烏日汗，包連勝，包秀萍，李 爽，王歆遠，賈士儒*

（1.天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院，天津 300457；2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028043；3.內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院康復(fù)保健醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000）

自古以來，飲食療法在蒙醫(yī)學(xué)中占據(jù)重要地位，而酸馬奶是最早應(yīng)用于食療的飲料[1]。蒙古人釀制酸馬奶的技術(shù)和用其治療疾病之事，早在元代即已馳名國內(nèi)外，亦有元代以前給受傷大出血昏厥的人喝酸馬奶以救治的記載[2]。據(jù)文獻報道，酸馬奶對結(jié)核病為主的傳染性疾病、消化系統(tǒng)疾病、心血管系統(tǒng)疾病等均有明顯的輔助治療作用[3-6]。因此，目前俄羅斯、蒙古國和我國內(nèi)蒙古地區(qū)還專門設(shè)立了“酸馬奶醫(yī)療中心”，用其治療或輔助治療消化系統(tǒng)病、心血管系統(tǒng)病等慢性疾病[7]。酸馬奶的這些治療作用與其化學(xué)成分、菌群結(jié)構(gòu)等密切相關(guān)。酸馬奶是以新鮮馬奶為原料，經(jīng)乳酸菌和酵母菌等微生物共同發(fā)酵而成的。酸馬奶的化學(xué)組成不僅取決于原料馬奶，也與其微生物組成及含量有密切關(guān)系。群落結(jié)構(gòu)除受到發(fā)酵溫度、發(fā)酵時間等因素的影響以外，發(fā)酵引子也是非常重要的影響因素，發(fā)酵引子的組成、品質(zhì)和活力與酸馬奶質(zhì)量的好壞、風(fēng)味特點等有密切關(guān)系。酸馬奶的發(fā)酵引子蒙語稱為“horongo”，是延續(xù)酸馬奶質(zhì)量的關(guān)鍵，因此了解酸馬奶發(fā)酵引子的化學(xué)組成及微生物多樣性至關(guān)重要。以往對于某種體系微生物多樣性的測定多采用傳統(tǒng)分類鑒定方法，但此種方法有選擇性和局限性，因自然界中絕大部分微生物仍處于無法培養(yǎng)狀態(tài)。隨著分子生物學(xué)手段應(yīng)用于微生物群落結(jié)構(gòu)分析，彌補了傳統(tǒng)分類學(xué)方法的不足，大大促進了對環(huán)境中不可培養(yǎng)微生物的研究[8]，尤其是Illumina MiSeq為代表的第2代測序技術(shù)，采用邊合成邊測序原理，不僅可以對不同樣品的多個可變區(qū)同時進行測序，而且擁有較高的測序速度和通量，結(jié)果可信度也較高[9]。目前該測序技術(shù)在微生物多樣性和群落結(jié)構(gòu)分析方面已經(jīng)獲得廣泛的應(yīng)用，但利用該技術(shù)在酸馬奶群落結(jié)構(gòu)方面的研究尚鮮見報道。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

酸馬奶引子：取自內(nèi)蒙古通遼市科爾沁區(qū)食療用酸馬奶生產(chǎn)地的3 個平行樣品（命名為酸馬奶引子-1、酸馬奶引子-2、酸馬奶引子-3），測定pH值后分別裝入采樣管中封口，立即在液氮中冷凍后帶回實驗室保存于-80 ℃，進行后續(xù)實驗。

FastDNA?Spin Kit for Soil試劑盒 美國MP Biomedicals公司；Agencourt AMPure XP核酸純化磁珠美國Beckman Coulter公司；TopTaq DNA Polymerase kit北京全式金生物公司。

1.2 儀器與設(shè)備

PHS-3C pH計 上海儀電科學(xué)儀器公司；1260液相色譜系統(tǒng)、7890A氣相色譜儀、2100生物分析儀美國Agilent公司；NanoDrop 2000分光光度計、Invitrogen Qubit 3.0分光光度計、ABI 2720 Thermal Cycler擴增儀 美國Thermo Fisher Scientific公司；MiSeq臺式測序儀 美國Illumina公司；5810R高速冷凍離心機德國Eppendorf公司。

