá)到238.5t，被列為廢水中的第二大污染物[7]，對人和水生動物健康帶來威脅[8]。隨著集約化養(yǎng)殖的發(fā)展，養(yǎng)殖密度逐漸提高、投餌量增加、殘餌和排泄物大量積累，養(yǎng)殖水體中產(chǎn)生大量氨氮，進(jìn)而影響魚類生長和攝食。國外關(guān)于氨氮對水生動物的生理生化研究的報道較多，如IP[9]研究了氨氮對甲魚（Pelodiscus sinensis）的急性毒性及解毒機(jī)理，Wicks等[10]研究了喂食和禁食條件下氨氮對鮭魚（Oncorhynchus mykiss）的毒性特點(diǎn)，REDDY等[11]研究了南非鮑魚（Haliotismidae）對氨氮的耐受性，Wee等[12]解剖分析了在氨氮半致死濃度暴露下，鲇魚（Clarias gariepinus）腦中氨氮和谷氨酸鹽的含量變化情況等。氨氮對魚類毒理研究在國內(nèi)的報道也不少，例如氨氮誘發(fā)魚類鰓、肝、腎等組織結(jié)構(gòu)變化的研究[13-14]，氨氮影響機(jī)體免疫系統(tǒng)[15-16]和血液生化指標(biāo)等研究[17-18]。SOD和CAT是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶，機(jī)體受逆境脅迫時，SOD將自由基轉(zhuǎn)化為HO2O2，然后再由CAT將H2O2分解成氧和水，從而使機(jī)體免于遭受H2O2的毒害[19-20]。SOD和CAT兩種酶形成一個抗氧化鏈條保護(hù)機(jī)體，二者普遍存在于各個組織中，其中肝臟細(xì)胞中含量最高。通過檢測魚類肝臟中的T-SOD和CAT活性，可作為魚類氨氮急性毒性效應(yīng)的評價指標(biāo)。MDA是機(jī)體生物膜遭受自由基攻擊后，其膜脂過氧化反應(yīng)的重要產(chǎn)物之一[20]。通過檢測MDA含量的變化情況，可以間接反應(yīng)機(jī)體生物膜系統(tǒng)受損程度以及生物體的抗逆性。

目前針對異育銀鯽‘中科3號’的研究主要集中在胚胎發(fā)育[21]、苗種繁育[22]、養(yǎng)殖模式[23]和病害防治[24]等領(lǐng)域，而水質(zhì)指標(biāo)氨氮對異育銀鯽‘中科3號’的毒理研究尚未見報道。由于異育銀鯽‘中科3號’在集約化養(yǎng)殖過程中有機(jī)氮不斷積累，在微生物分解下非離子氨濃度逐漸升高，常常造成魚體急性或亞急性中毒現(xiàn)象，嚴(yán)重制約著該品種單位面積產(chǎn)量和肉質(zhì)品質(zhì)的提升，影響產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。本研究以異育銀鯽‘中科3號’幼魚為研究對象，開展氨氮對其急性毒性試驗(yàn)，旨在綜合分析氨氮對該品種的毒理作用，為深入研究異育銀鯽‘中科3號’氨氮中毒問題奠定基礎(chǔ)，并為苗種生產(chǎn)提供理論參考依據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 試驗(yàn)用魚

異育銀鯽‘中科3號’幼魚由福建省順昌縣兆興魚種養(yǎng)殖有限公司提供，當(dāng)年的夏花苗，規(guī)格均勻，體質(zhì)健壯，體表完好，鏡檢無寄生蟲等疾病，平均體重為（0.69±0.18）g，平均全長為（3.76±0.29）cm。試驗(yàn)前，將魚苗于試驗(yàn)容器中暫養(yǎng)2周，每天投喂人工配合飼料2次，連續(xù)充氣，早晚換水1次，換水量為50%，停止喂食24h后用于實(shí)驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)試劑

