劉俠，金鳳斌，韓麗萍，杜冠華，何英慧

(錦州市婦嬰醫(yī)院，遼寧錦州121000)

多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種以性腺軸紊亂失調(diào)為主的全身性的、復(fù)雜的神經(jīng)—內(nèi)分泌—代謝網(wǎng)絡(luò)失調(diào)癥候群，好發(fā)于育齡期婦女，主要表現(xiàn)為胰島素抵抗、性激素水平變化，對(duì)機(jī)體近期不利影響表現(xiàn)為月經(jīng)周期紊亂、不孕或流產(chǎn)、多毛和(或)痤瘡等，遠(yuǎn)期不利影響則表現(xiàn)為糖尿病、子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌等[1，2]。既往研究[3]證實(shí)，胰島素抵抗是PCOS的重要發(fā)病機(jī)制之一，隨著對(duì)疾病發(fā)病機(jī)制的不斷深入，發(fā)現(xiàn)PCOS患者存在性激素、氧化應(yīng)激等多種生化指標(biāo)的異常表達(dá)。半乳糖凝集素-3(Galectin-3) 是凝集素家族成員，其在調(diào)節(jié)肥胖、葡萄糖水平以及炎癥中起重要作用[4]。結(jié)合珠蛋白(Hp)是一種酸性糖蛋白，主要在肝臟合成，其在結(jié)合游離血紅蛋白、抗氧化應(yīng)激、抗炎等方面發(fā)揮重要作用[5]。目前臨床少有血清Galectin-3、Hp表達(dá)與PCOS關(guān)聯(lián)性的相關(guān)報(bào)道。2016年1月～2018年10月我們觀察了PCOS患者血清Hp、Galectin-3的水平變化，并分析其與胰島素抵抗、血清性激素水平的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年1月～2018年10月期間本院收治的初診PCOS患者107例為PCOS組，另采用分層抽樣的方法選取同期因輸卵管因素或男方因素致使不孕的婦女90例作為對(duì)照組，本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。其中PCOS組納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《多囊卵巢綜合征的診斷和治療專家共識(shí)》[6]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均為育齡期已婚婦女，性生活正常者；③患者及其家屬知情本次研究并簽署了同意書。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①月經(jīng)周期規(guī)律、血清激素水平、基礎(chǔ)體溫雙相正常；②B超結(jié)果顯示子宮及雙側(cè)附件均未見異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并惡性腫瘤、肝腎功能不全、心血管疾病者；②合并內(nèi)分泌疾病或代謝性疾病者；③近3個(gè)月內(nèi)有避孕藥、降血脂、降糖、糖皮質(zhì)激素類藥物史者；④合并精神性疾病或認(rèn)知功能障礙者；⑤因其他疾病引起的Galectin-3、Hp水平升高者。其中PCOS組年齡20～37(31.29±4.83)歲；體質(zhì)量指數(shù)21.6～25.8 (22.91±0.67)kg/m2。對(duì)照組年齡21～36(31.56±3.26)歲；體質(zhì)量指數(shù)21.5～25.9(23.06±0.83)kg/m2。兩組研究對(duì)象一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 血清Hp、Galectin-3檢測 兩組均采集月經(jīng)周期的第2～6天早晨8～10點(diǎn)空腹肘靜脈血6 mL，血標(biāo)本常溫下2 500 r/min離心10 min，有效離心半徑8 cm，分離血清，-80 ℃保存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清Hp、Galectin-3水平，試劑盒購自浙江藍(lán)森生物科技有限公司，嚴(yán)格遵守試劑盒操作進(jìn)行。重復(fù)3次，取平均值。

1.3 胰島素抵抗指標(biāo)檢測 兩組于空腹下狀態(tài)下服用75 g 無水葡萄糖，30、60、120 min后抽取其肘靜脈血，采用化學(xué)發(fā)光法(試劑盒來源于美國DEL公司)檢測血清空腹胰島素(FINs)，采用美國強(qiáng)生穩(wěn)豪型血糖儀檢測空腹血糖(FBG)，測算穩(wěn)定模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，HOMA-IR=FBG×FINS/22.5。隨后根據(jù)HOMA-IR診斷標(biāo)準(zhǔn)：HOMA-IR ≥ 2.69，將PCOS 組分為非胰島素抵抗和胰島素抵抗。重復(fù)3次取，平均值。