1.3 方法

1.3.1 化學(xué)成分分析

1.3.1.1 乳糖、半乳糖和葡萄糖含量的測定[8]

將凍存的酸馬奶引子樣品在室溫下融化后搖勻，稱取0.4 g該樣品，與1.2 mL超純水混合均勻，超聲波處理3 min，以105 ℃高壓處理15 min，再經(jīng)4 ℃、4 500 r/min離心10 min。取上清液經(jīng)0.22 μm膜過濾后進入Agilent 1260液相色譜系統(tǒng)（Bio-Rad HPX-87H離子交換柱（300 mm×7.8 mm）），使用示差檢測器檢測。流動相為5 mmol/L硫酸溶液，流速0.6 mL/min，柱溫60 ℃，進樣量20 μL，18 min停止。

1.3.1.2 有機酸含量的測定

將凍存的酸馬奶引子樣品在室溫下融化搖勻，稱取1.0 g樣品，與3 mL 1 mol/L的鹽酸振蕩混勻，12 000 r/min離心15 min，吸取上清液經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后進入1260液相色譜系統(tǒng)分析。流動相為5 mmol/L的硫酸，流速0.6 mL/min，示差檢測器檢測，柱溫60 ℃，進樣量20 μL，25 min停止。

1.3.1.3 游離脂肪酸含量的測定[10]

脂肪的提?。簩龃鏄悠肥覝厝诨瘬u勻，取1 mL樣品加入1.5 mL氯仿-甲醇溶液（2∶1，V/V），25 ℃浸提3 h，加入0.9%氯化鈉溶液靜置分層，收集下層氯仿層氮吹濃縮。

脂肪酸甲酯化：在脂肪提取物中加入2 mL正己烷搖勻，加入2 mL 14%三氟化硼-甲醇，50 ℃水浴5 min，再加入飽和氯化鈉溶液至10 mL，離心取上清液，經(jīng)0.45 μm濾膜過濾后進行分析。

氣相色譜檢測：采用配有氫火焰檢測器的7890A氣相色譜儀（HP-innowax（30 m×0.32 mm，0.5 μm））進行檢測。載氣為氮氣，恒壓：線速率38.4 cm/s；進樣口溫度270 ℃，進樣體積1 μL，分流比20∶1；柱溫箱溫度：初始50 ℃保持2 min，以25 ℃/min的升溫速率升溫到175 ℃，以3.5 ℃/min的升溫速率升溫到230 ℃，保持5 min；檢測器溫度280 ℃，氣體設(shè)置為氫氣40 mL/min、空氣450 mL/min、尾吹氣30 mL/min。

1.3.2 細菌多樣性分析

1.3.2.1 宏基因組DNA的提取

將各酸馬奶引子樣品在室溫充分融化，按照FastDNA?Spin Kit for Soil試劑盒說明書抽提基因組DNA，并使用Nanodrop 2000檢測其質(zhì)量（質(zhì)量濃度≥20 ng/μL，總量≥500 ng，OD260nm/OD280nm=1.8～2.0），同時利用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測其完整性。

1.3.2.2 目的區(qū)域擴增

以提取的基因組DNA為模板，使用16S rDNA V3-V4區(qū)特異引物341F（5’-CCTACGGGNGGCWGCAG-3’）和805R（5’-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3’），并采用高效和高保真酶（TopTaq DNA Polymerase kit）進行聚合酶鏈式反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴增，設(shè)置3 個重復(fù)實驗，擴增條件為：94 ℃預(yù)變性2 min；94 ℃變性20 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，共進行25 個循環(huán)；最后72 ℃延伸10 min。

1.3.2.3 PCR產(chǎn)物的混樣和純化

PCR產(chǎn)物使用1%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測；將同一樣本的3 個平行擴增產(chǎn)物混合，每個樣本加入等體積的Agencourt AMpure XP核酸純化磁珠對產(chǎn)物進行純化。

1.3.2.4 各樣本添加特異性標簽序列

利用帶有Index序列的引物，通過高保真PCR向文庫末端引入特異性標簽序列。此處采用8 個循環(huán)數(shù)的PCR程序。擴增后的產(chǎn)物利用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，使用核酸純化磁珠對擴增產(chǎn)物進行純化，即可得到各樣本的原始文庫。