所用NH4Cl為分析純，現(xiàn)配成母液后按比例稀釋。過氧化氫酶（CAT）測試盒、總超氧化物歧化酶（T-SOD）測試盒、丙二醛（MDA）測試盒、蛋白定量測試盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 急性毒性試驗(yàn) 依照水生生物毒性方法[25]，試驗(yàn)容器為8L圓形塑料容器，各試驗(yàn)組隨機(jī)放入7尾魚苗。預(yù)試驗(yàn)得到24h的100%死亡濃度（LC100，24h）和96h的0%死亡濃度（LC0.96h）后確定試驗(yàn)濃度，按等對數(shù)間距設(shè)立濃度組，每個濃度組設(shè)3個平行組，不添加NH4Cl為空白對照。試驗(yàn)分組及濃度設(shè)置詳見表1。試驗(yàn)期間不投餌、不充氣，每隔24h更換1次試驗(yàn)溶液。試驗(yàn)用水為曝氣24h以上的地下水，水溫為（25.5±1）℃，pH7.2±0.1。觀察記錄24、48、96h的死亡數(shù)，并及時撈出死亡的魚苗。

1.3.2 肝臟樣品制備 取得氨氮對異育銀鯽‘中科3號’幼魚的24hLC50、48hLC50和96hLC50后，按24hLC50、48hLC50和96hLC50濃度分A、B、C組（見表2），每個濃度設(shè)3個平行組，不添加NH4Cl為空白對照。每組隨機(jī)放入15尾魚苗，試驗(yàn)條件同1.3.1。依次在24、48、96h取活魚的肝臟樣品，用生理鹽水潤洗，濾紙吸干水分后稱量肝組織質(zhì)量，按重量體積比制成10%的組織勻漿：冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500r/min，離心10min，取上清液待用。

1.3.3 酶活性測定 肝臟過氧化氫酶、總超氧化物歧化酶、丙二醛和蛋白含量測定均按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.4 數(shù)據(jù)處理

急性試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行Probit回歸分析[26]，獲得半數(shù)致死劑量（LC50）。

安全劑量（SC）=96hLC50×0.1（1）

式中：96hLC50為96h試驗(yàn)動物半數(shù)致死劑量。

非離子氨計算采用公式（2）[27]。

[NH3]=[NH4++NH3]/[10（pKa-pH）+1]（2）

pKa-0.09018+2729.92/r（3）

其中，T=273+t，t為試驗(yàn)水溫;pKa為離解常數(shù)，T為熱力學(xué)溫度。

對所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（one-wayANOVA），并對分析結(jié)果進(jìn)行多重比較。數(shù)據(jù)分析和圖表制作分別采用Microsoft Excel 2003、SPSS 19.0和Graphpad prism 6.0完成，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差

（mean±SD）表示。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 中毒癥狀

隨脅迫氨氮濃度提高和時間延長，異育銀鯽‘中科3號’幼魚對氨氮的急性毒性癥狀主要表現(xiàn)為在水面或沿著容器水面急游，對震動等刺激反應(yīng)劇烈;隨著脅迫時間的延長和體力消耗，游動速度逐漸減慢，對外界刺激反應(yīng)變遲鈍;隨后喪失游動平衡能力，時而旋轉(zhuǎn)抽搐，時而側(cè)躺桶底和間隙竄游，體色變淺;最后沉底不動，死亡時鰓蓋微張，體色發(fā)白。

2.2 急性毒性試驗(yàn)

