朱勤　陳憶鳳　顏婕　孫偉　祝海梅

摘 要 通過對紫花苜?；A成分進行測定，發(fā)現(xiàn)其可作為飼料蛋白源原料，采用酸性、堿性和中性蛋白酶、魚體內(nèi)源酶酶測定紫花苜蓿消化率，發(fā)現(xiàn)其能夠被很好地消化，可初步確定紫花苜?？勺鳛樗a(chǎn)飼料的原料。結(jié)果表明，飼料中添加適量的苜蓿草粉對提高動物的免疫機能、繁殖性能都有促進作用。

關鍵詞 紫花苜蓿;營養(yǎng)成分;消化率;胰蛋白酶

中圖分類號：S823.5 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.12.003

紫花苜蓿又名紫苜蓿，是豆科植物家族中的一員，是世界上分布最廣、栽培歷史最古老的豆科牧草。隨著我國牧草產(chǎn)業(yè)化及對草產(chǎn)品需求的快速增加，紫花苜蓿的栽培面積呈迅速擴大之勢[1-2]，且其氨基酸種類齊全且較平衡，是最具經(jīng)濟價值的牧草品種之一。并且其適口性好，營養(yǎng)豐富，有良好的飼喂效果，因此在養(yǎng)殖中占有重要的地位，可作為優(yōu)良的飼草推動漁牧業(yè)的發(fā)展[3]。本研究在測定紫花苜蓿的主要成分含量的基礎上，測定紫花苜蓿在水產(chǎn)動物中的消化情況，以探索其作為水產(chǎn)飼料原料的應用情況。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紫花苜蓿草來自內(nèi)蒙古阿魯科爾沁旗惠農(nóng)草業(yè)有限公司;硫酸、混合指示劑、氫氧化鈉等均為分析純購自國藥集團化學試劑有限公司;胰蛋白酶、堿性蛋白酶購自南寧龐博有限公司;胃蛋白酶購自Sigma有限公司。

1.2 主要儀器設備

HH-2數(shù)顯恒溫水浴振蕩器，產(chǎn)自國華公司;自動定氮儀，產(chǎn)自上海纖檢儀器有限公司;電子分析天平、pH計，產(chǎn)自梅特勒—托利多儀器上海有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 基礎成分測定

粗灰分測定參照GB/T6438-2007中的方法，水分測定參照GB/T6435-2014中的方法，粗脂肪測定參照GB/T6433-2006中的方法，粗纖維測定參照GB/T6434-2006中的方法，粗纖維測定參照GB/T6432-2018中的方法。

1.3.2 草魚內(nèi)臟酶酶液的制取

解剖鮮活的草魚，取其腸道部分，加入1∶30磷酸鹽緩沖溶液，然后勻漿器勻漿后，過濾，去除結(jié)締組織，濾液放入冰箱冷凍保藏。

1.3.3 魷魚內(nèi)臟酶的制取

將新鮮的魷魚內(nèi)臟，加入1∶20的Tris-鹽酸緩沖溶液，然后勻漿器勻漿后，過濾，去除結(jié)締組織，濾液放入冰箱冷凍保藏。

1.3.4 蛋白質(zhì)消化率的測定

取試樣2 g，分別加入一定量的胰蛋白酶、堿性蛋白酶、胃蛋白酶酶液和制備的魷魚內(nèi)臟酶和草魚內(nèi)臟酶酶液，在40 ℃恒溫振蕩酶解6 h，將酶解液過濾，并用丙酮洗滌2次;將殘渣無損地移入凱氏燒瓶中，105 ℃烘箱內(nèi)烘干，測定粗蛋白含量，同時稱取烘干后的樣品（精確至0.000 2 g）測定未酶解樣品蛋白含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 紫花苜?；A成分的測定

每個指標的測定均做兩組試驗，每組三個平行，得到紫花苜蓿的基礎成分如表1所示。由結(jié)果可知，紫花苜蓿的粗蛋白含量為20.37%，粗纖維含量為33.62%。蛋白質(zhì)是魚類生長的主要營養(yǎng)物質(zhì)，魚粉一直以來是重要的蛋白源提供者，但因為其短缺、價格高漲的問題，急需尋找可替代它的原料[4]。紫花苜蓿粗蛋白含量高，轉(zhuǎn)化效價高，是良好的蛋白源提供者。

