林巧美 龐文生 曾潔

【摘 要】? 目的：考察閩產(chǎn)太子參“柘參2號(hào)”與新品種“柘參3號(hào)”浸出物及多糖含量的差異，為不同品種太子參質(zhì)量評(píng)價(jià)奠定基礎(chǔ)。方法：采用冷浸法測(cè)定太子參水溶性浸出物含量;采用加熱回流提取、苯酚硫酸法測(cè)定太子參中多糖含量。結(jié)果：15批次“柘參2號(hào)”太子參浸出物含量在29.78%～36.30%、多糖含量在31.14%～38.74%范圍之間; 15批次“柘參3號(hào)”太子參浸出物含量在35.84%～43.83%，多糖含量在32.16%～41.48%范圍之間。結(jié)論：“柘參3號(hào)”太子參浸出物和多糖含量均顯著高于“柘參2號(hào)”，新品種“柘參3號(hào)”太子參在浸出物、多糖含量指標(biāo)方面優(yōu)于“柘參2號(hào)”。

【關(guān)鍵詞】 太子參;柘參2號(hào);柘參3號(hào);浸出物;多糖

【中圖分類號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2019）3-0021-03

Abstract：Objective To inspection the difference of the extracts and polysaccharide content of the new cultivar “Zheshen No.3”（ZS3） and the “Zheshen No.2”（ZS2）， and to lay the foundation for quality evaluation of high quality varieties of Radix Pseudostellariae. Methods The method of cold soak in the determination of the extract was used to determine ZS2 and ZS3 ; The content of polysaccharides in Radix Pseudostellariae was determined by heating reflux extraction and phenol sulfuric acid method.Results The extracts of the 15 batches of Radix Pseudostellariae in the ZS2 ranged from 29.78% to 36.30%，and the content of polysaccharides ranged from 31.14% to 38.74%. The extracts of the 15 batches of Radix Pseudostellariae in the ZS3 ranged from 35.84% to 43.83%，and the content of polysaccharides ranged from 32.16% to 41.48%.Conclusion The extracts and polysaccharide content of the new cultivar ZS3 is significantly higher than that of ZS2， to a certain extent， it can reflect that the quality of the new variety of ZS3 is higher than that of ZS2.

Keywords：Pseudostellaria heterophylla; Zheshen No.2; Zheshen No.3; Extract; Polysaccharides

太子參為石竹科植物孩兒參Pseudostellaria haterophylla （Miq.）Pax ex Pax et Hoffm.的干燥塊根，系福建道地藥材，福建柘榮縣譽(yù)為“中國(guó)太子參之鄉(xiāng)”。柘榮地區(qū)太子參常見品種為“柘參1號(hào)”和“柘參2號(hào)”，其中“柘參2號(hào)”的品質(zhì)較為穩(wěn)定、產(chǎn)量較高，當(dāng)?shù)胤N植面積達(dá)80%以上[1]。但由于太子參栽培過程長(zhǎng)期采用塊根進(jìn)行無性繁殖、栽培品種較單一，致使太子參種質(zhì)退化、病害加劇，因此需要進(jìn)一步研究開發(fā)優(yōu)質(zhì)太子參品種。葉祖云等[2]應(yīng)用植物多倍體誘導(dǎo)技術(shù)，培育出新品種即“柘參3號(hào)”，通過了福建省農(nóng)作物品種認(rèn)定。多倍體通常能引起營(yíng)養(yǎng)器官體積增大和次生代謝產(chǎn)物增多，且在培育過程中采用莖尖脫毒組培育苗技術(shù)，使得種苗更健康，因此“柘參3號(hào)”太子參在栽培過程中表現(xiàn)出塊根大、產(chǎn)量高、生長(zhǎng)健壯等特點(diǎn);但作為藥材，新品種“柘參3號(hào)”太子參的質(zhì)量，應(yīng)該從多方面進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)。本研究擬從多糖及浸出物含量?jī)蓚€(gè)指標(biāo)，以“柘參2號(hào)”作對(duì)照，初步考察“柘參3號(hào)”太子參的質(zhì)量。

1 儀器與材料

1.1 儀器 UV-3200紫外可見分光光度計(jì) （配備UV-Vis Analyst 紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用系統(tǒng)，上海美譜達(dá)儀器有限公司）;AE240S電子分析天平（梅特勒-托利多有限公司）;HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋（國(guó)華電器有限公司）;DHG-9123A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）。

