謝瑩 彭玉 詹偉

【摘要】目的：探究理脾復(fù)方制劑對(duì)厭食大鼠胃腸動(dòng)力的影響，為臨床推廣應(yīng)用名老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方提供理論基礎(chǔ)。方法：72只SD大鼠隨機(jī)分空白A組12只、模型B組60只造模，造模成功后B組分為生理鹽水C組、理脾復(fù)方制劑低、中、高劑量組（D、E、F組），每組12只，除A、B、C組外，各組給予低、中、高劑量理脾復(fù)方制劑灌胃干預(yù)治療，每日1次，連續(xù)7天后取材，對(duì)大鼠胃排空率、與小腸推進(jìn)率檢測(cè)。結(jié)果：治療前A、B組間比較，攝食量、體質(zhì)量、胃排空與小腸推進(jìn)率下降明顯（P<0.05）;治療后各組間比較，D、E、F組促進(jìn)胃排空率、小腸推進(jìn)率均優(yōu)于B組、C組（P<0.05），E組在增強(qiáng)胃排空率、小腸推進(jìn)率上優(yōu)于其他各組。結(jié)論：理脾復(fù)方制劑均能促進(jìn)胃排空、小腸推進(jìn)率，以中劑量組最佳;促進(jìn)胃排空率、小腸推進(jìn)率可能是理脾復(fù)方制劑治療厭食的作用靶點(diǎn)之一。

【關(guān)鍵詞】理脾復(fù)方制劑、厭食大鼠、胃腸動(dòng)力

【中圖分類號(hào)】R285.5【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A【文章編號(hào)】1007-8517（2019）8-0029-04

Abstract：ObjectiveToexploretheeffectofspleencompoundpreparationongastrointestinalmotilityinanorexiarats，andprovidetheoreticalbasisforclinicalapplicationoffamousChinesemedicinepractitioners.MethodsSeventy-twoSDratswererandomlydividedintoblankgroupA（n=12）andmodelgroupB（n=60）.Aftersuccessfulmodeling，groupBwasdividedintonormalsalinegroupCandspleencompoundpreparationlow，mediumandhighdosegroups（GroupD，EandF），12ineachgroup，atotalof6groups.ExceptforgroupsAandB，eachgroupwasgivenlow，mediumandhighdoseofspleencompoundpreparationforintragastricintervention，onceaday，andafter7daysofcontinuousintervention，theratsweresubjectedtogastricemptyingandsmallintestinepropulsionrate.ResultsBeforetreatment，theintake，bodymass，gastricemptyingandsmallintestinepropulsionratedecreasedsignificantly（P<0.05）.Aftertreatment，groupsD，EandFpromotegastricemptyingandthesmallintestinepropulsionrateswerebetterthanthatofgroupBandC（P<0.05）.GroupEwassuperiortoothergroupsinenhancinggastricemptyingrateandsmallintestinepropulsionrate.ConclusionBothspleenandcompoundpreparationscanpromotegastricemptyingandsmallintestinepropulsionrate，whichisbestinthemiddledosegroup.Promotinggastricemptyingrateandsmallintestinalpropulsionratemaybeoneofthetargetsofthetreatmentofanorexiawithspleencompoundpreparation.

Keywords：SpleenCompoundPreparation;AnorexiaRats;GastrointestinalMotility

小兒厭食癥是指外消化道和全身性器質(zhì)性病變，表現(xiàn)為較長(zhǎng)時(shí)間的食欲減少或消失，食量減少甚至拒食，是小兒常見癥[1]。文獻(xiàn)報(bào)道嬰兒和學(xué)齡前兒童厭惡進(jìn)食問題的發(fā)生率約為12%～34%，以1～6歲兒童多見，約占兒童疾病的40%以上，城市發(fā)病率高于農(nóng)村，獨(dú)生子女發(fā)病率更高[2]。食物攝入、消化、吸收與胃對(duì)食物排空、小腸對(duì)食物推進(jìn)因素明顯相關(guān)，

