常百金 邱智東 張涵雪 關安琦 劉瑩瑩 徐偉

中圖分類號 R284.1 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2019）02-0202-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.02.12

摘 要 目的：對生物轉化得到的人參真菌菌質的乙酸乙酯部位化學成分進行研究，以期獲得活性更好、毒性更低的化合物，為新藥研發(fā)及人參藥材的二次開發(fā)利用提供參考。方法：將代號為C-1的真菌種子液加至含有人參的培養(yǎng)基中，生物轉化得到人參真菌菌質；稱取干燥人參真菌菌質，以70%乙醇溶劑提取濃縮制得稠膏；稠膏加入水混懸，采用乙酸乙酯萃取，獲得乙酸乙酯部位。采用薄層色譜、硅膠柱色譜、ODS柱色譜以及半制備液相對上述乙酸乙酯部位進行分離純化，根據理化性質以及氫譜（1H-NMR）和碳譜（13C-NMR）數據鑒定化合物結構。結果：從人參真菌菌質的乙酸乙酯部位分離、鑒定得到8個化合物，分別為人參皂苷Rs7（1）、人參皂苷Rk3（2）、齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、人參皂苷Rs6（4）、20（R）-人參皂苷Rh1（5）、人參皂苷F1（6）、三七皂苷R2（7）、人參皂苷F4（8）。結論：上述化合物均在人參真菌菌質中發(fā)現，其中化合物3、5、6、7、8為經生物轉化后得到的，證明生物轉化技術能改變人參的化學成分。

關鍵詞 人參；生物轉化；乙酸乙酯部位；化學成分

ABSTRACT OBJECTIVE： To study the chemical constituents of ethyl acetate fraction of Panax ginseng fungal substance obtained by biotransformation， in order to obtain compounds with better activity and lower toxicity， and to provide reference for new drug R&D and the second development and utilization of P. ginseng. METHODS： Fungus of Code Name C-1 seed solution was added into the culture medium containing P. ginseng， and P. ginseng fungal substance was obtained by biotransformation； the dried P. ginseng fungal substance were weighed， extracting with 70% ethanol solvent and concentrating to obtain thick paste. The thick paste was added with water suspension and extracted with ethyl acetate to obtain ethyl acetate fraction. TLC， silica gel column chromatography， ODS column chromatography and semi-prepared liquid phase were used to isolate and purify above ethyl acetate fraction， and the compound structure was identified according to physicochemical properties， hydrogen spectrum （1H-NMR） and carbon spectrum （13C-NMR） data. RESULTS： Eight compounds were isolated and identified from the ethyl acetate fraction of P. ginseng fungal substance and identified as ginsenoside Rs7 （1）， ginsenoside Rk3 （2）， oleanolic acid-28-O-β-D-glucopyranoside （3）， ginsenoside Rs6 （4）， 20（R）-ginsenoside Rh1 （5）， ginsenoside F1 （6）， notoginsenoside R2 （7） and ginsenoside F4 （8）. CONCLUSIONS： All the above compounds were found in P. ginseng fungal substance， which compounds 3， 5， 6， 7 and 8 were obtained after biotransformation， proving that biotransformation technology can change the chemical composition of ginseng.

KEYWORDS Panax ginseng； Biotransformation； Ethyl acetate fraction； Chemical constituents

人參為五加科人參屬多年生草本植物人參（Panax ginseng C. A. Mey.）的干燥根[1]，有“百草之王”之稱[2]，具有“補五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、開心益智、明目，久服輕身延年”的功效[3]。對中藥材進行生物轉化，可以改變其原有藥性、降低藥物毒性、增強或產生新的功效、擴大臨床應用范圍[4]。長春中醫(yī)藥大學邱智東教授課題組前期利用不同的菌種對人參、三七等藥材進行生物轉化，通過生物轉化提高了藥材中主要活性成分稀有皂苷的含量，并發(fā)現了一些新的化合物，藥理試驗證實生物轉化產物治療效果有較大提高[5-9]。在前期的試驗中發(fā)現，乙酸乙酯部位的活性成分及新化合物較多[5-7]，故本研究先采用中藥化學方法研究人參真菌菌質乙酸乙酯部位的化學成分，后續(xù)會對其他部位進行研究，以期得到活性更好、毒性更低或藥用價值更高的化合物，為新藥研發(fā)及藥材的二次開發(fā)利用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

