王曉慧 于海亮 鄒文斌 糜長(zhǎng)浩 戴國(guó)俊 張濤 張跟喜 謝愷舟 王金玉 施會(huì)強(qiáng)

摘要：【目的】研究白介素8（1L-8）基因5'調(diào)控區(qū)單核苷酸突變對(duì)雞柔嫩艾美耳球蟲(chóng)（E.tenella）抗性指標(biāo)的影響。【方法】本試驗(yàn)利用DNA直接測(cè)序技術(shù)，檢測(cè)京海黃雞IL-8基因5'調(diào)控區(qū)單核苷酸多態(tài)性（SNPs），并對(duì)5'調(diào)控區(qū)的SNPs突變前后的轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行預(yù)測(cè)，然后分析SNPs與柔嫩艾美耳球蟲(chóng)抗性指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性?！窘Y(jié)果】測(cè)序結(jié)果表明：IL-8基因5'調(diào)控區(qū)共檢測(cè)到3個(gè)突變位點(diǎn)（T-550C、G-398T和T-360C），均形成了3種基因型，雜合度在0.4360.471，PIC值在0.250.50，均屬于中度多態(tài)，且3個(gè)突變位點(diǎn)均處于哈代一溫伯格平衡狀態(tài)。生物信息學(xué)分析表明：3個(gè)突變位點(diǎn)均改變了其原有的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。關(guān)聯(lián)分析顯示：T-550C突變位點(diǎn)的TC型個(gè)體的IL-8表達(dá)量與TT型差異顯著，TC型GSH-PX、CAT、IL-2、IL-6、IFN-γ指標(biāo)均高于其他2種基因型，但差異不顯著。G-398T突變位點(diǎn)的TT型個(gè)體SOD活性和GT型個(gè)體CAT活性均顯著高于GG型;TT型個(gè)體NO含量與GG型差異極顯著，與GT型差異顯著;TT型IL-2表達(dá)量顯著高于GT型。T-360C突變位點(diǎn)的TT型和TC型個(gè)體SOD活性與CC型差異極顯著或差異顯著;TT型和TC型個(gè)體的NO含量均顯著高于CC型;TT型個(gè)體的IL-2、IL-8表達(dá)量均顯著高于CC型?！窘Y(jié)論】G-398T和T-360C突變位點(diǎn)的 TT型個(gè)體球蟲(chóng)抗性優(yōu)于其他基因型個(gè)體，T-550C突變位點(diǎn)的雜合型個(gè)體球蟲(chóng)抗性優(yōu)于純合型個(gè)體，表明IL-8基因5'調(diào)控區(qū)的突變對(duì)球蟲(chóng)抗性指標(biāo)有顯著的調(diào)控作用，可作為球蟲(chóng)病抗性雞新品種或新品系的育種參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：京海黃雞;柔嫩艾美耳球蟲(chóng);白介素8基因;5'調(diào)控區(qū)SNPs;抗性指標(biāo)

中圖分類號(hào)：S831.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1008-0384（2019）11-1262-08