2.2 不同的酶在紫花苜蓿中消化率的測定

為了研究紫花苜蓿蛋白是否適合水產(chǎn)動物腸道的吸收利用，以胰蛋白酶、堿性蛋白酶、胃蛋白酶、草魚及魷魚內(nèi)臟酶進行蛋白消化的離體試驗，得到以不同的酶酶解后蛋白消化率，結(jié)果如圖1所示。

由圖1可知，草魚內(nèi)臟酶酶解紫花苜蓿的消化率為37.42%，魷魚內(nèi)臟酶酶解紫花苜蓿的消化率為40.37%，與胰蛋白酶的結(jié)果接近，均優(yōu)于堿性蛋白酶和酸性蛋白酶。但由于是離體試驗且酶活力不穩(wěn)定，實際消化率應偏高于本試驗結(jié)果。何云等[5]發(fā)現(xiàn)，在黃河鯉魚飼糧中添加10%苜蓿草粉能顯著提高其消化酶活性及腸絨毛高度。此外研究發(fā)現(xiàn)，在魚飼料中添加適當?shù)能俎２莘塾欣谔岣唪~的生長性能，改善外觀體型[6]。因此，紫花苜蓿所含蛋白能被食草類和雜食魚類腸道消化利用，可作為水產(chǎn)飼料原料。

2.3 不同飼料原料的蛋白消化率

在飼料原料行業(yè)中，豆粕是飼料生產(chǎn)中最優(yōu)質(zhì)的蛋白原料，菜粕是水產(chǎn)飼料使用量最大的原料，玉米蛋白飼料也是使用普遍的蛋白原料之一。本試驗進行了對比測定，以胰蛋白酶作為消化酶以最適宜的條件分別測定不同原料的消化率，結(jié)果如圖2所示。

由結(jié)果可知，在相同加酶量條件下，豆粕的蛋白質(zhì)消化率最高，達87.1%;其次是紫花苜蓿74.84%;最后是玉米蛋白飼料53.07%。由此可看出，紫花苜蓿具有良好的可消化性，可作為水產(chǎn)飼料原料。

3 結(jié)語

研究表明，飼料中添加適量的苜蓿草粉對提高動物的免疫機能、繁殖性能都有促進作用。目前，苜蓿草粉及其提取物在豬、牛、羊和兔等畜禽動物養(yǎng)殖方面已被廣泛應用，且應用效果很好，但在水產(chǎn)動物方面，只有在草魚、團頭魴鯉魚等魚類中有所研究[7-8]。本試驗為進一步研究紫花苜蓿在水產(chǎn)飼料中的應用提供一定的理論數(shù)據(jù)。

參考文獻：

[1] 張春梅，王成章，胡喜峰，等.紫花苜蓿的營養(yǎng)價值及應用研究進展[J].中國飼料，2005（1）：15-17.

[2] 王雪，李志萍，孫建軍，等.中國苜蓿品種的選育與研究[J].草業(yè)科學，2014，31（3）：512-518.

[3] 王鳳芝.紫花苜蓿的栽培技術(shù)及在養(yǎng)殖業(yè)中的應用[J].現(xiàn)代畜牧科技，2019（5）：26-27.

[4] 艾春香，陶青燕.魚粉替代：魚粉高價運行下水產(chǎn)配合飼料研發(fā)的技術(shù)對策[J].飼料工業(yè)，2013，34（10）：1-7.

[5] 何云，王成章，嚴學兵，等.苜蓿草粉對黃河鯉魚消化生理指標的影響[J].草地學報，2010，18（1）：121-125，136.

[6] 李科云，龔福春，李大雄.魚用優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)飼草的引種與品比篩選試驗報告[J].草業(yè)科學，1999（4）：54-60.

[7] 馮德慶，唐龍飛，黃秀聲，等.優(yōu)質(zhì)牧草對提高草魚品質(zhì)的研究[J].水利漁業(yè)，2006（2）：81-82.

[8] 胡喜峰，王成章，張春梅，等.不同水平苜蓿草粉對團頭魴生長性能及肉品質(zhì)的影響[J].西北農(nóng)林科技大學學報（自然科學版），2005（11）：49-56.

（責任編輯：劉昀）