1.4 血清性激素指標(biāo)檢測 兩組均采集月經(jīng)周期的第2～6天早晨8～10點(diǎn)空腹肘靜脈血6 mL，血標(biāo)本常溫下2 500 r/min離心10 min，有效離心半徑8 cm，分離血清，-80 ℃保存?zhèn)溆?。采用免疫化學(xué)發(fā)光法檢測血清卵泡雌激素(Follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH)、雌二醇(Estradiol，E2)、促黃體生成素(Luteinizing hormone，LH)、睪酮(Testosterone，T)、催乳素(Prolactin，PRO)，儀器選用東芝40型全自動(dòng)生化分析儀，嚴(yán)格遵守試劑盒操作進(jìn)行。重復(fù)3次，取平均值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料以描述，組間比較采用檢驗(yàn)；Pearson相關(guān)分析法分析血清Hp、Galectin-3與PCOS患者胰島素抵抗指標(biāo)、性激素指標(biāo)的相關(guān)性。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Hp、Galectin-3水平比較 結(jié)果見表1。

表1 兩組血清Hp、Galectin-3水平比較

注：與對(duì)照組比較，＊P<0.05；與非胰島素抵抗者比較，#P<0.05。

2.2 兩組HOMA-IR比較 PCOS組、對(duì)照組HOMA-IR分別為2.28±0.82、1.41±0.75(P<0.05)。PCOS胰島素抵抗、非胰島素抵抗者HOMA-IR分別為2.42±0.76、2.09±0.89(P<0.05)。

2.3 兩組血清FSH、LH、E2、T、PRO水平比較 結(jié)果見表2。

表2 兩組血清FSH、LH、E2、T、PRO水平比較

注：與對(duì)照組比較，＊P<0.05；與非胰島素抵抗者比較，#P<0.05。

2.4 血清Hp、Galectin-3水平與PCOS患者胰島素抵抗指標(biāo)、性激素指標(biāo)的相關(guān)性分析 血清Hp、Galectin-3水平與PCOS患者血清HOMA-IR、LH、T水平均呈正相關(guān)(r分別為0.489，0.628，0.426，P均<0.05；r分別為0.473，0.603，0.403，P均<0.05)，與FSH、E2、PRO水平均無顯著相關(guān)性(r分別為0.105，0.084，0.132，P均>0.05；r分別為0.098，0.187，P均>0.05)。

3 討論

PCOS是由基因遺傳、生活環(huán)境、生活習(xí)慣等導(dǎo)致的多因素疾病，其病因至今尚未闡明。研究[7]認(rèn)為，PCOS的發(fā)生可能涉及下丘腦-垂體-卵巢軸的調(diào)節(jié)功能異常、腎上腺內(nèi)分泌功能異常、胰島素抵抗等，而這之中胰島素抵抗可能是PCOS病情發(fā)展的始動(dòng)因素和中心環(huán)節(jié)。炎癥學(xué)說已成為PCOS發(fā)病機(jī)制的研究熱點(diǎn)之一。同時(shí)最新研究[8]指出，PCOS患者因機(jī)體存在糖脂代謝障礙、性激素分泌異常以及胰島素抵抗，致使機(jī)體體內(nèi)發(fā)生的促氧化與抗氧化處于失衡狀態(tài)，引起氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激與低級(jí)慢性炎癥之間可產(chǎn)生惡性循環(huán)，最終可能參與著PCOS的病情進(jìn)展，而PCOS患者氧化應(yīng)激反應(yīng)與胰島素抵抗關(guān)系密切。本次研究中，PCOS組HOMA-IR及血清LH、T水平顯著高于對(duì)照組，也證實(shí)了PCOS患者胰島素抵抗、性激素指標(biāo)存在異常變化。

