吳倩 周圍 董延江
摘要:通過對三種“瘦肉精”快速檢測技術(shù)(即膠體金免疫層析法、酶聯(lián)免疫吸附法和熒光定量免疫層析技術(shù)方法)及現(xiàn)階段遼寧省快速檢測配套技術(shù)的分析研究,關(guān)注國內(nèi)外新型檢測技術(shù),旨在拓展工作思路,完善遼寧省“瘦肉精”快速檢測技術(shù),為進(jìn)一步提高快速檢測技術(shù)水平和維護(hù)畜產(chǎn)品安全提供理論依據(jù)與參考。
關(guān)鍵詞:瘦肉精;快速檢測;畜產(chǎn)品;食品安全
食品安全關(guān)系到人民群眾的身體健康和生命安全,關(guān)系到經(jīng)濟(jì)健康發(fā)展和社會穩(wěn)定。對大多數(shù)人而言,“瘦肉精”不是一個陌生名詞,每年都會曝出相關(guān)事件,將肉類食品安全問題一次次地擺到大眾面前。有效檢測家畜飼養(yǎng)戶在飼養(yǎng)過程中是否使用“瘦肉精”是各級畜產(chǎn)品安全監(jiān)察部門的重要職責(zé)。本文通過對遼寧省“瘦肉精”快速檢測技術(shù)現(xiàn)狀展開研究,對比分析三種快速檢測技術(shù),對提升遼寧省畜產(chǎn)品“瘦肉精”檢測水平,優(yōu)化檢測技術(shù)方法,打擊與震懾有關(guān)違法行為,具有重要意義。
1遼寧省“瘦肉精”快速檢測工作開展情況
從2011年開始,遼寧省每年均對重點(diǎn)區(qū)域進(jìn)行監(jiān)督監(jiān)測,并以每年5%~1 0%逐年遞增檢測頻次,監(jiān)測區(qū)域也從重點(diǎn)區(qū)域向遼寧省所有規(guī)模養(yǎng)殖企業(yè)全覆蓋推進(jìn)。隨著監(jiān)督監(jiān)測批次逐年遞增,監(jiān)督抽檢人員已熟練掌握現(xiàn)場抽取動物尿液、快速檢測卡使用及抽樣單規(guī)范化填寫等業(yè)務(wù)工作,工作認(rèn)真嚴(yán)謹(jǐn),“瘦肉精”違法行為也在逐年下降。2013~2018年遼寧省“瘦肉精”檢測批次及案件查處數(shù)見圖1。因此,“瘦肉精”的日??焖佻F(xiàn)場檢測是“瘦肉精”監(jiān)督監(jiān)測行之有效的技術(shù)方法,對“瘦肉精”違法行為充分發(fā)揮震懾作用。
2現(xiàn)階段遼寧省采用的幾種“瘦肉精”快速檢測方法及配套技術(shù)
2.1膠體金免疫層析法
免疫膠體金檢測試劑實(shí)際上是免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)和抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合而形成的一種應(yīng)用形式,相比ELISA試劑,除標(biāo)記物不同外,同樣服從于抗原抗體反應(yīng)的特性。此種檢測方法具有方便使用,操作簡單,業(yè)務(wù)人員無需經(jīng)過特殊培訓(xùn)等優(yōu)點(diǎn)。可短時間獲得檢測結(jié)果,一般5~10分鐘即可得出初步的定性結(jié)論。相比而言,其生產(chǎn)成本和檢測成本均較低。目前使用比較廣泛的是單一“瘦肉精”的快速檢測卡,近年來多合一的快速板也逐漸投入使用。
同時,經(jīng)過了幾年的檢測和陽性確證,我們發(fā)現(xiàn)使用快速檢測試紙檢測,存在幾方面的不足。一是出現(xiàn)假陽性的較多,工作量提升,同時給工作帶來諸多問題;二是只有當(dāng)標(biāo)記物膠體金顆粒集聚到一定量時,才能觀察到膠體金的紅色條帶,檢測靈敏度低,難以達(dá)到國家要求;三是采用肉眼判讀檢測結(jié)果,當(dāng)檢測線顯色比較模糊時,可能引起誤判或漏判。
2.2酶聯(lián)免疫吸附法
這種技術(shù)目前國內(nèi)已經(jīng)比較成熟,市場上有大量商品化的檢測試劑盒,一般縣級的檢測機(jī)構(gòu)均可進(jìn)行檢測。該技術(shù)在保留膠體金免疫層析技術(shù)操作簡便、檢測快速、便攜性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)外,還通過熒光示蹤增強(qiáng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了檢測結(jié)果的精確定量,而傳統(tǒng)的膠體金免疫層析試紙條只能進(jìn)行初步定性。
但該檢測法在現(xiàn)場快速檢測中就體現(xiàn)出其局限性,一是檢測過程需有經(jīng)驗的實(shí)驗室人員使用酶標(biāo)儀儀器進(jìn)行操作,且需對樣品進(jìn)行預(yù)處理,檢測繁瑣、時間較長;二是對試劑的選擇性高,以半定量為主,不能同時分析多種成分,對結(jié)構(gòu)類似的化合物有一定程度的交叉反應(yīng),分析分子量很小的化合物或很不穩(wěn)定的化合物有一定的困難,也易產(chǎn)生假陽性;三是價格較膠體金測試紙昂貴很多。
2.5熒光定量免疫層析技術(shù)