氨氮對異育銀鯽‘中科3號’幼魚的急性毒性結(jié)果見表3和表4。經(jīng)24h氨氮脅迫后，只有392.5mg/L、351.67mg/L和315.08mg/L的死亡率高于50%，其中392.5mg/L幼魚反應(yīng)激烈，死亡率達(dá)到100%，其余8組的死亡率均低于50%，且162.99mg/L和146.03mg/L均未出現(xiàn)死亡個體，總氨氮24h半數(shù)致死濃度為277.12mg/L，非離子氨24h半致死濃度為2.53mg/L。當(dāng)脅迫時間達(dá)到48h，有7組的死亡率高于50%，其中有392.50mg/L、351.67mg/L、315.08mg/L和282.30mg/L試驗(yàn)魚全部死亡，其余4組的死亡率仍低于50%，總氨氮48h半數(shù)致死濃度為190.60mg/L，比24h時降低了31.22%，非離子氨48h半致死濃度為1.74mg/L，比24h時降低了31.23%。當(dāng)脅迫時間達(dá)到96h時試驗(yàn)結(jié)束，此時共有9組死亡率高于50%，其中6組死亡率達(dá)到100%，146.03mg/L和130.84mg/L的死亡率低于50%。130.84mg/L在試驗(yàn)過程中均未出現(xiàn)死亡個體，試驗(yàn)結(jié)果與對照組一致，總氨氮96h半數(shù)致死濃度為158.04mg/L，分別比24h和48h時降低了42.97%和17.08%，非離子氨96h半數(shù)致死濃度為1.44mg/L，比24h和48h時降低了43.08%和20.83%?？偘钡踩珴舛葹?5.80mg/L，非離子氨安全濃度為0.14mg/L。

2.3 肝臟抗氧化酶活性

氨氮對異育銀鯽‘中科3號’幼魚急性脅迫對肝臟抗氧化性的影響見圖1、圖2和圖3。經(jīng)氨氮脅迫后，異育銀鯽‘中科3號’幼魚肝組織中的CAT活性比對照組明顯提高，且隨著脅迫時間的延長，CAT活性呈現(xiàn)出先升后降的趨勢（見圖1）。脅迫24h和48h的CAT活性顯著高于對照組（P<0.05），48h達(dá)到最高，顯著高于其他組（P<0.05），比對照組提高了86.12%;脅迫時間延長至96h時CAT活性有所下降，與對照組差異不顯著（P>0.05）。氨氮脅迫導(dǎo)致異育銀鯽‘中科3號’幼魚肝組織T-SOD的變化與CAT相似（見圖2），脅迫氨氮24h，T-SOD活性明顯升高，與對照組相比差異顯著（P<0.05），隨著脅迫時間的延長，T-SOD活性出現(xiàn)緩慢下降，48h的T-SOD活性比24h下降了5.00%，仍顯著高于對照組（P<0.05）;當(dāng)脅迫時間延長至96h時，T-SOD活性進(jìn)一步下降，比24h時下降了10.14%，僅略高于對照組，差異不顯著（P>0.05）。氨氮脅迫異育銀鯽‘中科3號’幼魚肝組織MDA含量出現(xiàn)了顯著提高（見圖3），24、48、96h比對照組分別提高了26.20%、18.68%和17.08%，差異顯著（P<0.05）。隨著氨氮脅迫異育銀鯽‘中科3號’幼魚時間的延長，肝臟總MDA含量出現(xiàn)了下降的趨勢，但是差異不顯著（P>0.05）。

3 ?討論

3.1 氨氮對魚類抗氧化功能的影響

肝臟抗氧化酶活性檢測結(jié)果顯示，氨氮低濃度短時脅迫，肝臟組織中T-SOD和CAT活性被激活;而氨氮高濃度長時間脅迫試驗(yàn)中T-SOD和CAT活性受抑制，即異育銀鯽‘中科3號’幼魚肝臟的T-SOD和CAT活性出現(xiàn)先升后降的變化趨勢。該試驗(yàn)結(jié)果與韓春艷[16]、強(qiáng)俊[28]和姜會民[29]等氨氮對奧尼羅非魚、黃河鯉的毒性影響相似。氨氮早期脅迫效應(yīng)產(chǎn)生大量的自由基，誘導(dǎo)肝臟細(xì)胞中的T-SOD和CAT活性增加，出現(xiàn)氧化應(yīng)激現(xiàn)象，抵御自由基的侵襲;隨著氨氮脅迫時間和濃度的延長和提高，超出了機(jī)體的耐受性，抗氧化系統(tǒng)崩潰，氧化應(yīng)激反應(yīng)減弱，抗氧化酶活性也相繼降低。不同氨氮濃度和脅迫時間下，異育銀鯽‘中科3號’幼魚肝臟組織中的MDA含量均顯著高于對照組（P<0.05），這是因?yàn)楫愑y鯽‘中科3號’幼魚在氨氮脅迫下，肝臟細(xì)胞生物膜系統(tǒng)發(fā)生一系列氧化應(yīng)激，脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成大量的丙二醛（MDA）在細(xì)胞內(nèi)聚集。MDA可損傷機(jī)體細(xì)胞，進(jìn)一步影響抗氧化反應(yīng)。氨氮脅迫對異育銀鯽‘中科3號’幼魚肝臟的T-SOD和CAT活性及MDA含量影響顯著，反映了氨氮脅迫對幼魚肝臟抗氧化系統(tǒng)損傷嚴(yán)重，這是氨氮脅迫對異育銀鯽‘中科3號’幼魚的主要毒理效應(yīng)。