若胃排空、小腸推進(jìn)力不足，可通過影響食物吸收、排泄進(jìn)而影響食物攝入，發(fā)生食欲食量減少，或厭食等。西醫(yī)治療厭食以促進(jìn)胃腸動(dòng)力、助消化、微生態(tài)制劑對(duì)癥治療為主。中醫(yī)認(rèn)為厭食主要是脾運(yùn)失健所致，故以健脾助運(yùn)為主。筆者導(dǎo)師為第六批全國(guó)老中醫(yī)藥專家學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)繼承指導(dǎo)教師，師承國(guó)家級(jí)名老中醫(yī)黃建業(yè)教授，凝練形成黃老治療厭食經(jīng)驗(yàn)方“運(yùn)脾散”，開展相關(guān)臨床實(shí)驗(yàn)研究，證實(shí)運(yùn)脾散可通過健脾助運(yùn)，恢復(fù)胃腸氣機(jī)轉(zhuǎn)樞治愈厭食，總有效率為95.6%[3]，其可改善小腸吸收功能[4]、降低厭食大鼠下丘腦和外周血漿CCK-8[5]，顯示運(yùn)脾散治療厭食可能是通過影響胃腸吸收、食欲中樞的調(diào)節(jié)作用來實(shí)現(xiàn)的。為改善口感，方便患兒服用，導(dǎo)師對(duì)運(yùn)脾散劑型改革，形成的運(yùn)脾顆粒制劑（即“理脾復(fù)方制劑”顆粒）分別獲院內(nèi)制劑（黔藥制字Z20130006）與國(guó)家發(fā)明專利（ZL201310127415.0），成為導(dǎo)

師所在醫(yī)院治療厭食主要中藥制劑。為進(jìn)一步探究理脾復(fù)方制劑對(duì)胃腸動(dòng)力影響、尋找最佳藥物濃度，現(xiàn)將開展本實(shí)驗(yàn)研究總結(jié)如下。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康SD幼齡（40～45d齡）大鼠SPF級(jí)72只（雌雄各半），質(zhì)量（65±10）g，由貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供[許可證號(hào)：SCXK（湘）2014-0011]。

1.1.2藥物與制備理脾復(fù)方制劑制備（蒼術(shù)、白術(shù)、茯苓、薏苡仁各10g，山藥、陳皮、枳殼、神曲、甘草各6g，本劑量為臨床3歲兒童用量）參照陳大業(yè)[6-7]對(duì)運(yùn)脾顆粒提取、收縮和干燥工藝方法，由貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院完成。為尋找最佳藥物劑量濃度對(duì)胃腸動(dòng)力的影響，本實(shí)驗(yàn)將理脾復(fù)方制劑設(shè)為低、中、高劑量3個(gè)組，上述劑量為中劑量組，高于其1倍為高劑量組，低于其1/2倍為低劑量組，按照人和鼠給藥劑量換算公式[8]，分別計(jì)算出理脾復(fù)方制劑低、中、高劑量組大鼠給藥量為：0.02mL/g、0.04mL/g、0.08mL/g。

1.1.3實(shí)驗(yàn)試劑備制采用碳末灌胃法[9-10]檢測(cè)胃腸動(dòng)力。參照王繼芳方法制備[11]300mL約300g碳末半固體糊狀物，置4℃冰箱冷藏備用，使用2h前恢復(fù)至室溫。羧甲基纖維素鈉為北京索萊寶科技有限公司，批號(hào)20200704。

1.1.4特質(zhì)飼料制備采用汪受傳病因模擬法[12]對(duì)大鼠造模特質(zhì)飼料進(jìn)行制備。實(shí)驗(yàn)前將奶粉、魚松、豆粉、玉米粉、白糖、鮮雞蛋、鮮肥肉，按1∶1∶2∶1∶1∶1.8∶2比例配制，攪拌勻后加水做成小餅干，用電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱烘干后備用。

2方法

2.1造模方法大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，雌雄各半，隨機(jī)分正常A組12只、模型B組60只，A組給予常規(guī)飼料（貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）、B組予特制飼料喂養(yǎng)，均在每天上午9時(shí)給大鼠投食及提供飲水，連續(xù)喂養(yǎng)14d，記錄大鼠攝食量、體質(zhì)量、精神轉(zhuǎn)態(tài)等，當(dāng)B組大鼠平均攝食量低于B組20%～30%、體質(zhì)量低于10%～15%以內(nèi)，表明造模成功[12]。