Hp屬于血清α2球蛋白的組成成分，其主要生理功能是與游離血紅蛋白結(jié)合形成較為穩(wěn)定的Hp-血紅蛋白復(fù)合物，游離血紅蛋白可產(chǎn)生活性氧，因此Hp可降低體內(nèi)氧化應(yīng)激水平，發(fā)揮抗氧化劑效果[9]。研究[10]發(fā)現(xiàn)，Hp可通過與CD162受體與高遷移率族蛋白1結(jié)合，結(jié)合后產(chǎn)生的復(fù)合物可誘導(dǎo)產(chǎn)生抗炎酶以及細(xì)胞因子，進(jìn)而發(fā)揮抗炎效應(yīng)。Carvalho等[11]研究發(fā)現(xiàn)，PCOS患者血漿中的Hp呈升高狀態(tài)，并且與C反應(yīng)蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，張麗靜等[12]研究也表明，PCOS患者血清Hp表達(dá)與胰島素抵抗密切相關(guān)?？梢奌p作為一種抗炎因子，可能參與著PCOS的生理病理發(fā)展過程。Galectin-3是半乳糖結(jié)合凝集素家族中的一員，大約30 kDa，是一種β-半乳糖苷結(jié)合蛋白，主要參與細(xì)胞分化、遷移、黏附、增殖、凋亡及新生的血管生成等，其可在各種細(xì)胞和組織中表達(dá)，如嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及胃腸道、女性生殖道、呼吸道等上皮細(xì)胞等。近年來不少研究[13]表明，Galectin-3在調(diào)節(jié)葡萄糖水平、炎癥中發(fā)揮重要作用，可作為促炎因子與脂多糖結(jié)合，激活TLR配體及下游信號(hào)分子，促進(jìn)炎癥通路NF-κb的活化，而NF-κb的的激活則可進(jìn)一步釋放如白介素-6、腫瘤壞死因子-α等炎癥細(xì)胞因子的釋放。而劉仲尼等[14]研究亦發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞中Galectin-3可誘發(fā)胰島素抵抗，巨噬細(xì)胞可分泌Galectin-3，而Galectin-3又可通過趨化作用誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞入侵至胰島素靶組織，與胰島素受體結(jié)合后，抑制胰島素及其下游信號(hào)通路，致使葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)位作用降低，形成惡性循環(huán)，誘發(fā)胰島素抵抗;同時(shí)其研究還發(fā)現(xiàn)抑制Galectin-3水平對(duì)于胰島素抵抗具有一定的改善效果。故猜測Galectin-3可能作為重要的促炎癥介質(zhì)參與著PCOS的低級(jí)慢性炎性狀態(tài)中。

本次研究結(jié)果表明，胰島素抵抗者HOMA-IR及血清LH、T水平顯著高于非胰島素抵抗者，表明PCOS患者部分性激素指標(biāo)、胰島素抵抗指標(biāo)均存在異常升高，PCOS組血清Hp、Galectin-3水平顯著高于對(duì)照組，且存在胰島素抵抗者其水平較無胰島素抵抗者高，表明PCOS患者存在血清Hp、Galectin-3水平異常升高現(xiàn)象，且血清Hp、Galectin-3水平可能影響著PCOS患者的胰島素抵抗。PCOS患者Galectin-3水平升高可能因其可直接結(jié)合胰島素受體，抑制胰島素及其下游轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)通路，致使葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體-4對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)位作用消失，加重機(jī)體胰島素抵抗[15]。而Hp水平升高的原因可能是因?yàn)镻COS患者處于低級(jí)慢性炎性狀態(tài)，炎性因子可通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3誘導(dǎo)細(xì)胞分泌Hp。

綜上所述，PCOS患者血清Hp、Galectin-3水平異常升高。血清Hp、Galectin-3水平與PCOS患者血清FINS、FBG、HOMA-IR、LH、T水平均呈正相關(guān)。血清Hp、Galectin-3水平改變可能與患者胰島素抵抗指標(biāo)、性激素指標(biāo)水平有關(guān)，Hp、Galectin-3可能在PCOS的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。早期監(jiān)測血清Hp、Galectin-3水平有助于預(yù)測PCOS患者的病情發(fā)生與發(fā)展，為臨床診療提供依據(jù)。