3.2 氨氮對魚類的毒性

氨氮對異育銀鯽‘中科3號’幼魚的急性毒性與氨氮濃度和脅迫時間呈線性關(guān)系，隨氨氮濃度提升幼魚死亡率急劇上升，死亡時間縮短;同樣，當(dāng)脅迫時間延長時，氨氮毒性效應(yīng)加強(qiáng)，致死濃度下降。

氨氮對魚類急性毒性的研究較多，鰱魚[Hypophthalmichthys molitrix （Valenciennes， 1844）][30]、草魚（Ctenopharyngodon idellus）[31]、青魚（Mylopharyngodonpiceus）[32]、和鯉魚（Cyprinus carpio Linnaeus）[33]等大宗淡水魚對氨氮比較敏感，其非離子氨的安全濃度范圍為0.033～0.068mg/L，遠(yuǎn)低于異育銀鯽‘中科3號’0.14mg/L，安全濃度僅為異育銀鯽‘中科3號’的23.57%～48.57%，說明異育銀鯽‘中科3號’對氨氮的耐受性較其他大宗淡水魚更高。這可能與異育銀鯽‘中科3號’習(xí)慣在水質(zhì)肥沃、有機(jī)質(zhì)豐富的池塘底層棲息和覓食的生物習(xí)性相關(guān)，因?yàn)樗w底層的氨氮及其他有害物質(zhì)濃度含量比中上層水體相對較高，遺傳進(jìn)化過程使其對氨氮的耐受力明顯高于中上層魚類。同樣是底層經(jīng)濟(jì)魚類黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）[18]，非離子氨的安全濃度為0.15mg/L，對氨氮的耐受性與異育銀鯽‘中科3號’相近。金魚（Carassius auratus）[34]非離子氨的安全濃度為0.028mg/L，其雖然是鯽魚的變異種，親緣關(guān)系與異育銀鯽‘中科3號’最近，但由于人們審美導(dǎo)致其長期處于“逆向選育”，逐漸丟了鯽魚所擁有的一些底層魚類生物特性所致，只適合在水質(zhì)良好的環(huán)境中生長。此外，異育銀鯽‘中科3號’的非離子氨安全濃度比麥穗魚（Pseudorasbora parva）（0.0346mg/L）[35]、鱖魚（SiniPecra chuatisi）（0.032mg/L）[36]等一些常見的溪河土著魚類高，說明異育銀鯽‘中科3號’相對于大多數(shù)經(jīng)濟(jì)魚類具有更較強(qiáng)的氨氮耐受性。

