楊義中
(阜寧縣人民醫(yī)院輸血科,江蘇 阜寧224400)
《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》要求輸注紅細(xì)胞成分或含紅細(xì)胞的成份在輸血前必須進(jìn)行交叉配血[1]。交叉配血是保障臨床輸血安全的最后且是最重要的一步,可發(fā)現(xiàn)血型鑒定錯誤、是否亞型、是否存在不規(guī)則抗體和直抗陽性等因素,確保安全輸血的同時尚能發(fā)現(xiàn)或診斷某些血液疾病。由于微柱凝膠法靈敏度高、特異性好、操作簡單、易標(biāo)準(zhǔn)化、結(jié)果可長時間保存等優(yōu)點,在各醫(yī)院普遍使用[2]。目前采供血機(jī)構(gòu)提供的絕大多數(shù)為紅細(xì)胞懸液,因含的血漿已經(jīng)很少,故有學(xué)者認(rèn)為可取消次側(cè)交叉配血[3]?,F(xiàn)將我們工作中遇到的47例ABO次側(cè)交叉配血不合情況報告如下。
1.1 研究對象 2011年9月至2017年4月本院申請輸血的患者中,篩選出交叉配血試驗出現(xiàn)次側(cè)凝集的紅細(xì)胞共47例。年齡3d~91歲,中位年齡66歲。
1.2 試劑與儀器 抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供;A、B、O標(biāo)準(zhǔn)試劑紅細(xì)胞由本室自制,分別來自3名獻(xiàn)血者。不規(guī)則抗體檢測試劑(人紅細(xì)胞)由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供,凝聚胺試劑由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供;微柱凝膠卡由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供。FYQ型免疫微柱孵育器、DT-3A血型血清學(xué)離心機(jī)由長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司提供。Baso2005-1血清學(xué)專用離心機(jī)(臺灣貝索公司),顯微鏡。
1.3 交叉配血方法 常規(guī)使用微柱凝膠卡式法,嚴(yán)格按試劑說明書操作規(guī)程操作。次側(cè)交叉不合時,復(fù)核供受者ABO血型(正反定型),再對獻(xiàn)血者血漿作不規(guī)則抗體篩查和對患者紅細(xì)胞作自身對照和直接抗人球蛋白試驗,患者直接抗人球蛋白試驗陽性時,觀察其是否高于或等于次側(cè)交叉凝集強(qiáng)度,并用凝聚胺法再次進(jìn)行交叉配血。
次側(cè)交叉配血不合47例中,受血者直抗陽性36例,占總數(shù)的76.6%,患者血型鑒定錯誤8例,獻(xiàn)血者血型錯誤1例,獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性2例,分別占 17.0%,2.1%和 4.3%。 47 例交叉配血次則不合原因分析見表1。
表1 47例交叉配血次則不合原因分類
臨床輸血前必須進(jìn)行交叉配血,確定供血者與受血者血液是否相合,以避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。
進(jìn)行次側(cè)交叉配血,能夠發(fā)現(xiàn)供血者、受血者血型錯誤。當(dāng)遇到配血次側(cè)有凝集時必須先復(fù)核患者和獻(xiàn)血者的ABO血型。附表結(jié)果顯示有8例患者血型錯誤被發(fā)現(xiàn),有臨床醫(yī)生申請單填寫錯誤,輸血科工作人員未按先檢測血型,再交叉配血流程,而是根據(jù)所填血型直接交叉配血,此行為嚴(yán)重違反操作規(guī)程,應(yīng)杜絕?;颊邩?biāo)本標(biāo)識錯誤也不能忽視,我們在交叉配血發(fā)現(xiàn)次側(cè)不符時,復(fù)核受血者血型錯誤,與入院初查血型不符,追查原因為護(hù)理人員同時采集兩個患者標(biāo)本,致張冠李戴。目前采供血機(jī)構(gòu)對獻(xiàn)血者也進(jìn)行ABO正反定型,但仍存在血型標(biāo)識錯誤或血型誤定的可能性[4]。我們就遇到1例在常規(guī)交叉配血次側(cè)凝集時,復(fù)核獻(xiàn)血者血型是“A”被標(biāo)識為“AB”,從而避免了一次輸血事故。
