謝玉娜

福建省龍巖市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 (福建龍巖 364000)

艾滋病是一種具有危害范圍廣、傳播速度快、潛伏期長(zhǎng)等顯著特征的傳染病，人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)感染是其主要發(fā)病因素[1]。有效的監(jiān)控、診斷HIV對(duì)抑制病毒傳播、治療與判斷預(yù)后具有積極意義。檢測(cè)HIV抗體是診斷艾滋病的常用方式，可有效判斷機(jī)體是否感染HIV，適用于初篩量大的單位和地區(qū)[2]。目前，雙抗夾心法為初篩HIV抗體的主要方式，但該方式操作復(fù)雜，有較長(zhǎng)的檢測(cè)周期。電化學(xué)發(fā)光免疫(ECLIA)法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法為常用的兩種檢測(cè)HIV的方式。本研究選取2016年1月至2018年8月在我院進(jìn)行血液檢驗(yàn)的樣本9 830份，旨在分析ELISA法與ECLIA法檢測(cè)HIV的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2018年8月我院收集的血液檢驗(yàn)樣本9 830份，均在無(wú)菌下進(jìn)行操作，并保存于低溫冰箱中待檢。

1.2 方法

(1)ECLIA法。將被檢驗(yàn)品與一份生物抗生素抗HIV-1p24單克隆抗體共同孵育成抗原-抗體復(fù)合物，收集磁性粒子(用磁石)后清洗干凈，并完全去除未反應(yīng)物質(zhì)。將磁性粒子與ALP標(biāo)記的抗HIV抗原的HIV抗體發(fā)生特異性反應(yīng)，收集磁性粒子后清洗干凈，將未反應(yīng)物質(zhì)徹底去除。加入發(fā)光底物后實(shí)施攪拌，分散集聚的磁性粒子，加入清洗液，將磁性粒子上ALP以發(fā)光底物CDP-Star分解并發(fā)光，對(duì)其發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)，使用光強(qiáng)度以獲取待檢測(cè)物的HIV cutoff值。檢測(cè)儀器為SYS-MEX-HISCL-5000。檢測(cè)結(jié)果：A≥cutoff值為陽(yáng)性；A1時(shí)，結(jié)果評(píng)定為陽(yáng)性；<1時(shí)，判定為陰性。

1.3 臨床評(píng)價(jià)

對(duì)比ELISA法與ECLIA法檢測(cè)陽(yáng)性率，并與確證中心檢測(cè)結(jié)果對(duì)照，分析兩種方式檢測(cè)結(jié)果的符合情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陽(yáng)性檢出情況

9 830份樣本經(jīng)ELISA法初診陽(yáng)性28份，陽(yáng)性率為0.285%，ECLIA法初診陽(yáng)性26份，陽(yáng)性率為0.264%,兩者比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.446，P=0.504)。見(jiàn)表1。

表1 9 830份樣本經(jīng)ELISA法與ECLIA法檢測(cè)陽(yáng)性率比較

2.2 檢測(cè)結(jié)果的符合情況

ECLIA法臨界值分布中占比最高的為150～220，占陽(yáng)性標(biāo)本的80.77%(21/26)；ELISA法吸光度值分布中占比最高的為1.35～1.80，占陽(yáng)性標(biāo)本的53.57%(15/28)，兩種檢測(cè)方式比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.488，P=0.034)。見(jiàn)表2。

表2 ELISA法與ECLIA法檢測(cè)結(jié)果的符合情況比較

3 討論

HIV可誘導(dǎo)艾滋病的發(fā)生，傳播速度快且潛伏期長(zhǎng)，嚴(yán)重危害人類(lèi)生命健康。早期準(zhǔn)確診斷，制定合理的防控措施，是控制傳播、指導(dǎo)臨床用藥的最有力依據(jù)。檢測(cè)血清病毒抗體是國(guó)內(nèi)對(duì)HIV感染診斷的主要方式，血清HIV抗體為重要指標(biāo)，因大部分HIV感染可終身攜帶，體內(nèi)HIV難以清除[3]。因此，檢測(cè)HIV抗體可有效判斷機(jī)體是否存在HIV，早期實(shí)施干預(yù)手段，避免HIV傳播。

國(guó)內(nèi)大部分醫(yī)院常采用ELISA法檢測(cè)HIV，其需分離結(jié)合態(tài)的抗體或抗原與游離態(tài)的抗體，重復(fù)進(jìn)行加樣和洗板操作，誤差率高，且酶標(biāo)板存在孔間差異也會(huì)增加變異系數(shù)，操作步驟煩瑣，結(jié)果需1～2 h才可獲得，臨床判斷難度增大[4-5]。ECLIA法是在抗原或抗體上標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)或酶，待免疫反應(yīng)結(jié)束時(shí)，將氧化劑或酶底物加入，光電倍增管測(cè)量光強(qiáng)度，且光強(qiáng)度與復(fù)合體的濃度呈線性關(guān)系，利用其獲得待激測(cè)物品的含量[6]。ECLIA法綜合了磁性微珠包被技術(shù)、電化學(xué)發(fā)光技術(shù)、生物素-親和素技術(shù)等多種先進(jìn)技術(shù)，檢測(cè)HIV抗體的靈敏度得到了大幅度提高，確保了檢測(cè)的自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化，顯著減少了批內(nèi)、批間誤差，可獲得較為精確的檢測(cè)結(jié)果[7-8]。ECLIA法具有標(biāo)記物有效期長(zhǎng)、線性范圍寬、無(wú)有害污染、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，得到眾多學(xué)者的青睞。ELISA法與ECLIA法的OD/CO值和cutoff檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果，OD/CO值與臨界指數(shù)高低與確認(rèn)檢測(cè)結(jié)果符合率呈正比。ECLIA法是在封閉的流動(dòng)系統(tǒng)中實(shí)施檢測(cè)，可有效防止出現(xiàn)交叉感染，因操作簡(jiǎn)便與試劑的穩(wěn)定性高，20 min便能完成整個(gè)樣品的分析，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，與ELISA法相比，測(cè)定的線性范圍高3～4個(gè)數(shù)量級(jí)，可減少假陰性的發(fā)生，具有更好的檢測(cè)靈敏性、穩(wěn)定性及重復(fù)性，可批量上機(jī)實(shí)施自動(dòng)化分析檢測(cè)，可有效減少職業(yè)暴露，優(yōu)越性突出。與傳統(tǒng)抗體分析法相比，ECLIA法可提前6 h發(fā)現(xiàn)HIV感染，可使診斷窗口期大幅度縮短。但該方式也存在一定的不足，如檢測(cè)成本相對(duì)較高，難以在部分基礎(chǔ)醫(yī)院普及；陰性結(jié)果中可能存在HIV暴露或感染，需送確證中心診斷確診。

綜上所述，ELISA法與ECLIA法均是檢測(cè)HIV的有效方式，臨床可根據(jù)實(shí)際情況選擇適宜的檢測(cè)方式。