4 ?結(jié)論

養(yǎng)殖生產(chǎn)中，由于養(yǎng)殖密度較高、投餌量較大，導(dǎo)致魚體對環(huán)境因子抗逆水平下降。因此，從養(yǎng)殖安全和養(yǎng)殖效益角度考慮，維持良好的養(yǎng)殖生長環(huán)境，是異育銀鯽‘中科3號’養(yǎng)殖過程中提高養(yǎng)殖效率、降低養(yǎng)殖風(fēng)險、減少經(jīng)濟(jì)損失的重要技術(shù)要素。本文系統(tǒng)研究了氨氮對異育銀鯽‘中科3號’幼魚急性毒性及肝臟抗氧化酶系統(tǒng)的影響，試驗(yàn)結(jié)果顯示，總氨氮的安全濃度為15.80 mg/L，非離子氨的安全濃度為0.14 mg/L。雖然異育銀鯽‘中科3號’相對于大多數(shù)經(jīng)濟(jì)魚類具有更較強(qiáng)的氨氮耐受性，但是從肝臟抗氧化酶活性檢測結(jié)果分析，氨氮脅迫對幼魚肝臟的T-SOD和CAT活性及MDA含量均產(chǎn)生了顯著影響，說明氨氮脅迫破壞了幼魚肝臟抗氧化系統(tǒng)，長期處于這種環(huán)境中將不利于幼魚健康生長。因此在異育銀鯽‘中科3號’苗種培育過程中因注意水質(zhì)控制，可通過使用微生態(tài)制劑，提高溶解氧等手段，降低氨氮濃度，避免出現(xiàn)氨氮中毒現(xiàn)象，有助于提高養(yǎng)殖效益。

參考文獻(xiàn)

[1]孟慶聞，繆學(xué)祖，俞泰吉，等.魚類學(xué)（形態(tài)分類）[M].上海：上海科技出版社，1989：241.

[2]羅靜，張亞平，朱春玲，等.鯽魚遺傳多樣性的初步研究[J].遺傳學(xué)報，1999，26（1）：28-36.

[3]農(nóng)業(yè)部漁業(yè)漁政管理局.中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2017：25.

[4]Zhang J， Sun M， Zhou L， et al. Meiosis completion and various sperm responses lead to unisexual and sexual reproduction modes in one clone of polyploid Carassius gibelio[J].Scientific Reports，?2015，5（10）：10898-10912.

[5]Wang Z W， Zhu H P， Wang D， et al. A novel nucleo-cytoplasmic hybrid clone formed via androgenesis in polyploid gibel carp[J].?BMC Research Notes，2011，4：82-95.

[6]桂建芳.異育銀鯽養(yǎng)殖新品種-‘中科3號’簡介[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2009（5）：21.

[7]Guan B， Hu W， Zhang T L， et al. Acute and chronic unionized?ammonia toxicity to ‘a(chǎn)ll-fish’ growth hormone transgenic common?carp （Cyprinus carpio L.） [J].Chin Sci Bull，2010，55（35）：4032-4036.

[8]蔡繼晗，沈奇宇，鄭向勇，等.氨氮污染對水產(chǎn)養(yǎng)殖的危害及處理技術(shù)研究進(jìn)展[J].浙江海洋學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2010，29（2）：167- 172.

[9]IP Y K， Lee S M L， Wong W P， et al. Mechanisms of and defense?against acute ammonia toxicity in the aquatic Chinese soft-shelled?turtle （Pelodiscus sinensis） [J]. Aquatic Toxicology， 2008，86：185-196.

[10]Wicks B J， Randall D J. The effect of feeding and fasting on?ammonia toxicity in juvenile rain bow trout （Oncorhynchus mykiss）?[J]. Aquatic Toxicology， 2002，59：71-82.

[11]Reddy-Lopata K， Auerswald L， Cook P. Ammonia toxicity and its?effect on the growth of the South African abalone （Haliotis midae?Linnaeus）[J].Aquaculture，2006，261：678-687.

[12]Wee N L J， Tang Y Y M， Cheng H T， et al. Ammonia toxicity and?tolerance in the brain of the African sharptooth catfish （Clarias?gariepinus）[J].Aquatic Toxicology，2007，82：204-213.

[13]王昆.氨氮對鯉（Cyprinus carpio Linnaeus）幼魚部分組織及血液指標(biāo)的影響[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

[14]張武肖，孫盛明，戈賢平，等.急性氨氮脅迫及毒后恢復(fù)對團(tuán)頭魴幼魚鰓、肝和腎組織結(jié)構(gòu)的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報，2015，39（2）：233-244.