Rotavapor R-220型旋轉蒸發(fā)儀（瑞士Buchi公司）；R-201型旋轉蒸發(fā)儀（上海申順生物科技有限公司）；LSY-電熱恒溫水浴鍋（江蘇常熟醫(yī)療器械廠）；LC-2130型日立高效液相色譜儀（上海天美科學儀器有限公司）；LC-15C型高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司）；BP211D型電子分析天平（德國Sartorius公司）；KQz3200E型超聲波清洗機（天鵬電子新技術有限公司）；AVANCE Ⅲ 500傅里葉變換核磁共振儀（德國Bruker公司）；DNP-9082BS-Ⅲ電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司）；MD200-2型氮吹儀（杭州奧盛儀器有限公司）；DZF-6050型真空干燥箱（上海一恒科學儀器有限公司）。

1.2 試劑

柱色譜硅膠（100～200目，批號：0140027）、硅膠G薄層層析板（批號：20140520）均由青島海洋化工有限公司提供；AM12S05-3010WT YMC-Pack ODS-AM半制備色譜柱（300 mm×10 mm，粒徑：5 μm，日本YMC公司）；AM12S05-3010WT YMC-Pack ODS- AM色譜柱（300 mm×10 mm，粒徑：5 μm，批號：1030000103，北京綠百草科技發(fā)展有限公司）；其他有機試劑均為分析純；水為純化水。

1.3 菌株

代號為C-1的真菌菌株（中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心）。

1.4 藥材

人參藥材（批號：20150903）于2015年購自吉林省仙草醫(yī)藥藥材有限公司，經長春中醫(yī)藥大學藥學院翁麗麗教授鑒定為五加科植物人參（Panax ginseng C. A. Mey.）的干燥根及根莖。

2 實驗方法

2.1 部位提取

根據優(yōu)選出的適宜代號為C-1的真菌生長的最佳馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基配方：取葡萄糖2%，磷酸二氫鉀0.3%，硫酸鎂0.3%，蛋白胨1%，酵母浸粉1%，維生素B1 0.01%，以上物質置于大燒杯中，加入適量的熱水攪拌使溶化，待液體培養(yǎng)基冷卻后，分裝于250 mL錐形瓶中，每瓶100 mL，包扎后置于壓力蒸汽滅菌器中，于121 ℃滅菌30 min。取出，冷卻后，置于無菌室中，紫外滅菌40 min，日光燈照射10 min后，在無菌操作臺中接入保存好的斜面菌種。將接有斜面菌種的液體培養(yǎng)基放入恒溫振蕩（150 r/min）培養(yǎng)箱中，在（26±1） ℃的條件下培養(yǎng)，待種子液變?yōu)闇啙狃こ沓实S色時，取出，備用。

將人參粉碎，過八號篩，得到人參粗粉6.0 kg，加1.5倍水（倍量按L/kg計，以下同），分裝于500 mL錐形瓶中，于滅菌鍋121 ℃滅菌1 h，室溫冷卻，加入經培養(yǎng)得到的代號為C-1的真菌種子液各50 mL，于（26±1）℃、相對濕度為65%的培養(yǎng)箱中發(fā)酵12 d，得到人參真菌菌質，干燥。稱取干燥人參真菌菌質4.0 kg，粉碎，以7倍量70%乙醇溶劑提取3次（2 h/次），提取液濾過、合并、減壓濃縮得到稠膏。將稠膏加入適量的水混懸，采用等體積石油醚、乙酸乙酯及水飽和正丁醇溶液萃取各3次，分別獲得石油醚部位13 g、乙酸乙酯部位35 g、水飽和正丁醇部位303 g。