0 引言

【研究意義】球蟲(chóng)病是由原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)引起的一種重要的腸道疾病，可導(dǎo)致家畜體重下降、營(yíng)養(yǎng)不良、失血、脫水和對(duì)其他疾病因子的易感性增加，降低動(dòng)物生產(chǎn)性能，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1-2]。雞對(duì)艾美耳球蟲(chóng)屬易感，寄生于盲腸的柔嫩艾美耳球蟲(chóng)感染尤為嚴(yán)重，病理表現(xiàn)為腸道黏膜損傷、盲腸腫脹、出血及排出血便[3-4]。迄今為止，藥物防治和活疫苗是兩種主要的球蟲(chóng)病控制策略[5]，但抗球蟲(chóng)藥和接種疫苗會(huì)引起雞只的藥物殘留、抗藥性及蟲(chóng)株變異等風(fēng)險(xiǎn)[6]。因此在分子水平上研究球蟲(chóng)病抗性基因，通過(guò)遺傳選育、培育抗病品種是解決這一問(wèn)題的有效途徑。【前人研究進(jìn)展】白介素8（IL-8）是一種趨化性細(xì)胞因子，一方面能激活嗜中性粒細(xì)胞，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞釋放溶酶體酶，清除病原菌[7]，另一方面參與免疫反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)免疫細(xì)胞的抵抗功能，促進(jìn)傷口愈合[8]。Cornelissen等[9]研究表明IL-8能夠有效地招募Thl CD4⁺、巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞，進(jìn)而誘導(dǎo)IFN-γ的產(chǎn)生。Swaggerty等[10]通過(guò)連續(xù)3個(gè)世代選擇外周血白細(xì)胞促炎性細(xì)胞因子白介素6（IL-6）、IL-8和趨化因子CCLi2的高水平表達(dá)（非球蟲(chóng)感染）的肉雞個(gè)體進(jìn)行配種，發(fā)現(xiàn)其后代柔嫩艾美耳球蟲(chóng)的抵抗能力極顯著高于低表達(dá)水平群體。陳仁金等[11]采用混合動(dòng)物模型將IL-8基因遺傳多態(tài)性與荷斯坦奶牛7個(gè)性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，發(fā)現(xiàn)ILS基因連鎖突變對(duì)荷斯坦牛泌乳性狀以及抗病性狀有較大的遺傳效應(yīng)，可用于中國(guó)荷斯坦牛的分子標(biāo)記輔助選擇。林雨鑫等[12]采用RNA-seq技術(shù)對(duì)E.tenella感染雞和非感染對(duì)照雞的盲腸組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析，篩選到許多顯著富集的通路和差異表達(dá)基園，主要有IL-6、IL-8、IL-12β、IL-15、IL-17和TGFB2等。辛世杰等[8]研究發(fā)現(xiàn)，IL-8基因在感染柔嫩艾美耳球蟲(chóng)的京海黃雞脾臟和盲腸組織中表達(dá)量顯著升高，表明IL-8基因在雞球蟲(chóng)感染中發(fā)揮一定的作用?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】雖然已有研究發(fā)現(xiàn)IL-8參與免疫應(yīng)答、具有誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞釋放溶酶體酶和清除病原體等作用，但關(guān)于IL-8基因5'調(diào)控區(qū)單核苷酸多態(tài)性對(duì)球蟲(chóng)抗性指標(biāo)的影響的研究鮮見(jiàn)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本試驗(yàn)采用DNA直接測(cè)序技術(shù)，檢測(cè)京海黃雞IL-8基因5'調(diào)控區(qū)單核苷酸多態(tài)性（SNPs），并對(duì)5'調(diào)控區(qū)的SNPs突變前后轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行預(yù)測(cè)，同時(shí)還分析這些SNPs與球蟲(chóng)抗性指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性，旨在篩選與京海黃雞柔嫩艾美耳球抗性選育有利的突變基因型，為培育球蟲(chóng)病抗性新品種或新品系提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選購(gòu)江蘇省海門集團(tuán)1日齡京海黃雞共92只，公母各半，飼養(yǎng)于無(wú)病原的雞舍中，所食飼料中不含任何球蟲(chóng)及抗球蟲(chóng)性藥物，試驗(yàn)雞預(yù)試期內(nèi)經(jīng)糞檢無(wú)球蟲(chóng)。E.tenella孢子化卵囊為揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院寄生蟲(chóng)教研室保存蟲(chóng)種，經(jīng)非球蟲(chóng)免疫健康雞體內(nèi)傳代一次后收集獲得。

1.2 樣本處理及采集

30日齡時(shí)，每只雞灌飼1.5萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲(chóng)孢子化卵囊。記錄感染期間0～8d體增重。在感染后的第8d翅靜脈采血，肝素鈉抗凝，立即4000r·min^-1離心5min，分離血漿和血細(xì)胞后于-20℃冰箱中保存。

1.3 基因組DNA提取及檢測(cè)

根據(jù)文獻(xiàn)[8]的方法提取所有試驗(yàn)雞的全血基因組DNA，用微量紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)對(duì)基因組DNA進(jìn)行OD值以及濃度測(cè)定，經(jīng)測(cè)定所提取的DNA樣品OD_260nm/OD_280nm值在1.8～2.0，質(zhì)量濃度在500～1000μg·μL^-1，均符合試驗(yàn)要求。將合格樣品稀釋至100ng·μL^-1，4℃或-20℃（長(zhǎng)期）保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 引物設(shè)計(jì)及PCR擴(kuò)增

根據(jù)GenBank中已公布的雞IL-8基因序列（GeneID：396495），使用Primer Premier 5.0對(duì)IL-8基因上游-2000 by至-1bp的核苷酸序列共設(shè)計(jì)4對(duì)引物。引物由上海生工生物工程有限公司合成，引物設(shè)計(jì)詳細(xì)信息見(jiàn)表1。

PCR反應(yīng)體系：10μL的2×Taq Master Mix，上下游引物各1μL，DNA模板1μL，最后加入水補(bǔ)足至20μL體系。PCR擴(kuò)增程序：95℃預(yù)變性5min;95℃變性30s，引物最佳退火溫度退火30s，72℃延伸1min，35個(gè)循環(huán);72℃延伸10min，4℃保存。