1.3.2.5 文庫進行定量及混合

將上一步得到的純化產(chǎn)物利用1%瓊脂糖凝膠進行初步定量，根據(jù)其結(jié)果對已經(jīng)帶有各自Index標簽的樣本文庫濃度進行適當稀釋，后利用Qubit對文庫進行精確定量，根據(jù)不同樣品的測序通量要求，按相應(yīng)比例混合樣品，后采用MiSeq平臺，2×250 bp的雙端測序策略對文庫進行測序，后續(xù)進行生物信息學(xué)分析。測序及生物信息服務(wù)由上海天昊生物科技有限公司完成。

1.3.2.6 生物信息學(xué)分析

測序得到的原始數(shù)據(jù)（Raw Data），存在一定比例的干擾數(shù)據(jù)（Dirty Data）。為得到高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)，以提高后續(xù)生物信息分析準確性、可靠性，首先對原始數(shù)據(jù)進行拼接、過濾，得到質(zhì)量和可信度較高的優(yōu)化序列（Clean reads），然后對優(yōu)化序列在97%水平上進行可操作分類單元（operational taxonomic units，OTU）聚類，并使用mothur軟件將每條OTU代表序列與數(shù)據(jù)庫進行比對從而完成OTU的物種注釋。通過對OTU進行豐度、Alpha多樣性以及物種在各個分類水平上的群落結(jié)果統(tǒng)計分析，得到細菌群落結(jié)構(gòu)組成。

2 結(jié)果與分析

2.1 化學(xué)組成分析結(jié)果

圖1 酸馬奶引子樣品中糖含量Fig. 1 Sugar content of koumiss starter culture

圖2 酸馬奶引子樣品中4 種有機酸含量Fig. 2 Contents of organic acids in koumiss starter culture

該酸馬奶引子樣品pH值為3.54；糖含量檢測結(jié)果顯示（圖1），該酸馬奶發(fā)酵引子中乳糖和半乳糖質(zhì)量分數(shù)分別為（0.281±0.011）%和（0.100±0.003）%，未檢測到葡萄糖。此外，檢測的4 種有機酸（圖2）中，乳酸質(zhì)量分數(shù)最高，為（1.506±0.069）%；其次為丁酸（1.143±0.061）%，乙酸和丙酸質(zhì)量分數(shù)分別為（0.345±0.014）%、（0.053±0.002）%。

表1 酸馬奶引子樣品中脂肪酸組成及含量Table 1 Fatty acid composition of koumiss starter culture mg/L

表1顯示，共檢測到19 種脂肪酸，包括12 種飽和脂肪酸和7 種不飽和脂肪酸。飽和脂肪酸中丁酸（C4：0）質(zhì)量濃度最高，為（78.73±1.36）mg/L；其次為癸酸（C10：0），質(zhì)量濃度為（18.82±1.03）mg/L。檢測到的7 種不飽和脂肪酸中，包括十四碳烯酸（C14：1）、棕櫚油酸（C16：1）、油酸（C18：1n9c）3 種單不飽和脂肪酸和亞油酸（C18：2n6c）、γ-亞麻酸（C18：3n6）、α-亞麻酸（C18：3n3）、二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）（C22：6n3）4 種多不飽和脂肪酸。多不飽和脂肪酸中α-亞麻酸（C18：3n3）質(zhì)量濃度高達（14.12±0.36）mg/L。

2.2 細菌多樣性分析

2.2.1 序列豐度和多樣性

表2 樣品信息、序列豐度和多樣性指數(shù)統(tǒng)計Table 2 Sample information, sequence abundance and microbial diversity of koumiss starter culture

通過Illumina MiSeq第2代測序技術(shù)，納入本研究的3 個樣品共產(chǎn)生230 091 條原始序列，經(jīng)過質(zhì)控和過濾后共得到186 248 條高質(zhì)量優(yōu)化序列，各樣本所產(chǎn)生序列數(shù)見表2，該酸馬奶引子樣品平均獲得62 082.7 條優(yōu)化序列。將所得優(yōu)化序列以97%的相似性進行聚類，相似度大于97%的序列將聚為同一個OTU，同時使用de novo模式去除嵌合體序列，最終產(chǎn)生34.3 個OTU，每個樣品OTU聚類后使用mothur軟件找出與OTU序列相似度最高且可信度達80%以上的物種信息用于OTU注釋。該酸馬奶引子樣品可以注釋到1 個界、4 個門、8 個綱、13 個目、22 個科、25 個屬和28 個種，各分類水平上的OTU數(shù)目見表3。