1.2 材料 “柘參2號(hào)”太子參，購(gòu)自福建柘榮太子參種植基地;“柘參3號(hào)”太子參，由福建西岸生物科技有限公司和寧德市南嶺農(nóng)業(yè)有限公司提供，從中隨機(jī)各抽取15批次樣品測(cè)定其浸出物及多糖含量。

D-無水葡萄糖對(duì)照品（批號(hào)：110833-201506，中國(guó)食品藥品檢定研究院）;硫酸（分析純，批號(hào)：160123，西隴化工股份有限公司）;苯酚（批號(hào)：20161018）、無水乙醇（批號(hào)：20170424）購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 太子參水溶性浸出物測(cè)定 按照2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》水溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的冷浸法進(jìn)行測(cè)定。準(zhǔn)確稱取太子參粉末4g，每個(gè)批次平行3份，置于250mL錐形瓶中，精密加水100mL，密塞，冷浸，前6小時(shí)內(nèi)時(shí)時(shí)振搖，再靜置18小時(shí)，用干燥過濾器迅速濾過，精密量取續(xù)濾液20mL，置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3h;置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量，計(jì)算各批次太子參藥材中浸出物含量。

2.2 太子參中多糖含量測(cè)定

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 準(zhǔn)確稱取D-無水葡萄糖對(duì)照品0.01824g，加蒸餾水溶解，定容至200mL容量瓶中，配制成濃度為91.20μg /mL的對(duì)照品溶液，作為母液。分別精密吸取母液1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0mL，加水定容至5mL，配制成濃度為18.24、27.36、36.48、54.72、72.96、91.20μg /mL的對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 稱取太子參（粉碎過3號(hào)篩）0.1000g，精密稱定，置于索氏提取器中，加入85%乙醇100mL，90 ℃水浴加熱1.5h，棄去乙醇液，藥渣揮干乙醇。藥渣連同紙筒置于圓底燒瓶中，精確加入100mL蒸餾水，稱重，水浴加熱回流提取2h，放冷后加水補(bǔ)重，混勻，過濾。精確量取濾液20mL置100mL容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度線，即得供試品溶液。

2.2.3 線性關(guān)系考察 精密吸取各對(duì)照品溶液lmL，置10mL具塞試管中，精密加入5%苯酚溶液1mL，搖勻;再精密加硫酸5mL，搖勻。置沸水浴中加熱20min，取出，置冰浴中冷卻5min。以1mL水按同樣顯色操作為空白，分別在490nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以葡萄糖濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程，y=0.0089x+0.0195，r=0.9997，表明葡萄糖在18.24～91.20μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.4 精密度試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液1mL，按“2.2.3項(xiàng)”下的方法操作，連續(xù)測(cè)定6次，吸光度RSD值為0.04% ，表明儀器精密度良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液1mL，按“2.2.3項(xiàng)”下的方法操作，分別于0、30、60、90、120min測(cè)定吸光度，吸光度RSD值為0.05%，表明在120min內(nèi)樣品具有良好的穩(wěn)定性。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 稱取太子參（粉碎過3號(hào)篩）0.1g，6份，精密稱定，按“2.2.3項(xiàng)”下方法制備樣品溶液，按“2.2.3項(xiàng)”下方法測(cè)定吸光度并計(jì)算多糖含量，結(jié)果太子參中多糖平均含量為34.39%，RSD為2.30%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.2.7 加樣回收試驗(yàn) 精密稱取已知含量的太子參（粉碎過3號(hào)篩）0.0500g，9份，精密稱定，分別加入葡萄糖對(duì)照品適量，使得高、中、低濃度對(duì)照品加入量與供試品中多糖含量之比約為0.5∶1、1∶1、1.5∶1各3份，按“2.2.2項(xiàng)”下方法制備樣品溶液，按“2.2.3項(xiàng)”下方法測(cè)定吸光度并計(jì)算回收率。多糖的平均加樣回收率為97.03%、101.13%、102.15%。

2.2.8 樣品多糖含量測(cè)定 分別稱取“柘參2號(hào)”與“柘參3號(hào)”太子參（粉碎過3號(hào)篩）0.1000g，精密稱定，每個(gè)批次平行3份，按“2.2.2項(xiàng)”下方法制備樣品溶液，按“2.2.3項(xiàng)”下方法測(cè)定吸光度，計(jì)算各批次太子參藥材中多糖含量。

