周元 陸寧 蔣紅鋼 陳治橫 陸伯豪 李進(jìn)

甲狀腺微小乳頭狀癌是甲狀腺乳頭狀癌的一種亞型，其最大直徑＜10mm，由于其體積小，發(fā)病隱蔽，預(yù)后良好，易被忽略，但臨床上仍發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移甚至少數(shù)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等情況，故早期診斷和早期治療具有重要意義。近年來趨化因子的研究取得了較大進(jìn)展，研究顯示趨化因子可以趨化細(xì)胞的聚集和移動(dòng)，其與靶細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而參與人體的免疫反應(yīng)、對(duì)炎癥的應(yīng)激反應(yīng)及腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移。CXCR7是一種趨化因子受體，其可與趨化因子CXC配體12（CXCL12）結(jié)合形成CXCL12- CXCR7生物學(xué)軸從而參與多種腫瘤的粘附及轉(zhuǎn)移，如在膀胱癌［1］、骨肉瘤［2］、乳腺癌［3］等組織中呈高表達(dá)，而在正常組織中表達(dá)較少［4］。CXCR7表達(dá)強(qiáng)度與惡性程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及預(yù)后呈正相關(guān)。目前有關(guān)CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中的研究報(bào)道較少，作者通過檢測CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中的表達(dá)情況，分析CXCR7與甲狀腺微小乳頭狀癌臨床特征之間的關(guān)系，旨在探討CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移中的重要作用。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集本院2012年1月至2014年12月甲狀腺微小乳頭狀癌手術(shù)石蠟標(biāo)本共80例，其中男10例，女70例；年齡24～76歲，平均45.8歲。所有病例均行患側(cè)甲狀腺腺葉切除+VI區(qū)淋巴結(jié)清掃術(shù)，其中VI淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者23例。同時(shí)選擇同期甲狀腺良性病變手術(shù)石蠟標(biāo)本30例用于對(duì)照，其中男5例，女25例；年齡25～64歲，平均50.7歲；結(jié)節(jié)性甲狀腺腫17例，甲狀腺腺瘤7例，橋本氏甲狀腺炎6例。

1.2 方法 所有標(biāo)本均經(jīng)福爾馬林溶液固定，常規(guī)組織處理，石蠟包埋，連續(xù)切片，切片厚度4μm，HE染色。采用免疫組化EnVision二步法，嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。用診斷明確的陽性片作陽性對(duì)照，以磷酸鹽緩沖液代替一抗體作陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定 CXCR7陽性信號(hào)定位于細(xì)胞漿或細(xì)胞膜，相應(yīng)區(qū)域呈現(xiàn)棕黃色顆粒代表陽性。按陽性細(xì)胞數(shù)所占細(xì)胞總數(shù)的百分率計(jì)分：＜5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，56%～100%為3分；著色根據(jù)Beesley［5］分級(jí)方法，根據(jù)染色強(qiáng)度評(píng)分：無染色為0分，淺染色為1分，中等染色為2分，深染色為3分。陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)評(píng)分與顏色強(qiáng)度評(píng)分之和作為判定結(jié)果：≤2分為不表達(dá)（-），3分（+），4分（++），＞5分（+++）。標(biāo)本切片病理結(jié)果及免疫組化結(jié)果采用雙人雙盲法進(jìn)行判定。

1.4 隨訪 對(duì)所有患者進(jìn)行隨訪。形式主要有門診、電話、微信及信函等，截至日期為2018年6月30日。觀察其復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及生存情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌與甲狀腺良性病變中的表達(dá)情況 CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中陽性率明顯高于良性病變（P＜0.01）（見表1、圖1）。

表1 甲狀腺微小乳頭狀癌與良性病變CXCR7的表達(dá)情況

圖1 CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌與良性病變中的表達(dá)

2.2 甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的表達(dá)與臨床特征之間的關(guān)系 甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的陽性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織中CXCR7的陽性率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織（P＜0.05）。CXCR7的陽性率與患者性別、年齡、腫瘤位置、術(shù)前TSH水平、腫瘤大小、是否侵犯被膜無關(guān)。見表2。