表3 各分類水平上的OTU數(shù)目統(tǒng)計Table 3 Statistics of the numbers of OTUs at each taxonomic level

2.2.2 Alpha多樣性分析

圖3 樣品的細菌稀疏曲線圖Fig. 3 Rarefaction analysis of the pyrosequencing reads in samples of koumiss starter culture

圖4 樣品的Shannon-Wiener曲線Fig. 4 Shannon-Wiener index curve of samples of koumiss starter culture

圖5 樣品的Rank Abundance曲線Fig. 5 Rank Abundance distribution curve of samples of koumiss starter culture

該樣本菌群豐富度指數(shù)Chao1指數(shù)和ACE指數(shù)分別為35.2±3.3和35.4±2.9（表2）；樣本的稀釋性曲線如圖3所示，該曲線隨著抽取序列數(shù)的增加而趨于平緩，說明樣本的測序數(shù)據(jù)量合理，更多的數(shù)據(jù)量只會產(chǎn)生少量新的OTU。但Shannon多樣性曲線已經(jīng)飽和，如圖4所示，說明即使再增加測序量，樣本微生物的多樣性已經(jīng)不再隨之發(fā)生變化，該測序數(shù)據(jù)量可以反映樣本絕大多數(shù)的微生物信息。從圖5可知，Rank Abundance曲線在橫坐標上的范圍較大且整體較平滑，表明其物種的豐度較高且物種的分布較均勻。

2.2.3 群落結(jié)構(gòu)分析

該酸馬奶引子樣品鑒定為4 個門，分別為厚壁菌門（Firmicutes）、變形菌門（Proteobacteria）、放線菌門（Actinobacteria）和擬桿菌門（Bacteroidetes），其中厚壁菌門在樣品中的含量最高（88.75%），其次為變形菌門（11.12%）（圖5A）；從綱的分類水平來看（圖5B），酸馬奶發(fā)酵引子細菌在芽孢桿菌綱（Bacilli，88.74%）、α-變形桿菌綱（Alphaproteobacteria，9.87%）、γ-變形桿菌綱（Gammaproteobacteria，1.25%）中均有分布；從目的分類水平來看（圖5C），酸馬奶發(fā)酵引子細菌主要在乳酸桿菌目（Lactobacillales，88.74%）和紅螺菌目（Rhodospirillales，9.84%）有分布；在科的分類水平上，該樣品細菌主要在乳桿菌科（Lactobacillaceae，84.08%）、醋桿菌科（Acetobacteraceae，9.84%）和鏈球菌科（Streptococcaceae，4.59%）有分布；在屬的分類水平上，如圖5E所示，相對豐度由大到小依次為乳桿菌屬（Lactobacillus，84.08%）、醋桿菌屬（Acetobacter，9.83%）、乳球菌屬（Lactococcus，2.41%）、鏈球菌屬（Streptococcus，2.18%）、其他（others，1.5%）。由此可見，乳酸桿菌屬為該酸馬奶引子樣品的絕對優(yōu)勢種群。

圖6 樣品中菌群相對豐度Fig. 6 Relative abundances of bacteria in samples of koumiss starter culture at various taxonomic levels

3 討 論

酸馬奶口味存在地區(qū)差異，這種差異可由發(fā)酵引子延續(xù)。因為酸馬奶的發(fā)酵引子即為發(fā)酵結(jié)束后留存的酸馬奶，可采用不同的方法保存至下一次發(fā)酵，本研究酸馬奶引子樣品為該地區(qū)食療用酸馬奶釀制方將發(fā)酵結(jié)束后的酸馬奶在罐中冷藏保存。酸馬奶引子是專屬的，不僅是酸馬奶發(fā)酵的基礎(chǔ)，也可代表該地區(qū)酸馬奶的基本特點。