1.5 基因測(cè)序

PCR產(chǎn)物送至上海生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。使用儀器為ABI測(cè)序儀（3730x1DNA Ana-lyzer）。DNA序列拼接后，用MEGA6.06和DNA-MAN5.2軟件對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析，并確定京海黃雞IL-8基因的SNPs。

1.6 轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測(cè)

使用在線軟件AliBaba2.1（http：//gene-regulation.com/pub/programs/alibaba2/index.html）進(jìn)行預(yù)測(cè)IL-8基因5'調(diào)控區(qū)核苷酸序列突變后可能存在的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)和可能結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子。

1.7 抗性指標(biāo)測(cè)定

血漿抗氧化指標(biāo)按試劑盒（購(gòu)自南京建成生物工程研究所）說(shuō)明書采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）法測(cè)定[13-14]，測(cè)定指標(biāo)包括：超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、一氧化氮（NO）、白介素1-β（IL-1β）、白介素2（IL-2）、白介素6（IL-6）、白介素8（IL-8）、干擾素-γ（IFN-γ）。

1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

使用Popgene1.32軟件對(duì)IL-8基因5'調(diào)控區(qū)SNPs數(shù)據(jù)進(jìn)行群體遺傳多樣性分析，包括雜合度（H）、有效等位基因數(shù)（Ne）和多態(tài)信息含量（PIC），統(tǒng)計(jì)整理各突變位點(diǎn)的基因型頻率、等位基因頻率，用χ²檢驗(yàn)方法對(duì)群體Hardy-Weinberg進(jìn)行平衡檢測(cè)。運(yùn)用SPSS25.0對(duì)各抗性指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 IL-8基因PCR測(cè)序結(jié)果

以提取的92只京海黃雞基因組DNA為模板，依據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中雞（Gallus gallus）IL-8基因上游-2000bp至-1bp的核苷酸序列設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增測(cè)序及拼接。測(cè)序共發(fā)現(xiàn)了3個(gè)SNPs突變位點(diǎn)（見(jiàn)表2），1號(hào)突變位點(diǎn)在一550堿基發(fā)生T→C的突變，命名為T-550C。2號(hào)突變位點(diǎn)在-398堿基發(fā)生G→T的突變，命名為G-398T。3號(hào)突變位點(diǎn)在-360堿基發(fā)生T→C的突變，命名為T-360C。詳細(xì)信息見(jiàn)圖1。

2.2 IL-8基因5'調(diào)控區(qū)SNPs突變引起的轉(zhuǎn)錄因子改變預(yù)測(cè)結(jié)果

由表3可見(jiàn)，IL-8基因5'調(diào)控區(qū)在-550bp發(fā)生了T→C的突變，此處突變導(dǎo)致原有的Oct-1轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)消失;在-398bp發(fā)生了G→T的突變，導(dǎo)致此處原先C/EBPalp轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生位置改變，且新增了1個(gè)Pit-1a轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn);在-360bp的突變（T→C）導(dǎo)致原有的NF-1轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)消失。

2.3 IL-8基因5'調(diào)控區(qū)多態(tài)性分析

對(duì)IL-8基因5'調(diào)控區(qū)發(fā)現(xiàn)的3個(gè)SNPs位點(diǎn)進(jìn)行多態(tài)性及遺傳多樣性分析（表4），結(jié)果表明：3個(gè)突變位點(diǎn)均形成了3種基因型，雜合度均在0.436～0.471，PIC值在0.25～0.50，均屬于中度多態(tài)，遺傳差異性較大?？ǚ綑z驗(yàn)結(jié)果顯示，3個(gè)突變位點(diǎn)均處于哈代-溫伯格平衡狀態(tài)。其中，除了G-398T突變位點(diǎn)外，原等位基因相對(duì)于突變后的等位基因均為優(yōu)勢(shì)等位基因，而G-398T突變位點(diǎn)突變后的等位基因?yàn)閮?yōu)勢(shì)等位基因。