2.2 乙酸乙酯部位的分離純化

取乙酸乙酯部位浸膏，經硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（100 ∶ 0、100 ∶ 2、100 ∶ 5、100 ∶ 10、100 ∶ 20、100 ∶ 50，V/V）梯度洗脫，得到78個流分，經薄層色譜檢視后合并，得到12個流分。其中，第6、8、11個流分分別經開放式ODS柱，以水-甲醇（1 ∶ 0、7 ∶ 3、5 ∶ 5、3 ∶ 7、0 ∶ 1，V/V）梯度洗脫，經薄層色譜檢視后合并，第6、8、11個流分分別得到16個流分（Fr.1～Fr.16）、11個流分（Fr.17～Fr.27）以及7個流分（Fr.28～Fr.34）。Fr.12經半制備液相色譜，以水-甲醇（2.3 ∶ 7.7，V/V）等度洗脫，經硅膠柱色譜純化、薄層色譜檢視，合并流分后得到化合物1（4.6 mg）和化合物2（23.7 mg）；Fr.13經半制備液相色譜，以水-甲醇（1.5 ∶ 8.5，V/V）等度洗脫，經硅膠柱色譜純化、薄層色譜檢視，合并流分后得到化合物3（64.1 mg）和化合物4（6.9 mg）；Fr.22經半制備液相色譜，以水-甲醇（3 ∶ 7，V/V）等度洗脫，經薄層色譜檢視，合并流分后得到化合物5（59.3 mg）和化合物6（13.1 mg）；Fr.33經半制備液相色譜，以水-甲醇（3.3 ∶ 6.7，V/V）等度洗脫，經硅膠柱色譜純化、薄層色譜檢視，合并流分后得到化合物7（4.8 mg）；Fr.34經半制備液相色譜，以水-甲醇（2.2 ∶ 7.8，V/V）等度洗脫，經硅膠柱色譜純化、薄層色譜檢視，合并流分后得到化合物8（9.8 mg）。

2.3 波譜條件

氫譜（1H-NMR）提供質子類型及其化學環(huán)境、氫分布（各官能團上H的相對數目）、核間關系。碳譜（13C-NMR）提供化合物中碳的個數和每個碳的化學位移，給出有特征的端基碳原子，判斷伯仲叔季碳。通過1H-NMR（C5D5N，500 MHz）譜中給出特征信號（甲基質子信號、連氧碳上氫的質子信號、烯氫質子信號以及糖的端基質子信號）和13C-NMR（C5D5N，150 MHz）譜中給出特征信號（甲基碳信號、烯碳信號、葡萄糖端基碳信號）初步確定化合物類型及結構，然后檢索相關參考文獻，與參考文獻中化合物數據基本一致時，即確定二者為同一物質。

3 結構鑒定

化合物1～8的結構見圖1。

化合物1：白色無定形粉末（甲醇），分子式為C38H62O9，熔點110～112 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ： 0.95（3H，s，H-30），1.06（3H，s，H-19），1.28 （3H，s，H-18），1.54（3H，s，H-29），1.58（3H，s，H-27），1.64（3H，s，H-26），2.02（3H，s，H-28），2.06（3H，s，6′-COCH3），3.51（1H，d，J= 10.5 Hz，H-3）、3.92（1H，m，H-12），4.41（1H，m，H-6），4.91（1H，s，H-21a）、5.14（1H，s， H-21b），5.28（1H，brt，J=7.0 Hz，H-24），5.02（1H，d，J=8.0 Hz，H-1′） 。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：39.9（C-1），28.3（C-2），79.0（C-3），40.7（C-4），61.8（C-5），80.1（C-6），46.0（C-7），41.8（C-8），51.1（C-9），40.2（C-10），33.1（C-11），72.8（C-12），52.6（C-13），51.6（C-14），31.9（C-15），30.4（C-16），48.6（C-17），17.3（C-18），17.8（C-19），55.8（C-20），108.6（C-21），33.2（C-22），27.5（C-23），125.7（C-24），131.7（C-25），26.1（C-26），18.2（C-27），31.1（C-28），16.9（C-29），18.2（C-30），106.3（C-1′ ），75.8（C-2′），79.6（C-3′），71.8（C-4′），75.5（C-5′），65.2（C-6′），171.3（C-1″ ），21.3（C-2″ ）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[10]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為人參皂苷Rs7。