李懷明建立了鹽酸克倫特羅熒光微球免疫層析試紙條定量檢測方法,通過實(shí)際樣品分析鹽酸克倫特羅熒光微球試紙條定量分析結(jié)果與相應(yīng)的ELSA試劑盒具有較好的相關(guān)性。該技術(shù)與傳統(tǒng)快速檢測技術(shù)性能比較,具有一定優(yōu)勢:一是靈敏度更高,檢測信號具有較高的信噪比,更高的信號檢測量和檢測靈敏度;二是檢測范圍更寬,與傳統(tǒng)光度百分率分析及光密度掃描分析技術(shù)不同,該技術(shù)熒光直接激發(fā)發(fā)光,熒光信號強(qiáng)度與熒光微球數(shù)量呈直線相關(guān),同時避免酶催化發(fā)光催化效率及底物量限制等問題,定量范圍與反應(yīng)體系內(nèi)參與反應(yīng)的特異性蛋白量直接相關(guān);三是價格低廉,與傳統(tǒng)定量檢測技術(shù)如酶聯(lián)免疫吸附法相比,該技術(shù)具有檢測快速、價格低廉等優(yōu)點(diǎn)。但就反應(yīng)時間和造價方面與膠體金免疫層析法相比,不如膠體金反應(yīng)迅速、價格低廉。而性能指標(biāo)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它快速檢測技術(shù),接近全自動化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)水平,該技術(shù)的其它缺點(diǎn)還需在試驗推廣過程中不斷總結(jié)發(fā)現(xiàn)。
2.4遼寧省快速檢測配套技術(shù)
一是遼寧省畜產(chǎn)品安全監(jiān)察所設(shè)計研發(fā)了新型家畜尿液采集裝置,可以更加方便、高效的采集家畜尿液;二是在全國率先研制出便攜式“瘦肉精”快速檢測恒溫箱,解決了“瘦肉精”快速檢測卡在低溫情況下檢測結(jié)果不準(zhǔn)確問題;三是試點(diǎn)運(yùn)用熒光定量免疫層析技術(shù)進(jìn)行現(xiàn)場快速檢測。
3近年來新型檢測技術(shù)
我國在分析技術(shù)上,王培龍等采用分子印跡和質(zhì)譜分析,建立家畜尿液中痕量β受體激動劑類藥物快速篩選和確證分析方法。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所,采用上轉(zhuǎn)發(fā)光法技術(shù)(uPT),研發(fā)了有毒有害物質(zhì)高靈敏度速測系統(tǒng)以及克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇等3種“瘦肉精”的配套試劑,性能優(yōu)勢明顯。顏毅堅等研發(fā)出離子遷移譜儀可快速檢驗家畜毛發(fā)、尿液和飼料中的鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林,進(jìn)行定性。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所研發(fā)了利用反芻動物毛發(fā)檢測“瘦肉精”的方法,監(jiān)管技術(shù)實(shí)現(xiàn)突破。李志成利用表面增強(qiáng)拉曼光譜快速分析D受體激動劑,建立靈敏度高、簡單、快速的D受體激動劑檢測新方法以滿足監(jiān)管,特別是現(xiàn)場快速檢測需要。而外國學(xué)者,Lin等設(shè)計制作一種規(guī)模集成競爭免疫微流控芯片,可實(shí)現(xiàn)瘦肉精的高通量、快速、自動化分析。zhang等研制了基于納米金顏色變化的克倫特羅快速比色傳感器。He等研制一種用于克倫特羅測定無標(biāo)記電子學(xué)免疫傳感器。
綜上所述,遼寧省畜產(chǎn)品“瘦肉精”檢測技術(shù)較為有效,達(dá)到國家要求,但仍存在假陽性率高、檢測靈敏度低、肉眼判讀易誤判或漏判、檢測繁瑣或時間較長等情況,需進(jìn)一步完善。遼寧省畜產(chǎn)品安全監(jiān)察所現(xiàn)有的打擊“瘦肉精”違法行為配套技術(shù)如家畜尿液采集裝置、便捷式“瘦肉精”快速檢測恒溫箱均達(dá)到國內(nèi)領(lǐng)先水平,具有廣泛推廣價值。而近年來的一些先進(jìn)檢測技術(shù)仍需要特定的儀器或試劑,尚處于實(shí)驗室階段,還未推廣使用。
今后遼寧省還應(yīng)從加快畜產(chǎn)品追溯體系建設(shè)、加強(qiáng)畜產(chǎn)品安全源頭監(jiān)管、健全法律法規(guī)、規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)體系及繼續(xù)推進(jìn)和完善畜產(chǎn)品安全監(jiān)管行政問責(zé)制度等方面進(jìn)一步加強(qiáng)“瘦肉精”監(jiān)督管理。各級機(jī)構(gòu)要不斷健全本級畜產(chǎn)品安全應(yīng)急處置預(yù)案,適時組織“瘦肉精”應(yīng)急演練,明確職責(zé),熟悉流程。同時,開展輿情監(jiān)測,正確研判輿情,及時報送信息。嚴(yán)格落實(shí)“瘦肉精”監(jiān)督檢查機(jī)制,有效開展“瘦肉精”監(jiān)測,保持高壓嚴(yán)打態(tài)勢。