2.4 IL-8基因5'調(diào)控區(qū)多態(tài)性與血漿抗性指標(biāo)的關(guān)聯(lián)分析

2.4.1 T-550C突變位點(diǎn)各基因型與雞球蟲(chóng)杭性指標(biāo)關(guān)聯(lián)分析T-550C突變位點(diǎn)各基因型與雞球蟲(chóng)抗性指標(biāo)關(guān)聯(lián)分析顯示（表5），除了SOD、MDA、NO和IL-1β指標(biāo)外，TC型個(gè)體的其他指標(biāo)均高于其他2種基因型，但差異不顯著（P>0.05）;TC型的IL-8表達(dá)量顯著高于TT型（P<0.05），其加性效應(yīng)值和顯性效應(yīng)值分別為9.10和19.15ng·L^-1;TT型個(gè)體的NO含量極顯著高于CC型（P<0.01），其加性效應(yīng)值和顯性效應(yīng)值分別為10.12和7.39μmol·L^-1。

2.4.2 G-398T突變位點(diǎn)各基因型與雞球蟲(chóng)杭性指標(biāo)關(guān)聯(lián)分析由表6可知，TT型個(gè)體SOD活性和GT型個(gè)體CAT活性均顯著高于GG型（P<0.05），SOD與CAT活性的加性效應(yīng)值分別為46.77和0.035U·mL^-1，顯性效應(yīng)值分別為10.99和0.175U·mL^-1;TT型個(gè)體NO含量均高于其他兩種基因型，且與GG型差異極顯著（P<0.01），與GT型差異顯著（P<0.05），其加性效應(yīng)值和顯性效應(yīng)值分別為10.86和2.365μmol·L^-1;TT型IL-2表達(dá)量顯著高于GT型（P<0.05），其加性效應(yīng)值和顯性效應(yīng)值分別為0.67和2.18ng·L^-1;TT型IL-1β、IL-8表達(dá)量均高于GG型個(gè)體，但未達(dá)到顯著水平（P>0.05）。

2.4.3 T-360C突變位點(diǎn)各基因型與雞球蟲(chóng)抗性指標(biāo)關(guān)聯(lián)分析 由T-360C突變位點(diǎn)各基因型與雞球蟲(chóng)抗性指標(biāo)關(guān)聯(lián)分析（表7）可知，除MDA、CAT、IL-1β、IFN-γ指標(biāo)以外，TT型個(gè)體的其他指標(biāo)均高于其他2種基因型;對(duì)于SOD活性，TT型個(gè)體與CC型差異極顯著（P<0.01），TC型個(gè)體與CC型個(gè)體差異顯著（P<0.05），其加性效應(yīng)值和顯性效應(yīng)值分別為64.43和10.55U·mL^-1;對(duì)于NO含量，TT型和TC型個(gè)體均顯著高于CC型個(gè)體（P<0.05），其加性效應(yīng)值和顯性效應(yīng)值分別為5.94和4.53μmol·L^-1;對(duì)于IL-2、IL-8表達(dá)量，TT型個(gè)體均顯著高于CC型個(gè)體（P<0.05），IL-2與IL-8活性的加性效應(yīng)值分別為1.68和10.02ng·L^-1，顯性效應(yīng)值分別為0.32和1.87ng·L^-1;對(duì)于IFN-γ含量，CC型個(gè)體顯著高于其他2種基因型個(gè)體（P<0.05），其加性效應(yīng)值和顯性效應(yīng)值分別為15.015和9.55ng·L^-1;TT型GSH-PX、IL-6指標(biāo)均高于其他2種基因型，但差異不顯著（P>0.05）。