化合物2：白色粉末（甲醇），分子式為C36H60O8，熔點167～170 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ：0.82（3H，s，H-30），1.03（3H，s，H-19），1.22（3H，s，H-18），1.57（3H，s，H-29），1.59（3H，s，H-27），1.65（3H，s，H-26），2.07（3H，s，H-28），3.58（1H，m，H-3），4.51（1H，m，H-6），3.94（1H，m，H-12），5.10（1H，s，H-21），4.88（1H，s，H-21），5.27（1H，t，J=5.0 Hz，H-24），5.02（1H，d，J=8.0 Hz，H-1′）。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：39.9（C-1），28.3（C-2），79.0（C-3），40.8（C-4），61.9（C-5），80.4（C-6），45.7（C-7），41.7（C-8），51.1（C-9），40.1（C-10），33.1（C-11），72.8（C-12），52.5（C-13），51.5（C-14），32.9（C-15），31.1（C-16），48.7（C-17），18.1（C-18），18.1（C-19），155.8（C-20），108.5（C-21），34.1（C-22），27.4（C-23），125.7（C-24），131.6（C-25），26.1（C-26），17.7（C-27），32.1（C-28），16.7（C-29），17.1（C-30），106.4（C-1′），75.9（C-2′），80.1（C-3′），72.2（C-4′），78.5（C-5′），63.5（C-6′）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[11]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為人參皂苷Rk3。

化合物3：白色針晶（甲醇），分子式為C36H58O8，熔點180～183 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ：1.07（3H，s，H-27），1.09（3H，s，H-25），1.10（3H，s，H-26），1.21（3H，s，H-23），1.32（3H，s，H-30），1.41（3H，s，H-29），1.43（3H，s，H-24），3.72（1H，m，H-3），5.64（1H，s，H-12），6.52（1H，d，J=8.0 Hz，H-1′）。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：39.3（C-1），28.4（C-2），78.4（C-3），39.7（C-4），56.2（C-5），19.2（C-6），33.5（C-7），40.3（C-8），48.5（C-9），37.7（C-10），24.2（C-11），123.2（C-12），144.5（C-13），42.5（C-14），28.6（C-15），23.8（C-16），47.3（C-17），42.1（C-18），46.6（C-19），31.1（C-20），34.3（C-21），32.9（C-22），29.1（C-23），16.9（C-24），16.0（C-25），17.9（C-26），26.4（C-27），176.8（C-28），33.4（C-29），24.0（C-30），96.1（C-1′），74.4（C-2′），79.2（C-3′），71.4（C-4′），79.7（C-5′），62.5（C-6′）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[12-13]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物4：白色粉末（甲醇），分子式為C38H62O9，熔點165～166 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ：0.95（3H，s，H-30），1.05（3H，s，H-19），1.28（3H，s，H-18），1.54（3H，s，H-29），1.56（3H，s，H-27），1.60（3H，s，H-26），1.83（3H，s，H-21），2.04（3H，s，H-28），2.05（3H，s，6′-COCH3），3.50（1H，m，H-3），4.40（1H，t，J=14.5 Hz，H-6），3.99（1H，m，H-12），5.07（1H，d，J=6.5 Hz，H-1′）。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：40.0（C-1），28.3（C-2），78.9（C-3），40.7（C-4），61.8（C-5），79.6（C-6），46.0（C-7），41.8（C-8），50.9（C-9），40.2（C-10），32.7（C-11），72.9（C-12），50.8（C-13），51.3（C-14），33.1（C-15），29.2（C-16），50.0（C-17），17.4（C-18），17.8（C-19），140.4（C-20），13.5（C-21），124.2（C-22），27.8（C-23），124.2（C-24），131.5（C-25），26.1（C-26），18.1（C-27），31.9（C-28），16.9（C-29），16.9（C-30），106.3（C-1′），75.5（C-2′），80.1（C-3′），71.8（C-4′），75.6（C-5′），65.5（C-6′），171.2（C-1″），21.3（C-2″）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[14]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為人參皂苷Rs6。

