徐端紅，安芳芳，賈新彥，高紅梅

（河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學院，河南鄭州 451450）

魚類日糧中最重要的能量來源是蛋白質和脂肪，然而蛋白質也是最昂貴的飼料成分。日糧中脂肪含量的增加可能會起到節(jié)約蛋白質的作用，因為脂肪氧化可以產(chǎn)生大量能量，提高飼料利用率。但從營養(yǎng)角度來看，脂質含量過高可能對魚肉感官性能產(chǎn)生負面影響，從而降低魚肉的產(chǎn)量及儲存的穩(wěn)定性（Cowey，1993）。此外，許多研究人員報道，肉堿與脂質代謝的關系，日糧脂肪水平的變化意味著脂肪酸氧化能力的變化，從而影響肉堿的功能（Harpaz，2005）。但關于日糧添加肉堿與脂肪水平對魚類生長性能和肉質影響的交互效應研究不多。肉堿是一種季銨鹽化合物，是長鏈脂肪酸進入線粒體必需的，L型異構體具有生物活性，而D型異構體幾乎沒有生理價值（Ozorio，2009）。在維生素C和體內產(chǎn)生的其他代謝產(chǎn)物的條件下，肉堿由必需氨基酸賴氨酸和蛋氨酸合成，其相對分子質量為161.2，是一種非常容易吸潮的化合物，很容易溶于水（Harpaz，2005）。有研究表明，肉堿可以提高幾種魚類生長速度，降低脂肪含量（Yang等，2009）。左旋肉堿的作用取決于環(huán)境條件、日糧成分（脂肪和賴氨酸水平）、添加水平及魚的生長階段等（Dias等，2001）?？寡趸饔每梢员Ｗo機體免受自由基和活性氧的影響，延緩許多慢性病和脂質過氧化。因此，天然物質作為潛在的抗氧化劑越來越受到人們的重視，其中就包括L-肉堿（Ma等，2008）。鯉魚是世界上第3種最常見的引進物種，也是世界上最常見的魚類之一。但鯉魚過多的脂質沉積影響其捕撈質量，增加了肉質的異味和加工程序（King和Dew，2003）。作者假設日糧添加肉堿可以改善魚肉質量，將體內或日糧中的大部分脂肪轉化為能量而不是在體脂沉積，因此，本試驗研究不同脂肪水平日糧添加L-肉堿對鯉魚生長性能、血液生化指標和抗氧化性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設計與飼養(yǎng)管理 試驗選擇初始體重為（22.60±0.15）g的鯉魚180條，隨機分為6組，每組3個魚缸，每個魚缸10條魚。試驗日糧采用6因子[2（5%和10%脂肪水平）×3（0、0.5和1 g/kg L-肉堿）]設計，試驗共進行10周，包括2周適應期，各組日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗期間，魚缸內的水溫控制在（25±0.5）℃，溶解氧維持在（7±0.05）mg/L，pH在 7.5左右，光照采用自然光照（10 h光照，14 h黑暗）。飼喂前1 h對投喂量進行稱重，每次緩慢投料，保證飼料總攝取量和未食用的顆粒能被放置在每個水箱的單獨排水管下的網(wǎng)狀收集器收集，采食量是總供給量減去未食用的飼料量。

表1 各組日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 生長性能和體成分 生長性能和體成分計算公式如下：

生長速率/%=（末重-初重）/試驗天數(shù)×100，相對生長速度/%=（末重-初重）/初重×100，蛋白效率比=增重/蛋白攝入量，外形指數(shù) /%=體寬/體長3×100。

試驗結束后，每個重復選擇2只魚屠宰后，用常規(guī)養(yǎng)分分析方法測定蛋白質、脂肪、水分和灰分含量。

1.3 血液生化指標和抗氧化性能 每個重復隨機選擇5條魚尾靜脈采血，3000 g離心10 min收集血漿。血漿用于測定血球容積、血紅蛋白、葡萄糖、甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白含量。分析血漿丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力，所有試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS（18.0版）多因素方差分析，試驗日糧中的脂肪和肉堿水平為兩個主效應，各組間的差異用Tukey法進行多重比較，分析日糧脂肪和肉堿水平對各測定指標的交互效應，試驗結果以“平均數(shù)±標準差”表示，P＜0.05判定為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 日糧肉堿和脂肪水平對鯉魚生長性能的影響 由表2可以看出，各處理組對鯉魚末重、相對生長速率、生長率、飼料利用率和外形指數(shù)均無顯著影響（P＞0.05）。日糧肉堿和脂肪水平對上述指標的影響也無顯著交互作用（P＞0.05）。

表2 日糧脂肪和L-肉堿水平對鯉魚生長性能的影響

2.2 日糧肉堿和脂肪水平對鯉魚體成分的影響由表3可以看出，日糧肉堿和脂肪水平對鯉魚機體蛋白質、脂肪、灰分和水平的影響具有顯著交互作用（P＜0.05）。其中高脂肪日糧組添加1 g/kg肉堿較其他組顯著降低了鯉魚機體脂肪和灰分含量（P＜0.05），同時10%脂肪日糧添加1 g/kg肉堿組鯉魚蛋白質含量最高（P＜0.05）。