[15]趙海洋.氨氮對南方鯰（Silurus meridionalis Chen）幼魚血液生理、生化及非特異性免疫指標(biāo)的影響[D].重慶：西南大學(xué)，2006.

[16]韓春艷，鄭清海，陳桂丹，等.氨氮脅迫對奧尼羅非魚非特異性免疫的影響[J].南方水產(chǎn)科學(xué)，2014，10（3）：47-52.

[17]胡毅，黃云，鐘蕾，等.氨氮脅迫對青魚幼魚鰓絲Na+/K+-ATP酶、組織結(jié)構(gòu)及血清部分生理生化指標(biāo)的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報，2012，36（4）：538-545.

[18]李波，樊啟學(xué)，張磊，等.不同溶氧水平下氨氮和亞硝酸對黃顙魚的急性毒性研究[J].淡水漁業(yè)，2009，39（3）：31-35.

[19]徐楊.尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）對氨氮和亞硝酸氮脅迫的生理響應(yīng)[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

[20]葉繼丹，韓友文，趙吉偉，等.喹乙醇對鯉肝胰臟抗氧化酶系統(tǒng)的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報.2004.28（3）：231-235.

[21]薛凌展.溫度對異育銀鯽‘中科3號’胚胎發(fā)育的影響[J].福建師范大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2014，30（4）：76-83.

[22]張永江，鄒勇.異育銀鯽‘中科3號’苗種繁育技術(shù)[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2016，1：5-6.

[23]薛凌展，樊海平，鄧志武，等.池塘網(wǎng)箱氣體循環(huán)水培育異育銀鯽‘中科3號’夏花初探[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2017，6：81-82.

[24]白海峰，袁永鋒，張星朗，等.一例異育銀鯽‘中科3號’出血病診斷與防治[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2017，5：71.

[25]周永欣，章宗涉.水生生物毒性試驗(yàn)方法[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，1989：75-106.

[26]張力.SPSS在生物統(tǒng)計中的應(yīng)用[M].廈門：廈門大學(xué)出版社，2008： 152-155.

[27]Emerson K， Russo R C， Lund R E， et al. Aqueous ammonia?equilibrium calculations： effect of pH and temperature[J] Journal of?the Fisheries Research Board of Canada， 1975，32：2379-2383.

[28]強(qiáng)俊，徐跑，何杰，等.氨氮與擁擠脅迫對吉富品系尼羅羅非魚幼魚生長和肝臟抗氧化指標(biāo)的聯(lián)合影響水產(chǎn)學(xué)報，2011，35（12）：1837-1848.

[29]姜會民.氨氮脅迫對黃河鯉幼魚肝胰臟、腎臟抗氧化性的影響[J].山東大學(xué)學(xué)報：理學(xué)版，2012，47（1）：17-22.

[30]梁健，金柏濤，王紅權(quán)，等.氨氮對鰱魚的急性研究[J].湖南飼料，2013（6）：33-34.

[31]梁健，王紅權(quán)，金柏濤，等.氨氮對草魚幼魚的急性毒性試驗(yàn)[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2013（11）：50-51.

[32]李昭林，黃云，田芊芊，等.氨氮對青魚幼魚的急性毒性研究[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2013（5）：52-53.

[33]劉漢友，徐麗麗.鯉魚氨態(tài)氮急性毒性試驗(yàn)[J].河北漁業(yè)，2012，1：14-15.

[34]王凡，劉海芳，趙云龍.非離子態(tài)氨對金魚魚種的急性毒性試驗(yàn)[J].水產(chǎn)科學(xué)，2010，29（3）：175-177.

[35]潘紳，王衛(wèi)民，祝東梅.氨態(tài)氮、亞硝態(tài)氮、硝態(tài)氮對麥穗魚的急性毒性研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2012，28（35）：96-101.

[36]王侃，劉葒.非離子態(tài)氨及亞硝酸鹽對鱖魚苗的急性毒性試驗(yàn)[J].淡水漁業(yè)，1996，26（3）：7-10.