表2 甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的表達(dá)與臨床特征的關(guān)系

2.3 隨訪結(jié)果隨訪時(shí)間41～75個(gè)月。所有甲狀腺微小乳頭狀癌共存活79例，1例死于其他疾病，其中2例分別于初治后31個(gè)月和35個(gè)月發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，且CXCR7均表達(dá)陽性，行患側(cè)頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)后存活至今。

2.4 CXCR7對(duì)甲狀腺微小乳頭狀癌復(fù)發(fā)及生存相關(guān)性 CXCR7陽性者復(fù)發(fā)率為3.4%，CXCR7陰性者復(fù)發(fā)率為0%，兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。CXCR7陽性者生存率為98.3%，CXCR7陰性者生存率為100%，兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

趨化因子是一群具有化學(xué)趨化作用的細(xì)胞因子，可分為 CC、CXC、C、CX3C 四大類，介導(dǎo)細(xì)胞的遷移及趨化，參與惡性腫瘤細(xì)胞的生長、增殖和侵襲、轉(zhuǎn)移。CXCL12即SDF-1，是CXC家族中的一個(gè)成員，與其受體CXCR4結(jié)合形成 CXCL12-CXCR4 軸在多種腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移中起重要作用［6］。長期以來，CXCR4被認(rèn)為是CXCL12的唯一受體，但近年來發(fā)現(xiàn)CXCR7也可以與CXCL12結(jié)合形成CXCL12-CXCR7 軸參與腫瘤的增殖、浸潤和轉(zhuǎn)移［7］。現(xiàn)有研究表明［8］，CXCR7在惡性組織中高表達(dá)，其與腫瘤惡性程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及生存預(yù)后密切相關(guān)。

本研究采用免疫組化法，研究結(jié)果表明在甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的陽性率顯著高于甲狀腺良性疾病，這和李坤等［9］與劉臻等［10］在甲狀腺乳頭狀癌中的報(bào)道基本一致。故提示CXCR7的表達(dá)與腫瘤惡性表象相關(guān)，CXCR7可能在甲狀腺微小乳頭狀癌形成及發(fā)展中發(fā)揮作用。本研究中，CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中有表達(dá)陽性，其表達(dá)與年齡、性別、腫瘤位置、術(shù)前TSH水平、腫瘤大小、是否侵犯被膜無關(guān)，而與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移相關(guān)。故提示CXCR7的表達(dá)與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，CXCR7陽性的甲狀腺微小乳頭狀癌可能具有更強(qiáng)的侵襲能力，更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移。作者認(rèn)為對(duì)于該部分患者，手術(shù)范圍可適當(dāng)擴(kuò)大，積極地進(jìn)行VI區(qū)淋巴結(jié)清掃，同時(shí)結(jié)合其他檢查結(jié)果，必要時(shí)行全甲狀腺切除術(shù)和頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)，并且告知患者應(yīng)長期密切隨訪觀察，注意有無局部復(fù)發(fā)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，及早處理。本研究隨訪中CXCR7陽性表達(dá)患者術(shù)后頸部淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移，陰性患者未見復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，提示CXCR7陽性患者術(shù)后可能更易發(fā)生復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等情況，是一組高?；颊摺１窘M資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與入組數(shù)量及隨訪時(shí)間等因素相關(guān)，有待進(jìn)一步通過增大樣本及長期隨訪進(jìn)行探討證實(shí)。

甲狀腺微小乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移是一個(gè)多階段的，涉及多基因、多信號(hào)通路的復(fù)雜過程。本研究中CXCR7的表達(dá)與甲狀腺微小乳頭狀癌頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可能為甲狀腺微小乳頭狀癌患者轉(zhuǎn)移提供重要參考指標(biāo)。進(jìn)一步對(duì)CXCR7與甲狀腺微小乳頭狀癌生物學(xué)特征之間的關(guān)系進(jìn)行深入研究，可能對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有更深入的認(rèn)識(shí)，為甲狀腺微小乳頭狀癌的治療方法及病情判斷提供新的思路。盡管大多數(shù)的甲狀腺微小乳頭狀癌患者術(shù)后預(yù)后較好，但是對(duì)于CXCR7表達(dá)陽性者，需要進(jìn)行長期密切隨診觀察，使患者得到更合理、及時(shí)、有效的治療。