表3 日糧脂肪和L-肉堿水平對鯉魚體成分的影響 %

2.3 日糧肉堿和脂肪水平對鯉魚體成分的影響由表4可以看出，日糧肉堿和脂肪水平對鯉魚血球容積和血紅蛋白含量無顯著影響（P＞0.05）。日糧肉堿水平對血漿甘油三酯含量無顯著影響（P＞0.05），但日糧脂肪水平顯著影響血漿甘油三酯含量（P＜0.05）。10%脂肪水平組血漿甘油三酯含量顯著低于5%脂肪水平組（P＜0.05）。日糧肉堿和脂肪水平對血漿葡萄糖、膽固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白含量的影響具有顯著交互效應（P＜0.05）。不同脂肪水平日糧添加肉堿較單獨的對照組顯著提高了血漿葡萄糖和高密度脂蛋白含量（P＜0.05），顯著降低了膽固醇和低密度脂蛋白含量（P＜0.05）。

2.4 日糧肉堿和脂肪水平對鯉魚抗氧化指標的影響 由表5可知，日糧肉堿和脂肪水平顯著影響鯉魚血漿抗氧化相關指標，其中10%脂肪水平添加1 g/kg肉堿組較其他組顯著提高了血漿SOD、CAT和 GSH-Px的活力（P＜ 0.05），顯著降低了血漿MDA含量（P＜0.05）。

3 討論

左旋肉堿對魚類生長和脂質代謝具有潛在的積極作用，引起許多研究者的興趣。一些科學家發(fā)現(xiàn)，左旋肉堿能提高幾種魚類的生長速度（Mohseni和 Ozorio，2014），但本試驗結果發(fā)現(xiàn)，不同脂肪水平日糧添加肉堿對鯉魚的生長性能無顯著影響。此外，關于日糧脂肪水平和添加肉堿對魚類生長或其他生理功能影響的互作效應研究較少。據(jù)報道，肉堿對魚類生長和肉質的影響可能與物種特異性有關，也取決于環(huán)境條件、魚類生長階段和日糧營養(yǎng)成分（賴氨酸含量和肉堿添加水平）（Dias等，2001）。Yang等（2012）研究表明，日糧添加肉堿可以降低鱸魚脂肪含量，但Dias等（2001）的報道結果卻顯示，肉堿對魚肉脂肪含量無顯著影響。因此，日糧添加肉堿在降低機體脂質方面的這種差異性是否與日糧脂肪水平有關還尚不清楚。但我們的研究表明，日糧添加肉堿和脂肪水平對降低魚肉脂肪含量的影響具有顯著交互作用，其中10%脂肪水平日糧添加1 g/kg肉堿魚肉脂肪和灰分含量最低，蛋白質含量最高，說明肉堿對脂肪在線粒體的氧化具有促進作用（Du等，2006）。

表 4 日糧脂肪和 L- 肉堿水平對鯉魚血液生化指標的影響 mg/dL

表5 日糧脂肪和L-肉堿水平對鯉魚抗氧化指標的影響

飼喂10%脂肪水平日糧的鯉魚血漿甘油三酯和膽固醇含量顯著高于5%脂肪水平組，這與Du等（2006）研究結果一致。另一方面，有研究報道指出，在人和陸生動物飲食或日糧中添加L-肉堿會降低血清甘油三酯、膽固醇、磷脂和游離脂肪酸含量（Rebouche，1992）。Yang等（2009）發(fā)現(xiàn)，日糧添加肉堿降低了血漿中甘油三酯、總膽固醇水平和非酯化脂肪酸水平，但對磷脂含量無顯著影響。研究結果表明，不同脂肪水平日糧添加肉堿降低了膽固醇、低密度脂蛋白含量，提高了葡萄糖和高密度脂蛋白濃度，其中10%脂肪日糧添加1 g/kg肉堿表現(xiàn)最顯著。肉堿可以調控輔酶A與乙酰輔酶A的比例，影響碳水化合物和脂肪代謝（Bell等，1992）。

脂質過氧化是一種自然降解和細胞膜破壞的過程，谷胱甘肽過氧化物酶是一種有效的脂質過氧化保護酶，此外過氧化氫酶和超氧化物歧化酶是抗氧化防御系統(tǒng)的另外兩種主要抗氧化酶。另一方面，血漿丙二醛的含量與谷胱甘肽過氧化物酶活性有很好的相關性，通常用來評價機體是否處于氧化應激狀態(tài)。本試驗研究了肉堿對鯉魚抗氧化性能的影響，結果發(fā)現(xiàn)，日糧脂肪水平和添加肉堿對鯉魚抗氧化性能的影響具有顯著交互作用，這表明肉堿可以抑制脂質過氧化，緩解鯉魚氧化應激（Ma等，2008）。此外，在活性氧含量顯著下降的情況下，日糧添加肉堿可以降低草魚血漿丙二醛含量和細胞凋亡（Wang等，2016），同時L-肉堿可以抑制由鐵介導的脂質過氧化（Ma等，2008）。

4 結論

本試驗結果發(fā)現(xiàn)，日糧脂肪和肉堿水平對鯉魚體成分、血液生化指標及抗氧化性能的影響具有顯著交互效應，其中10%脂肪水平日糧添加1 g/kg L-肉堿可以改善鯉魚機體體組成，降低脂質過氧化水平。