3 討論與結(jié)論

3.1 IL-8基因5'調(diào)控區(qū)的多態(tài)性檢測(cè)

5'調(diào)控區(qū)是基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的核心區(qū)域，該區(qū)域突變形成的SNPs可改變?cè)械霓D(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)和轉(zhuǎn)錄因子，從而影響與該基因有關(guān)性狀的表達(dá)。因此研究基因5'調(diào)控區(qū)SNPs及其與相關(guān)性狀的關(guān)聯(lián)分析是發(fā)掘新的分子遺傳標(biāo)記的重要途徑之一[4，15]。寧娟[16]研究表明結(jié)構(gòu)蛋白N和非結(jié)構(gòu)蛋白Nsp2Marc-145細(xì)胞中表達(dá)能激活轉(zhuǎn)錄因子NF-κB，而活化的NF-κB進(jìn)入核內(nèi)與IL-8啟動(dòng)子上的NF-κB位點(diǎn)結(jié)合后，能誘導(dǎo)IL-8的表達(dá)。Wu等[17]體外試驗(yàn)結(jié)果表明，轉(zhuǎn)錄激活因子3（ATF3）的抑制可顯著提高人支氣管上皮細(xì)胞中促炎細(xì)胞因子IL-6和IL-8的表達(dá)。本研究在5'調(diào)控區(qū)共檢測(cè)到3個(gè)SNP位點(diǎn)：T-550C、G-398T和T-360C。這3個(gè)突變位點(diǎn)均形成了3種基因型，雜合度均在0.436～0.471，PIC值在0.25～0.50，均屬于中度多態(tài)，遺傳差異性較大，有利于雞育種中的群體遺傳分化。其中，T-550C和T-360C突變位點(diǎn)均是雜合型所占比例較高，TC為優(yōu)勢(shì)基因型，T為優(yōu)勢(shì)基因，而G-398T位點(diǎn)突變后的等位基因?yàn)閮?yōu)勢(shì)等位基因，雜合型為優(yōu)勢(shì)基因型。卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示，3個(gè)突變位點(diǎn)均處于哈代一溫伯格平衡狀態(tài)，這可能是由于群體規(guī)模較大，突變位點(diǎn)沒(méi)有受到選種選配的影響或是在選育過(guò)程中達(dá)到了新的平衡。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)：在-550bp發(fā)生了T→C的突變，導(dǎo)致原有的Oct-1轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)消失;在-398bp發(fā)生了G→T的突變，導(dǎo)致此處原先C/EBPalp轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生位置改變，且新增了1個(gè)Pit-1a轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn);在-360bp的突變（T→C）導(dǎo)致原有的NF-1轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)消失。本研究發(fā)現(xiàn)的這3個(gè)突變位點(diǎn)均改變了其原有的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)，轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的改變可能使IL-8基因表達(dá)發(fā)生變化，進(jìn)而影響血漿中IL-8的濃度。IL-8參與免疫反應(yīng)，在炎癥和免疫應(yīng)答中起著重要作用。有研究表明雞感染球蟲(chóng)后，體內(nèi)IL-8表達(dá)量越高，其抗球蟲(chóng)能力越強(qiáng)[10]。因此推測(cè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的改變可能會(huì)影響雞抗球蟲(chóng)能力，但具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

3.2 IL-8基因5'調(diào)控區(qū)的多態(tài)性與雞球蟲(chóng)抗性指標(biāo)的關(guān)系

目前有關(guān)雞IL-8基因的SNPs與球蟲(chóng)抗性指標(biāo)關(guān)聯(lián)分析的研究較少。本研究將5'調(diào)控區(qū)發(fā)現(xiàn)的3個(gè)SNPs與雞球蟲(chóng)抗性指標(biāo)關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果表明：在T-550C位點(diǎn)突變后形成的3種基因型中，大多數(shù)指標(biāo)均是TC型高于其他2種基因型，且TC型個(gè)體IL-8表達(dá)量顯著高于TT型。對(duì)于G-398T突變位點(diǎn)，TT型個(gè)體顯著或極顯著高于GG型的SOD、NO指標(biāo)，顯著高于GT型的IL-2表達(dá)量，并且TT型IL-1β、IL-8表達(dá)量也都高于GG型個(gè)體，因此突變后的TT型個(gè)體可能抵抗球蟲(chóng)病能力較強(qiáng)。對(duì)于T-360C突變位點(diǎn)，除了對(duì)MDA、GSH-Px、CAT、IL-1p、IL-6指標(biāo)無(wú)顯著影響外，TT型和TC型個(gè)體的SOD活性極顯著或顯著高于CC型，TT型和TC型個(gè)體的NO含量均顯著高于CC型個(gè)體，TT型個(gè)體的IL-2、IL-8表達(dá)量均顯著高于CC型。IL-8參與免疫應(yīng)答，能誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞釋放溶酶體酶和清除病原體，在炎癥和免疫應(yīng)答中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。本研究在IL-8基因5'調(diào)控區(qū)檢測(cè)到的3個(gè)SNPS均改變了其原有的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)，進(jìn)而影響IL-8基因的表達(dá)，導(dǎo)致血漿中IL-8的表達(dá)量升高，有效地提高雞體內(nèi)的免疫水平，增強(qiáng)抵抗E.tenella的能力。

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（責(zé)任編輯：張梅）

收稿日期：2019-06-21初稿;2019-10-26修改稿

作者簡(jiǎn)介：王曉慧（1994-），女，碩士，研究方向：家禽生產(chǎn)及抗病育種（E-mail：1216688368@qq.com）

通信作者：戴國(guó)?。?963-），男，博士，教授，研究方向：家禽生產(chǎn)及抗病育種（E-mail：daigj@yzu.edu.cn）

基金項(xiàng)目：江蘇現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（JATSf20181303）;“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2014BAD131302）;江蘇省高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程（PAPD）;國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（CARS-41-G23）