大多數(shù)成年人由于缺乏乳糖酶或乳糖酶活力低而不能消化利用乳糖，導(dǎo)致乳糖不耐癥，表現(xiàn)為腸胃氣脹、腹痛和腹瀉[11-12]。鮮馬乳中所含的糖類物質(zhì)幾乎全為乳糖，且比牛乳的含量高出20%之多[13]。孫天松等[7]檢測新疆地區(qū)28 個酸馬奶樣品化學(xué)組成，結(jié)果顯示其乳糖質(zhì)量濃度為1.34～3.4 g/100 mL。蒙古國酸馬奶的乳糖質(zhì)量分數(shù)平均為2.3%（發(fā)酵時間18 h），前蘇聯(lián)酸馬奶的乳糖質(zhì)量分數(shù)為2.6%（發(fā)酵時間24 h）[14]。鮮馬乳中乳糖含量降低是由于鮮馬乳中的乳糖在乳酸菌的作用下，通過半乳糖苷透過酶和磷酸轉(zhuǎn)移酶的作用進入細胞，然后由β-半乳糖苷酶水解成一分子的葡萄糖和一分子的半乳糖。本研究酸馬奶引子樣品中乳糖含量僅為（0.281±0.011）%，低于上述研究結(jié)果，該結(jié)果證明，酸馬奶發(fā)酵結(jié)束，保存引子的過程中此反應(yīng)雖然緩慢，但仍在繼續(xù)。因此酸馬奶非常適合于乳糖不耐癥患者飲用。

馬乳中的乳糖在乳酸菌和酵母菌的作用下降解，產(chǎn)生大量以乳酸為主的有機酸，使得其pH值下降。布仁其其格等[15]對內(nèi)蒙古錫林郭勒盟正鑲黃旗農(nóng)戶家酸馬奶發(fā)酵過程進行檢測，pH值最低達到3.54。孫天松等[7]對新疆維吾爾自治區(qū)不同地區(qū)28 份酸馬奶樣品測定的pH值為3.47～4.56。Ishii[16]對蒙古國游牧民族3 個地區(qū)的酸馬奶進行了測定，pH值為3.7～3.9。本研究中酸馬奶引子樣品pH值為3.54，處于較低水平。酸馬奶pH值受到微生物組成、環(huán)境、氣候、發(fā)酵溫度和發(fā)酵時間等因素的影響而產(chǎn)生一定差異。

有機酸不僅是酸乳中乳糖代謝的中間產(chǎn)物，又是形成某些風(fēng)味物質(zhì)的前體物。本研究檢測的4 種有機酸中，乳酸質(zhì)量分數(shù)最高，為（1.506±0.069）%。在發(fā)酵乳的生產(chǎn)中乳酸起著非常重要的作用，它不僅是導(dǎo)致pH值降低的主要原因，也是酸乳濃厚的風(fēng)味和香味的來源之一[17]。本樣品中丁酸含量僅次于乳酸。據(jù)臨床數(shù)據(jù)顯示，胃排空延遲為常見疾病，尤其多發(fā)于功能性消化不良、糖尿病性或者特發(fā)性胃輕癱等患者，主要表現(xiàn)為胃飽脹感、腹痛、腹脹、惡心、嘔吐等[18-23]。丁酸可以特異性的通過GPR43受體促進任何小鼠gastroid中產(chǎn)ghrelin內(nèi)分泌細胞的分化，從而增加胃的三相收縮促進胃排空[24]。

酸乳制備過程中，乳脂類的酶促水解反應(yīng)最終產(chǎn)生游離脂肪酸和甘油。此外，乳糖代謝、氨基酸脫氨基和脂類氧化等都可能形成游離脂肪酸。本研究共檢測出19 種脂肪酸，包括12 種飽和脂肪酸和7 種不飽和脂肪酸。不飽和脂肪酸中的多不飽和脂肪酸是人體必需的脂肪酸，具有諸多生理功能，例如調(diào)節(jié)血脂、改善血液循環(huán)、防止動脈粥樣硬化和血栓形成等[25-26]。但多不飽和脂肪酸機體自身不能合成，必需由食物供給。本樣品檢測出4 種多不飽和脂肪酸，分別為亞油酸（C18：2）、α-亞麻酸（C18：3n3）、γ-亞麻酸（C18：3n6）和DHA（C22：6n3）。

