武曉琳 包玉龍 劉禾
(遼寧省中醫(yī)藥研究院 遼寧 沈陽(yáng) 110034)
(1)材料:常規(guī)插管若干、30個(gè)套管、血管夾若干、一定劑量的肝素溶液以及一定數(shù)量的線。
(2)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:昆明種小鼠,18~22g,購(gòu)于遼寧長(zhǎng)生生物有限公司,合格證號(hào):SCXK(遼)2015-0001。將小鼠分成三組,每組30只。
1、2、3組分別采用三種不同的扎口以及固定方式:
(1)1組采用常規(guī)扎口方式:首先將KM小鼠固定在試驗(yàn)臺(tái)上,選擇采樣點(diǎn)位,并將該點(diǎn)位的毛發(fā)刮除干凈,使用75%濃度的酒精進(jìn)行消毒處理。然后切開(kāi)采血點(diǎn)位的上表皮,使用剝離鉗分離得到要采血的血管,在血管的下端穿上兩個(gè)輔助固定線,并在遠(yuǎn)離小鼠心臟的一端結(jié)扎。最后,使用血管夾將血管的另外一端夾緊,使用手術(shù)剪剪出一個(gè)V形道口,直接導(dǎo)入插管采集血液樣本。
(2)2組采用插管上加套管的扎口方式:第一步和(1)相同,不再贅述。前期處理完畢后,切開(kāi)采血點(diǎn)位的上表皮,使用剝離鉗分離得到要采血的血管,在血管的下端穿上三個(gè)輔助固定線,并在遠(yuǎn)離小鼠心臟的一端結(jié)扎。最后,使用血管夾將血管的另外一端夾緊,使用手術(shù)剪剪出一個(gè)V形道口,在導(dǎo)入插管的同時(shí),使用一根輔助固定線將插管固定在血管上,采集血液樣本。
(3)3組采用插管上加套管的扎口方式:前兩步和(1)相同,不再贅述。最后,使用血管夾將血管的另外一端夾緊,使用手術(shù)剪剪出一個(gè)V形道口,導(dǎo)入加有套管的插管,使用一根輔助將套管和插管進(jìn)行固定,采集血液樣本。
采用SPSS16.0的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)方式對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行全面的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析。
(1)固定效果:統(tǒng)計(jì)插管在實(shí)際實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的穩(wěn)定性。插管在實(shí)際試驗(yàn)過(guò)程中的固定效果良好,沒(méi)有出現(xiàn)松脫或者移位的現(xiàn)象則記錄為“效果顯著”;插管在實(shí)際試驗(yàn)過(guò)程中的固定效果一般,出現(xiàn)了松脫或者移位的現(xiàn)象,但是順利完成了血樣采集則記錄為“效果一般”;較上述效果一般還差為效果欠佳。有效率=(效果顯著例數(shù)+效果一般例數(shù))÷總例數(shù)×100%。
(2)采血成功率:一次采血成功則記錄為“方法有效”,通過(guò)兩次及以上采血才成功的記錄為“方法無(wú)效”。成功例數(shù)=(一次成功例數(shù)+兩次成功例數(shù))÷總例數(shù)×100%。
表1 KM小鼠固定效果統(tǒng)計(jì)表 (例)
根據(jù)實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)可以知道,1組中,穩(wěn)定效果較好。在整個(gè)采血過(guò)程中,插管沒(méi)有出現(xiàn)松脫等現(xiàn)象的共有12例,顯示“效果一般”的例數(shù)為10例,而顯示“效果欠佳”的例數(shù)為8例,整個(gè)小組固定的有效率為73.33%。2組中,穩(wěn)定效果較好,在整個(gè)采血過(guò)程中,插管沒(méi)有出現(xiàn)松脫等現(xiàn)象的共有15例,顯示“效果一般”的例數(shù)為11例,而顯示“效果欠佳”的例數(shù)為4例,整個(gè)小組固定的有效率為86.67%。3組中,穩(wěn)定效果較好。
表2 一次采血成功率統(tǒng)計(jì)表
1組中,一次采血成功共計(jì)12例,兩次采血成功3例,而三次及以上采血成功共計(jì)15例,采血成功率僅為50.00%。2組中,一次采血成功共計(jì)15例,兩次采血成功8例,而三次及以上采血成功共計(jì)7例,采血成功率為76.67%。3組中,一次采血成功共計(jì)25例,兩次采血成功4例,而三次及以上采血成功共計(jì)1例,采血成功率僅為96.67%。
采集動(dòng)物樣本的血樣是藥理學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)最重要的環(huán)節(jié)之一,會(huì)直接影響到整個(gè)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量。通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),血管下穿三根線結(jié)扎法以及插管上加套管結(jié)扎法的采血效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)結(jié)扎法的采血效果。
在具體選擇結(jié)扎方法的過(guò)程中,要根據(jù)實(shí)驗(yàn)對(duì)象的實(shí)際情況選擇。例如,雖然插管上加套管結(jié)扎法的固定效果最好,但是該結(jié)扎法的實(shí)施難度較大。對(duì)小型動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)而言,選擇血管下穿三根線結(jié)扎法更為合適。