化合物5：白色粉末（甲醇），分子式為C36H62O9，熔點192～194 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，600 MHz）δ：0.85（3H，s，H-30），1.04（3H，s，H-19），1.22（3H，s，H-18），1.37（3H，s，H-21），1.60（3H，s，H-29），1.62（3H，s，H-27），1.67（3H，s，H-26），2.06（3H，s，H-28），2.02（1H，m，H-3），3.91（1H，m，H-12），4.43（1H，td，J=10.2，3.0 Hz，H-6），5.03（1H，d，J=7.8 Hz，H-1′），5.28（1H，brt，J=7.2 Hz，H-24）。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：39.7（C-1），28.3（C-2），78.9（C-3），40.7（C-4），61.8（C-5），78.5（C-6），45.5（C-7），41.4（C-8），50.5（C-9），40.0（C-10），32.5（C-11），71.3（C-12），49.2（C-13），52.0（C-14），31.7（C-15），26.9（C-16），50.9（C-17），17.7（C-18），18.0（C-19），73.4（C-20），22.9（C-21），43.5（C-22），23.0（C-23），126.4（C-24），131.1（C-25），26.2（C-26），18.0（C-27），32.1（C-28），16.7（C-29），17.4（C-30），106.3（C-1′），75.8（C-2′），80.4（C-3′），72.2（C-4′），80.0（C-5′），63.4（C-6′）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[15-16]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為20（R）-人參皂苷Rh1。

化合物6：白色無定形粉末（甲醇），分子式為C36H62O9，熔點175～177 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，600 MHz）δ：0.95（3H，s，H-30），0.99（3H，s，H-19），1.07（3H，s，H-29），1.43（3H，s，H-18），1.57（3H，s，H-26），1.57（3H，s，H-27），1.60（3H，s，H-21），1.97（3H，s，H-28），3.52（1H，d，J=7.2 Hz，H-3），4.00（1H，t，J=7.8，4.2 Hz，H-6），3.91（1H，m，H-12），5.18（1H，d，J=7.2 Hz，H-1′），5.22（1H，s，H-24）。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：39.7（C-1），29.4（C-2），78.8（C-3），40.6（C-4），62.0（C-5），68.0（C-6），47.7（C-7），41.5（C-8），50.2（C-9），40.6（C-10），31.1（C-11），70.6（C-12），49.4（C-13），51.7（C-14），31.2（C-15），26.9（C-16），52.0（C-17），18.1（C-18），17.9（C-19），83.6（C-20），22.7（C-21），36.4（C-22），23.6（C-23），126.2（C-24），131.3（C-25），26.1（C-26），18.1（C-27），32.3（C-28），16.8（C-29），17.7（C-30），98.6（C-1′），75.5（C-2′），79.6（C-3′），71.9（C-4′），78.6（C-5′），63.1（C-6′）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[17-18]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為人參皂苷F1。

化合物7：白色粉末（甲醇），分子式為C41H70O13，熔點200～202 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，600 MHz）δ：0.81（3H，s，H-30），0.97（3H，s，H-19），1.16（3H，s，H-18），1.40（3H，s，H-21），1.46（3H，s，H-29），1.63（3H，s，H-27），1.66（3H，s，H-26），2.08（3H，s，H-28），3.50（1H，dd，J=11.4，4.2 Hz，H-3），4.31（1H，m，H-6），3.89（1H，m，H-12），4.95（1H，d，J=7.8 Hz，H-1′），5.77（1H，d，J=6.6 Hz，H-1″），5.34（1H，t，J=7.2 Hz，H-24）。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：39.8（C-1），28.2（C-2），79.2（C-3），40.6（C-4），61.7（C-5），80.6（C-6），45.4（C-7），41.5（C-8），50.5（C-9），40.0（C-10），32.5（C-11），71.4（C-12），48.6（C-13），52.0（C-14），31.6（C-15），27.4（C-16），55.1（C-17），18.0（C-18），18.0（C-19），73.3（C-20），26.2（C-21），36.2（C-22），23.4（C-23），126.7（C-24），131.1（C-25），27.2（C-26），17.7（C-27），32.1（C-28），17.1（C-29），17.2（C-30），103.9（C-1′），80.3（C-2′），78.4（C-3′），72.1（C-4′），79.8（C-5′），63.3（C-6′），105.3（C-1″），76.2（C-2″），79.2（C-3″），71.6（C-4″），67.6（C-5″）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[19-20]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為三七皂苷R2。