酸馬奶發(fā)酵的特有風(fēng)味和營養(yǎng)價值是由微生物之間的共同作用促成的。酸馬奶中微生物的多樣性極其豐富。多年來，在酸馬奶微生物多樣性的研究中，多采用傳統(tǒng)分類鑒定方法。孫天松等[27]采用此方法從新疆地區(qū)30 份酸馬奶中共分離到152 株乳酸菌，其中Lactobacillus helveticus占51.3%，Lactobacillus acidophilus占18.4%，Lactobacillus casei subsp. pseudoplantarum占8.6%。Ring等[28]也采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方式鑒定蒙古國酸馬奶中乳酸菌的多樣性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乳桿菌屬是酸馬奶中的優(yōu)勢菌群，同時也檢測到了嗜熱鏈球菌、拉烏爾菌屬、嗜冷桿菌屬等。由于該種方法的局限性，同時隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，高通量測序技術(shù)自2006年開始廣泛應(yīng)用于微生物群落結(jié)構(gòu)分析領(lǐng)域。布仁其其格[8]采用454焦磷酸高通量測序技術(shù)，對內(nèi)蒙古錫林郭勒盟酸馬奶發(fā)酵過程中細菌群落結(jié)構(gòu)動態(tài)變化進行了測定，其結(jié)果顯示酸馬奶發(fā)酵過程中存在豐富的細菌多樣性，而且乳桿菌屬為優(yōu)勢細菌屬，占51.06%，乳球菌屬為其次的優(yōu)勢菌屬，占30.29%。本研究利用Illumina MiSeq第2代測序技術(shù)鑒定內(nèi)蒙古科爾沁地區(qū)酸馬奶引子樣品細菌多樣性，其結(jié)果顯示，乳桿菌屬為該樣品絕對優(yōu)勢種群，占84.08%之多。此值明顯高于以上研究結(jié)果，分析其可能的原因：1）Illumina MiSeq高通量測序技術(shù)覆蓋深度非常大，對物種多樣性的分析十分有利，因此該技術(shù)不僅可作為全面、客觀地揭示特定環(huán)境中群落結(jié)構(gòu)的有效途徑，同時也可作為更深層次挖掘有益微生物資源的有效手段；2）酸馬奶引子在保存過程中，隨著pH值的持續(xù)下降，其他菌屬無法承受如此酸性環(huán)境而降解，但乳桿菌屬因其更強的耐酸性，持續(xù)繁殖，繼而占據(jù)絕對優(yōu)勢。目前，益生菌受到人們越來越多的關(guān)注。根據(jù)聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織和世界衛(wèi)生組織益生菌的定義，益生菌是一種食用者攝取適當量后，能對食用者健康發(fā)揮有益作用的活菌[29]。益生菌通常由食物攜帶或以制劑形式口服，若要發(fā)揮其生理功能，必需要耐受胃酸而活著到達腸道[30-31]。因此作為益生菌，應(yīng)當具備一些生物學(xué)特性，例如耐酸性。本研究中，酸馬奶引子樣品pH值低至3.54，且仍有大量的乳桿菌屬存活，因此該酸馬奶引子樣品可作為優(yōu)良益生菌的珍貴來源。

4 結(jié) 論

本研究對內(nèi)蒙古科爾沁地區(qū)酸馬奶引子樣品化學(xué)成分和細菌多樣性進行分析?；瘜W(xué)成分測定結(jié)果表明，該酸馬奶樣品pH值為3.54，乳糖、半乳糖均較低，未檢測到葡萄糖；4 種有機酸中乳酸含量最高，其次為丁酸；共檢測12 種飽和脂肪酸和7 種不飽和脂肪酸，不飽和脂肪酸中α-亞麻酸含量最高。細菌多樣性分析結(jié)果表明，該樣品中細菌主要分布于4 個屬，分別為乳桿菌屬（Lactobacillus）、醋桿菌屬（Acetobacter）、乳球菌屬（Lactococcus）、鏈球菌屬（Streptococcus）；乳桿菌屬為其絕對優(yōu)勢菌屬。

該酸馬奶引子樣品不僅含有較高水平的α-亞麻酸，且含有相對含量高達84.08%、耐酸能力較強的乳桿菌屬，因此可作為優(yōu)良的微生物資源，用于乳酸桿菌屬、乳球菌屬等益生菌的分離和篩選。