2.2分組與給藥B組造模成功后雌雄各半，隨機(jī)分生理鹽水C組、理脾復(fù)方制劑低、中、高劑量組（D、E、F組），每組12只。A、B組為空白、模型對(duì)照組，正常飼料與水喂養(yǎng)，不予藥物干預(yù);C、D、E、F組給藥量分別為0.01mL/g生理鹽水、理脾復(fù)方制劑低、中、高劑量，連續(xù)灌胃干預(yù)7d，每日1次。

2.3胃排空率檢測(cè)采用碳末灌胃法。大鼠在第7天末次灌胃后，禁食不禁水24h，用灌胃器抽取碳末半固體糊狀物，1.5mL/100g，稱重后標(biāo)記為半固體糊重量，給大鼠灌胃，30min后用10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔麻醉，沿腹中線剖開大鼠腹腔，找出胃，用細(xì)線結(jié)扎胃賁門和幽門，防止胃內(nèi)容物流出，取出胃并用濾紙吸干表面水分后，稱重標(biāo)記為胃全重;將胃剪開，用生理鹽水反復(fù)沖洗干凈，再用濾紙吸干胃表面水分，稱重標(biāo)記為胃凈重。胃排空率=[1-（胃全重-胃凈重）/半固體糊重量]×100%，記錄每只大鼠胃排空率。

2.4小腸推進(jìn)率檢測(cè)取胃后迅速分離腸系膜，取出小腸，直鋪于白紙上，量取自幽門括約肌至炭糊到達(dá)處為活性炭推進(jìn)距離L2，量取自幽門括約肌至回腸末端的距離為小腸全長(zhǎng)L1，小腸推進(jìn)率（%）=L2/L1×100%，記錄每只大鼠小腸推進(jìn)率。

2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較釆用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3結(jié)果

3.1攝食量、體質(zhì)量變化

3.1.1造模后攝食量、體質(zhì)量變化造模第7天各組大鼠攝食量低于A組21.71%、體質(zhì)量低于10.23%，表明造模成功;為觀察造模7d與14d攝食量、體質(zhì)量的差異性，繼續(xù)造模14d，攝食量、體質(zhì)量雖降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），顯示對(duì)厭食大鼠造模選擇7d與14d均可。見表1。

3.1.2干預(yù)治療后攝食量、體質(zhì)量變化干預(yù)治療后與B組比較，攝食量D、E、F組均升高，但E組優(yōu)于其他組，第5天即顯效明顯（P<0.05），F(xiàn)組第7天顯效，C組無(wú)差異性，對(duì)攝食量增加呈現(xiàn)E組>F組>D組>C組，中劑量組最好;體質(zhì)量C、D、E、F組顯著增加（P<0.01），各組間無(wú)差異性。理脾復(fù)方制劑對(duì)攝食量、體質(zhì)量均有升高作用。見表2。

3.2胃排空率、小腸推進(jìn)率變化

3.2.1胃排空率與A組比較，B組胃排空率降低明顯（P<0.05）;干預(yù)治療后與B組比較，C、D組升高差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），E、F組明顯升高（P<0.05），顯示理脾復(fù)方制劑中、高劑量組優(yōu)于低劑量組。

3.2.2小腸推進(jìn)率與A組比較，B組小腸推進(jìn)率降低明顯（P<0.05）;與B組比較，E組明顯升高（P<0.05），其余各組間無(wú)差異性，顯示理脾復(fù)方制劑中劑量組優(yōu)于低、高劑量組。見表3。

4討論

小兒厭食癥是指小兒較長(zhǎng)期的食欲不振，見食不貪，甚則拒食的一種病證;病程在1月以上，多見1～6歲小兒。其發(fā)生多由喂養(yǎng)不當(dāng)、他病傷脾、先天不足等因素引起，主要病機(jī)為脾運(yùn)失健。長(zhǎng)期厭食可因食物攝入不足或單一，水谷精微物質(zhì)化生不足，臟腑失養(yǎng)，致抵抗力下降，故厭食患兒多有慢性腹瀉、多汗、易感冒等肺脾兩虛體質(zhì)特點(diǎn)，易發(fā)生反復(fù)呼吸道感染、貧血、疳證、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩等疾病，因此對(duì)厭食的防治仍是目前研究的熱點(diǎn)之一。