我們的結(jié)果表明患者紅細(xì)胞直抗陽性是引起次側(cè)交叉配血凝集的主要因素,占76.6%。直接抗人球蛋白試驗是用于檢測患者體內(nèi)紅細(xì)胞是否被不完全抗體和(或)補體致敏。DAT陽性是AIHA的重要診斷依據(jù)[5]。故遇此情況時可向臨床醫(yī)生反饋結(jié)果,協(xié)助診斷AIHA。而交叉配血次側(cè)凝集且DAT陽性的病例,其凝集程度均小于或等于DAT凝集強(qiáng)度,說明次側(cè)交叉不合的原因是來自DAT陽性,而非抗原抗體反應(yīng)[6]。即可斷定交叉配血試驗配合,紅細(xì)胞可以輸注。雖然DAT陽性是診斷AIHA的一個重要指標(biāo),但是DAT陽性并不意味著一個人紅細(xì)胞存活期的縮短,其并不是導(dǎo)致輸血無效的真正原因[7]。對于DAT陽性大多數(shù)醫(yī)生選擇洗滌紅細(xì)胞。近來認(rèn)為DAT陽性的非AIHA患者及AIHA患者輸注去白紅細(xì)胞同樣是安全有效[8]。
供血者體內(nèi)存在抗受血者紅細(xì)胞的抗體也是交叉配血次側(cè)不合的一個因素。我們在日常交叉配血中,次側(cè)不合有2例為獻(xiàn)血者血漿含不規(guī)則抗體抗E引起。在我國,目前沒有規(guī)定獻(xiàn)血者須進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查[9]。但基于獻(xiàn)血人群中存在一定比例的不規(guī)則抗體,紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體在正常人群中檢出率為0.2~3%[10]。國內(nèi)也曾有專家提出有必要開展對獻(xiàn)血者 (特別是有妊娠史和輸血史)進(jìn)行抗體篩選和鑒定[11],以減少不規(guī)則抗體進(jìn)入受血者體內(nèi)的可能性,確保輸血安全。當(dāng)進(jìn)行次側(cè)交叉配血出現(xiàn)不合,即對獻(xiàn)血者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選,證實存在不規(guī)則抗體時,輸血科將試驗結(jié)果向采供血機(jī)構(gòu)反饋,避免其血漿類制品用于臨床。同時反饋獻(xiàn)血者,告之有關(guān)情況,特別是計劃生育女性,評估其孕育發(fā)生新生兒溶血病風(fēng)險。特殊罕見的抗體還可貯存作稀有血型檢測使用。隨著重復(fù)獻(xiàn)血者增多,經(jīng)過臨床的反復(fù)交叉配血,可提高不規(guī)則抗體檢出率,此不適為目前我國在獻(xiàn)血者中篩選不規(guī)則抗體既經(jīng)濟(jì)又有效的方法。既發(fā)現(xiàn)抗體消除隱患,又避免在獻(xiàn)血者中大規(guī)模篩選,節(jié)約人力、物力、財力,符合我國國情。根據(jù)規(guī)定,目前臨床上輸注血漿、冷沉淀和機(jī)采血小板時,患者和供血者不進(jìn)行交叉配血,只是同型或相容輸注,這樣就有可能使供者體內(nèi)的不規(guī)則抗體輸入患者體內(nèi)。如患者紅細(xì)胞正好有相對應(yīng)的抗原,就會發(fā)生溶血性輸血不良反應(yīng),不但輸血無效,而且對患者生命安全構(gòu)成危害。在日常工作中,存在將這種含不規(guī)則抗體的血漿和冷沉淀早于紅細(xì)胞用于臨床的現(xiàn)象。故我們建議采供血機(jī)構(gòu)血漿制劑應(yīng)在紅細(xì)胞使用后再發(fā)于臨床使用(最好在紅細(xì)胞有效期35d后再發(fā)于臨床)。
兩種交叉配血方法結(jié)合使用,可取長補短。微柱凝膠和凝聚胺均為可檢測IgG抗體的方法。凝聚胺法只有當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)中存在紅細(xì)胞抗原特異性的同種抗體或自身抗體并在紅細(xì)胞與紅細(xì)胞之間形成鉸鏈時才能發(fā)生凝集反應(yīng),而DAT陽性的非AIHA患者紅細(xì)胞表面粘附的非紅細(xì)胞抗原特異性抗體,不能在紅細(xì)胞間形成鉸鏈,不會發(fā)生凝集反應(yīng)。故可通過凝聚胺法和紅細(xì)胞釋放試驗來判斷微柱凝膠中的次側(cè)陽性究竟是由患者紅細(xì)胞造成的還是獻(xiàn)血者血漿存在不規(guī)則抗體造成的,也有助于區(qū)分AIHA和非AIHA。