化合物8：白色粉末（甲醇），分子式為C42H70O12，熔點177～180 ℃，三萜皂苷類特征性反應均顯陽性。1H-NMR（C5D5N，600 MHz）δ：0.95（3H，s，H-30），0.96（3H，s，H-19），1.23（3H，s，H-18），1.23（3H，s，H-29），1.35（3H，s，H-27），1.60（3H，s，H-26），1.77（3H，s，H-21），2.10（3H，s，H-28），3.45（1H，dd，J=11.4，4.2 Hz，H-3），4.52（1H，m，H-6 ），3.97（1H，brs，H-12），5.26（1H，d，J=6.6 Hz，H-1′）。13C-NMR（C5D5N，150 MHz）δ：39.9（C-1），28.2（C-2），78.7（C-3），40.4（C-4），61.2（C-5），74.8（C-6），46.6（C-7），41.8（C-8），50.5（C-9），40.0（C-10），32.6（C-11），69.8（C-12），50.7（C-13），51.3（C-14），32.6（C-15），27.8（C-16），51.1（C-17），18.1（C-18），18.1（C-19），140.3（C-20），28.2（C-21），123.8（C-22），30.4（C-23），126.0（C-24），131.1（C-25），26.1（C-26），18.0（C-27），33.0（C-28），17.3（C-29），17.6（C-30），102.2（C-1′），79.8（C-2′），78.9（C-3′），72.9（C-4′），78.8（C-5′），63.5（C-6′），102.3（C-1″），72.7（C-2″），72.8（C-3″），74.6（C-4″），69.8（C-5″），19.1（C-6″）。結合氫譜和碳譜數據與相關文獻[21-22]參考數據基本一致，經過綜合分析后，鑒定此化合物為人參皂苷 F4。

4 討論

通過試驗從人參真菌菌質中分離得到8個化合物，經鑒定分別為人參皂苷Rs7（1）、人參皂苷Rk3（2）、齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、人參皂苷Rs6（4）、20（R）-人參皂苷Rh1（5）、人參皂苷F1（6）、三七皂苷R2（7）、人參皂苷F4（8）。其中，化合物3、5、6、7、8為生物轉化后得到的，證明生物轉化技術能改變人參的化學成分。中藥生物轉化技術結合微生物學、生物化學、細胞學和生物工程手段形成的新技術，是藥物開發(fā)創(chuàng)新的新途徑和新手段，通過生物轉化技術能提高生物活性成分含量。根據文獻報道，所分離得到的化合物在抗疲勞、提高免疫力以及抗腫瘤方面具有良好療效[23-27]。本研究對人參以及傳統中藥生物轉化的開發(fā)利用具有借鑒意義。

參考文獻

[ 1 ] 鄒昆，何正有，王欣榮，等.人參皂苷的微生物轉化研究進展[J].國外醫(yī)藥抗生素分冊，2012，33（3）：104-108.

[ 2 ] 剛婉嬌，王明蛟，關升遠，等.人參藥性菌質乙酸乙酯部位化學成分[J].中國實驗方劑學雜志，2014，20（17）：114- 116.

[ 3 ] 張春枝，安利佳，金鳳燮.人參皂苷生理活性的研究進展[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2002，28（4）：70-74.

[ 4 ] 于榮敏.天然藥物活性成分的生物合成與生物轉化[J].中草藥，2006，37（9）：1281-1288.

[ 5 ] 丁彩鳳，王明蛟，邱智東，等.三七藥性菌質乙酸乙酯部分化學成分[J].中國實驗方劑學雜志，2015，21（7）：43-46.