《靈樞·脈度》曰：“脾氣通于口，脾和則口能知五谷矣”，“飲入于胃，游溢精氣，上輸于脾，脾氣散精，上歸于肺，通調(diào)水道，下輸膀胱。水精四和，五經(jīng)并行”（《內(nèi)經(jīng)·經(jīng)脈別論》），可見脾運(yùn)胃納功能是水谷正常納入、吸收以及精微物質(zhì)化生的基礎(chǔ)和保障。小兒脾常不足，乳食不知自節(jié)，如過食肥甘、煎炸、高糖高蛋白高熱量之品，或家長(zhǎng)片面追求高營(yíng)養(yǎng)飲食攝入，超越脾胃運(yùn)化能力，脾運(yùn)胃納失調(diào)則食欲食量減少，易發(fā)生厭食。厭食治療遵循“脾貴在運(yùn)不在補(bǔ)”、以恢復(fù)脾運(yùn)胃納功能為主。導(dǎo)師應(yīng)用理脾復(fù)方制劑治愈厭食正是通過其健脾助運(yùn)功能實(shí)現(xiàn)的。方中君藥蒼術(shù)微苦，氣味芳香而悅胃，性溫燥而醒脾運(yùn)，善燥濕健脾，其順應(yīng)了脾喜燥惡濕、香先入脾的特性，故蒼術(shù)為運(yùn)脾之要藥;導(dǎo)師前期研究顯示蒼術(shù)是黃建業(yè)教授治療厭食用藥頻次最高的藥物[13]，相關(guān)文獻(xiàn)也證實(shí)蒼術(shù)提取物中含有β-桉葉油醇、蒼術(shù)素和茅術(shù)醇等揮發(fā)油成分，能明顯改善胃腸動(dòng)力障礙[14]，其芳香揮發(fā)油成分能刺激胃腸蠕動(dòng)，增強(qiáng)胃腸動(dòng)力[15-17];臣藥白術(shù)性溫微苦，歸經(jīng)脾胃，其能有效促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)[18-20]與其內(nèi)含的白術(shù)內(nèi)酯I作用分不開。本研究結(jié)果顯示以蒼術(shù)為君藥、白術(shù)為臣藥的理脾復(fù)方制劑，能明顯促進(jìn)胃排空率、小腸推進(jìn)率。

筆者對(duì)近20年厭食實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，厭食大鼠造模多采用較成熟的汪氏病因模擬法[12]，用高蛋白高糖等特制飼料來造厭食大鼠模型，是基于“飲食自倍，脾胃乃傷”理論，故本實(shí)驗(yàn)采用汪氏病因造模法與厭食發(fā)生的主要病因吻合;本研究應(yīng)用該法造模7d后，大鼠在攝食量、體質(zhì)量下降明顯（表1）。應(yīng)用理脾復(fù)方制劑干預(yù)治療后，攝食量、體質(zhì)量恢復(fù)明顯（表2），顯示理脾復(fù)方制劑能有效改善食欲食量，其中以中劑量組最佳。

胃排空、小腸推進(jìn)的速度與胃腸運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)弱有關(guān)，文獻(xiàn)報(bào)道常用碳末灌胃法檢測(cè)胃腸動(dòng)力[9-10]，胃排空、小腸推進(jìn)率數(shù)據(jù)越大，說明胃腸運(yùn)動(dòng)越快，胃腸蠕動(dòng)越強(qiáng)。本研究顯示厭食大鼠胃排空率、小腸進(jìn)率明顯降低，表明厭食大鼠存在胃腸蠕動(dòng)減慢、胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙的表現(xiàn);干預(yù)治療后理脾復(fù)方制劑能促進(jìn)胃排空率、小腸推進(jìn)率（表3），以中劑量組最明顯。提示理脾復(fù)方制劑治療厭食可能是通過促進(jìn)胃排空率、小腸推進(jìn)率，增強(qiáng)胃腸蠕動(dòng)實(shí)現(xiàn)的，提高胃排空率、小腸推進(jìn)率可能是理脾復(fù)方制劑治療厭食的作用靶點(diǎn)之一。

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（收稿日期：2019-02-13編輯：程鵬飛）