2.3 結(jié)果 “柘參2號(hào)”與“柘參3號(hào)”太子參水溶性浸出物及多糖含量測(cè)定結(jié)果由表1、表2可知，兩個(gè)品種太子參水溶性浸出物含量范圍在29.78%～45.83%之間，其中“柘參2號(hào)”太子參浸出物含量范圍主要在32%～36 %之間，“柘參3號(hào)”太子參浸出物含量范圍主要在38%～42%之間;兩個(gè)品種太子參多糖含量范圍在31.14%～41.48%之間，其中“柘參2號(hào)”太子參多糖含量范圍主要在31%～35 %之間，“柘參3號(hào)”太子參多糖含量范圍主要在35%～40%之間。

3 結(jié)論

浸出物可反映藥材中化學(xué)成分總體積累水平，2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》要求太子參水溶性浸出物含量不得低于25%，其在太子參品質(zhì)檢測(cè)中作為一項(xiàng)重要的衡量標(biāo)準(zhǔn)[3]。本研究分別進(jìn)行“柘參2號(hào)”和“柘參3號(hào)”15批次太子參的水溶性浸出物測(cè)定，其含量均符合藥典要求?！拌蠀?號(hào)”太子參浸出物和多糖含量均顯著高于“柘參2號(hào)”，說明新品種“柘參3號(hào)”太子參在浸出物、多糖含量指標(biāo)方面優(yōu)于“柘參2號(hào)”。

多糖是太子參中一類重要的水溶性成分，也是太子參中重要的有效成分。國(guó)內(nèi)學(xué)者及本課題組研究表明，太子參多糖抗心肌缺血、增強(qiáng)人體免疫力，具有降低血糖、血脂、改善胰島素抵抗等作用[4-7];已有較多學(xué)者研究太子參中多糖含量，以此作為太子參質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)之一[8-11]。研究通過對(duì)“柘參2號(hào)”與“柘參3號(hào)”太子參水溶性浸出物和多糖含量的測(cè)定，考察了“柘參2號(hào)”與“柘參3號(hào)”新品種太子參浸出物和多糖含量的差異性，“柘參3號(hào)”太子參在浸出物、多糖含量指標(biāo)方面優(yōu)于“柘參2號(hào)”。

綜上，本研究從多糖及浸出物含量?jī)蓚€(gè)指標(biāo)，初步考察“柘參3號(hào)”太子參的質(zhì)量信息，為評(píng)價(jià)太子參新品種質(zhì)量提供一定的數(shù)據(jù)基礎(chǔ);為客觀反映新品種質(zhì)量，還應(yīng)從活性化學(xué)成分、藥效學(xué)等多方面進(jìn)行深入系統(tǒng)研究。

參考文獻(xiàn)

[1]袁濟(jì)端. 太子參新品種柘參1號(hào)、柘參2號(hào)的選育[J]. 廣西熱帶農(nóng)業(yè)， 2007（6）：39-41.

[2]Ye Zuyun， Wang Yaying， Tian Huiqiao. Regeneration of plantlets and tetraploidy induction in Pseudostellaria heterophylla[J]. Acta Biologica Cracoviensia Series Botanica， 2009， 51（2）：13-18.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：68.

[4]徐錦龍， 徐愛仁， 應(yīng)景艷，等. 太子參多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠血糖及胰島素的影響. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊， 2012， 30（2）： 423-424.

[5]姚先梅， 段賢春， 吳健， 等. 太子參多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠血糖、血脂代謝和腎臟病理的影響[J]. 安徽醫(yī)藥， 2014， 18（1）：23-26.

[6]Juan Hu， Wensheng Pang， Jinlong Chen， et al. Hypoglycemic effect of? polysaccharides with different molecular weight of Pseudostellaria heterophylla [J]. BMC Complementary And Alternative Medicine， 2013， 13（1）： 267.

[7]劉湘湘，阮君山.太子參多糖對(duì)大鼠心肌缺血的保護(hù)作用[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥， 2017， 26（17）：18-20.

[8]丁春花. 太子參種質(zhì)質(zhì)量評(píng)價(jià)及相關(guān)藥效學(xué)研究[D]. 福州：福建中醫(yī)藥大學(xué)， 2013.

[9]康傳志， 周濤， 江維克， 等. 貴州栽培太子參質(zhì)量評(píng)價(jià)及生長(zhǎng)區(qū)劃[J].中國(guó)中藥雜志， 2016， 41（13）：2391-2396.

[10]肖承鴻， 周濤， 江維克，等. 太子參新品種“施太1號(hào)”藥材品質(zhì)比較研究[J].中藥材， 2017， 40（3）：511-517.

[11]楊昌貴， 江維克， 周濤， 等 . 不同種源太子參中多糖和氨基酸含量的比較研究[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥， 2014， 16（1）：32-37.

（收稿日期：2018-11-28 編輯：程鵬飛）