[ 6 ] XU W，DING CF，WANG XW，et al. Two new triterpenoid saponins from notoginseng medicinal fungal substance[J]. Chinese Chem Lett，2015. DOI：10.1016/j.cclet. 2015.07.014.

[ 7 ] XU W，DING CF，LIU XL，et al. Chemical constituents of the notoginseng medicinal fungal substance[J]. Chemistry of Natural Compounds，2017，53（3）：483-485.

[ 8 ] 朱 凱，賈艾玲，徐瑤，等.人參藥性菌質對小鼠 Lewis 肺癌的作用[J].中國老年學雜志，2013，33（23）：5882- 5883.

[ 9 ] 朱瑩瑩，劉鑫，賈艾玲，等.HPLC同時測定人參藥性菌質中8種皂苷含量[J].中國實驗方劑學雜志，2016，22（7）：96-99.

[10] 賈繼明，王宗權.西洋參總皂苷乙酸水解產物的化學成分研究：Ⅰ[J].中草藥，2009，40（8）：1204-1207.

[11] 潘小玲，李振麟，錢士輝，等.中國人參花化學成分研究[J].中國野生植物資源，2014，33（2）：13-15.

[12] 徐金中，王賢親，黃可新，等.中華雪膽中的三萜皂苷類化學成分研究[J].中國藥學雜志，2008，43（23）：1770-1773.

[13] NIE RL，MORITA T，KASAI R，et al. Saponins from Chinese medicinal plants（Ⅰ） isolation and structures of hemslosides[J]. Planta Med，1984，50（4）：322-327.

[14] PARK IH，HAN SB，KIM JM，et al. Four new acetylated ginsenosides from processed ginseng（sun ginseng）[J]. Arch Pharm Res，2002，25（6）：837-841.

[15] 王紅燕，裴玉萍，陳英杰.人參花蕾化學成分研究[J].中國藥物化學雜志，1992，2（2）：31-35.

[16] TEN LN，CHAE SM，YOO SA. Biotransformation of ginsenosides Re and Rg1 by the bacterium microbacterium sp.GT35[J]. Chemistry of Natural Compounds，2015，51（1）：81-86.

[17] 馬麗媛，楊秀偉.人參莖葉總皂苷堿水解產物中的新人參皂苷20（R）-人參皂苷Rh19[J].中草藥，2016，47（1）：6-14.

[18] 郭娜，付銳，竇德強.加拿大產西洋參的化學成分研究[J].中國藥物化學雜志，2006，16（3）：172-175.

[19] TENG RW，LI HZ，CHEN JT，et al. Complete assignment of 1H and 13C NMR data for nine protopanaxatriol glycosides[J]. Magn Reson Chem，2002，40（7）：483-488.

[20] 李國紅，沈月毛，王啟方，等.發(fā)酵三七中的皂苷成分研究[J].中草藥，2005，36（4）：499-500.

[21] RYU JH，PARK JH，EUN JH，et al. A dammarane glycoside from Korean red ginseng[J]. Phytochemistry，1997，44（5）：931-933.

[22] ZHANG SL，TAKEDA T，ZHU T，et al. A new minor saponin from the leaves of panax ginseng[J]. Planta Med，1990，56（3）：298-300.

[23] 張彩，史磊.人參化學成分和藥理作用研究進展[J].食品與藥品，2016，18（4）：300-304.

[24] 曾露露，丁傳波，劉文叢，等.人參稀有皂苷藥理活性的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥，2018，29（3）：680-682.

[25] 方進波，劉焱文，張彥文，等.空心蓮子草抗病毒活性成分研究[J].中草藥，2007，38（7）：976-979.

[26] 張?？?，陸再華，楊妍華.三七總皂苷對細胞免疫炎癥因子作用的研究進展[J].中國藥師，2011，14（9）：1349-1350.

[27] 呂青遠.三七葉苷的化學成分及藥理作用[J].時珍國醫(yī)國藥，2006，17（10）：2065-2066.

（收稿日期：2018-06-08 修回日期：2018-11-12）

（編輯：余慶華）